DNS Annealing Temperatūras Kalkulators

Ievads DNS Annealing Temperatūrā

DNS annealing temperatūras kalkulators ir būtisks rīks molekulārajā bioloģijā, ģenētikā un pētniecībā, kas strādā ar polimerāzes ķēdes reakciju (PCR). Annealing temperatūra attiecas uz optimālo temperatūru, kurā DNS primāri piesaistās savām komplementārajām secībām PCR laikā. Šis kritiskais parametrs būtiski ietekmē PCR reakciju specifiku un efektivitāti, tāpēc precīza aprēķināšana ir vitāli svarīga veiksmīgiem eksperimenti.

Mūsu DNS annealing temperatūras kalkulators nodrošina vienkāršu, bet jaudīgu veidu, kā noteikt optimālo annealing temperatūru jūsu DNS primāriem, pamatojoties uz to secības īpašībām. Analizējot tādus faktorus kā GC saturs, secības garums un nukleotīdu sastāvs, šis kalkulators sniedz precīzas temperatūras ieteikumus, lai optimizētu jūsu PCR protokolus.

Neatkarīgi no tā, vai jūs projektējat primārus gēnu amplifikācijai, mutāciju noteikšanai vai DNS sekvencēšanai, sapratne un pareiza annealing temperatūras iestatīšana ir būtiska eksperimenta panākumiem. Šis kalkulators novērš minējumus un palīdz jums sasniegt konsekventākus un uzticamākus PCR rezultātus.

Zinātne aiz Annealing Temperatūras

DNS Primāru Annealing Izpratne

DNS annealing ir process, kurā vienas ķēdes DNS primāri piesaistās savām komplementārajām secībām uz veidnes DNS. Šis hibridizācijas solis notiek katras PCR cikla otrajā fāzē, starp denaturāciju (ķēžu atdalīšanu) un pagarināšanu (DNS sintēzi).

Annealing temperatūra tieši ietekmē:

Specifiku: Pārāk zemas temperatūras ļauj nespecifiskai piesaistei, kas noved pie nevēlamiem produktiem
Efektivitāti: Pārāk augstas temperatūras novērš pareizu primāru piesaisti, samazinot ražošanu
Reprodukciju: Konsekventas annealing temperatūras nodrošina uzticamus rezultātus starp ekspertiem

Optimālā annealing temperatūra galvenokārt ir atkarīga no primāra nukleotīdu sastāva, īpaši uzsverot guanīna (G) un citozīna (C) bāzu proporciju, ko sauc par GC saturu.

DNS ķēdes atdalās Primāri piesaistās veidnei DNS polimerāze pagarinās

Primārs

GC Satura Loma

GC bāzu pāri veido trīs ūdeņraža saites, kamēr adenīna (A) un timīna (T) pāri veido tikai divas. Šī atšķirība padara GC bagātīgas secības termiski stabilākas, prasa augstākas temperatūras, lai denaturētu un annealētu. Galvenie punkti par GC saturu:

Augstāks GC saturs = spēcīgāka piesaiste = augstāka annealing temperatūra
Zemāks GC saturs = vājāka piesaiste = zemāka annealing temperatūra
Lielākā daļa primāru satur GC saturu no 40-60% optimālai veiktspējai
Ekstremāls GC saturs (zem 30% vai virs 70%) var prasīt īpašas PCR apstākļus

Primāra Garuma Apsvērumi

Primāra garums arī būtiski ietekmē annealing temperatūru:

Īsāki primāri (15-20 nukleotīdi) parasti prasa zemākas annealing temperatūras
Garāki primāri (25-35 nukleotīdi) parasti prasa augstākas annealing temperatūras
Lielākā daļa standarta PCR primāru ir no 18-30 nukleotīdiem garumā
Ļoti īsi primāri (<15 nukleotīdi) var trūkt specifikas neatkarīgi no annealing temperatūras

Annealing Temperatūras Aprēķina Formula

Mūsu kalkulators izmanto plaši pieņemtu formulu DNS primāru annealing temperatūras (Tm) novērtēšanai:

$Tm = 64.9 + 41 \times \frac{(GC\% - 16.4)}{N}$

Kur:

Tm = Annealing temperatūra grādos pēc Celsija (°C)
GC% = G un C nukleotīdu procentuālais daudzums primāra secībā
N = Primāra secības kopējais garums (nukleotīdu skaits)

Šī formula, kas balstīta uz tuvāko kaimiņu termodinamikas modeli, sniedz uzticamu novērtējumu primāriem, kas ir no 18-30 nukleotīdiem ar standarta GC saturu (40-60%).

Piemēra Aprēķins

Primāram ar secību ATGCTAGCTAGCTGCTAGC:

Garums (N) = 19 nukleotīdi
GC skaits = 9 (G vai C nukleotīdi)
GC% = (9/19) × 100 = 47.4%
Tm = 64.9 + 41 × (47.4 - 16.4) / 19
Tm = 64.9 + 41 × 31 / 19
Tm = 64.9 + 41 × 1.63
Tm = 64.9 + 66.83
Tm = 66.83°C

Tomēr praktiskām PCR lietojumprogrammām faktiskā annealing temperatūra, ko izmanto, parasti ir 5-10°C zem aprēķinātās Tm, lai nodrošinātu efektīvu primāru piesaisti. Mūsu piemērā ar aprēķinātu Tm 66.83°C ieteicamā annealing temperatūra PCR būtu aptuveni 56.8-61.8°C.

Kā Lietot DNS Annealing Temperatūras Kalkulatoru

Lietot mūsu DNS annealing temperatūras kalkulatoru ir vienkārši:

Ievadiet savu DNS primāra secību ievades laukā (tikai A, T, G un C rakstzīmes ir atļautas)
Kalkulators automātiski validēs jūsu secību, lai nodrošinātu, ka tā satur tikai derīgus DNS nukleotīdus
Kad ir ievadīta derīga secība, kalkulators nekavējoties parādīs:
- Secības garums
- GC satura procentuālais daudzums
- Aprēķinātā annealing temperatūra
Jūs varat kopēt rezultātus, izmantojot kopēšanas pogu, lai viegli atsauktos
Jaunai aprēķināšanai vienkārši ievadiet citu primāra secību

Kalkulators nodrošina reāllaika atgriezenisko saiti, ļaujot jums ātri pārbaudīt dažādus primāru dizainus un salīdzināt to annealing temperatūras.

Ieteikumi Optimāliem Rezultātiem

Ievadiet pilnu primāra secību bez atstarpēm vai īpašām rakstzīmēm
Primāru pāriem aprēķiniet katru primāru atsevišķi un izmantojiet zemāko temperatūru
Apsveriet iespēju izmantot aprēķināto temperatūru kā sākumpunktu, pēc tam optimizējiet, veicot eksperimentālos testus
Degenerētiem primāriem aprēķiniet, izmantojot visbagātākās GC iespējamās kombinācijas

Praktiskās Lietojumprogrammas

PCR Optimizācija

Galvenā annealing temperatūras aprēķina lietojumprogramma ir PCR optimizācija. Pareiza annealing temperatūras izvēle palīdz:

Palielināt amplifikācijas specifiku
Samazināt primāru-dimera veidošanos
Minimizēt nespecifisku amplifikāciju
Uzlabot vēlamo produktu ražošanu
Palielināt reprodukciju starp ekspertiem

Daudzas PCR neveiksmes var attiecināt uz nepiemērotām annealing temperatūrām, padarot šo aprēķinu par būtisku soli eksperimenta dizainā.

Primāru Dizains

Projektējot primārus, annealing temperatūra ir kritisks apsvērums:

Mērķējiet uz primāru pāriem ar līdzīgām annealing temperatūrām (5°C robežās viens no otra)
Projektējiet primārus ar mērenu GC saturu (40-60%) paredzamai annealing uzvedībai
Izvairieties no ekstremāla GC satura 3' galā primāriem
Apsveriet iespēju pievienot GC klipus (G vai C nukleotīdi) 3' galā, lai uzlabotu piesaistes stabilitāti

Specializētas PCR Tehnikas

Dažādas PCR variācijas var prasīt specifiskas pieejas annealing temperatūrai:

PCR Tehnika	Annealing Temperatūras Apsvērums
Touchdown PCR	Sākt ar augstu temperatūru un pakāpeniski samazināt
Nested PCR	Iekšējie un ārējie primāri var prasīt atšķirīgas temperatūras
Multiplex PCR	Visām primārām jābūt līdzīgām annealing temperatūrām
Hot-start PCR	Augstāka sākotnējā annealing temperatūra, lai samazinātu nespecifisko piesaisti
Reāllaika PCR	Precīza temperatūras kontrole konsekventai kvantificēšanai

Alternatīvas Aprēķinu Metodes

Lai gan mūsu kalkulators izmanto plaši pieņemtu formulu, pastāv vairākas alternatīvas metodes annealing temperatūras aprēķināšanai:

Pamati Formula: Tm = 2(A+T) + 4(G+C)
- Vienkārša, bet mazāk precīza garākām primārām
- Piemērota ātriem novērtējumiem īsām primārām
Wallace Noteikums: Tm = 64.9 + 41 × (GC% - 16.4) / N
- Formula, ko izmanto mūsu kalkulatorā
- Labs vienkāršības un precizitātes līdzsvars
Tuvāko Kaimiņu Metode: Izmanto termodinamikas parametrus
- Visprecīzākā prognozēšanas metode
- Ņem vērā secības kontekstu, ne tikai sastāvu
- Prasa sarežģītus aprēķinus vai specializētu programmatūru
Sāls Pielāgota Formula: Iekļauj sāls koncentrācijas ietekmi
- Tm = 81.5 + 16.6 × log10[Na+] + 0.41 × (GC%) - 600/N
- Noderīga nestandarta buferu apstākļiem

Katrā metodē ir savas stiprās un vājās puses, bet Wallace noteikums sniedz labu līdzsvaru starp precizitāti un vienkāršību lielākajai daļai standarta PCR lietojumu.

Faktori, Kas Ietekmē Annealing Temperatūru

Bufera Sastāvs

PCR bufera jonu stiprums būtiski ietekmē annealing temperatūru:

Augstāka sāls koncentrācija stabilizē DNS dupleksus, efektīvi paaugstinot annealing temperatūru
Magnija koncentrācija īpaši ietekmē primāru piesaisti
Specializēti buferi GC bagātīgām veidnēm var mainīt optimālās annealing temperatūras

DNS Veidnes Sarežģītība

Veidnes DNS daba var ietekmēt annealing uzvedību:

Genomiskā DNS var prasīt augstāku stingrību (augstāku annealing temperatūru)
Plazmīdu vai attīrītu veidņu parasti labi darbojas ar standarta aprēķinātām temperatūrām
GC bagātīgas reģioni var prasīt augstākas denaturācijas temperatūras, bet zemākas annealing temperatūras

PCR Piederumi

Dažādi piederumi var mainīt annealing uzvedību:

DMSO un betaīns palīdz samazināt sekundārās struktūras, potenciāli samazinot efektīvo annealing temperatūru
Formamīds samazina kušanas temperatūru
BSA un citi stabilizējoši līdzekļi var prasīt temperatūras pielāgojumus

Vēsturiskā Konteksts

PCR un Annealing Temperatūras Izpratnes Evolūcija

DNS annealing temperatūras koncepts kļuva būtisks ar PCR izstrādi, ko veica Kary Mullis 1983. gadā. Agrīnie PCR protokoli izmantoja empīriskus pieejas, lai noteiktu annealing temperatūras, bieži veicot izmēģinājumus un kļūdas.

Galvenie notikumi annealing temperatūras aprēķināšanā:

1960. gadi: Pamata izpratne par DNS hibridizācijas kinētiku izveidota
1970. gadi: Vienkāršu formulu izstrāde, kas balstīta uz GC saturu
1980. gadi: PCR izstrāde un annealing temperatūras nozīmības atzīšana
1990. gadi: Tuvāko kaimiņu termodinamikas modeļu izstrāde
2000. gadi: Datoru rīku izstrāde precīzai annealing temperatūras prognozēšanai
Mūsdienas: Mašīnmācīšanās pieeju integrācija sarežģītu veidņu prognozēšanai

Annealing temperatūras prognozēšanas precizitāte ir ievērojami uzlabojusies laika gaitā, veicinot PCR balstītu tehniku plašu pieņemšanu un panākumus molekulārajā bioloģijā.

Koda Piemēri Annealing Temperatūras Aprēķināšanai

Python Izpilde

1def calculate_gc_content(sequence):
2    """Aprēķināt GC satura procentuālo daudzumu DNS secībā."""
3    sequence = sequence.upper()
4    gc_count = sequence.count('G') + sequence.count('C')
5    return (gc_count / len(sequence)) * 100 if len(sequence) > 0 else 0
6
7def calculate_annealing_temperature(sequence):
8    """Aprēķināt annealing temperatūru, izmantojot Wallace noteikumu."""
9    sequence = sequence.upper()
10    if not sequence or not all(base in 'ATGC' for base in sequence):
11        return 0
12        
13    gc_content = calculate_gc_content(sequence)
14    length = len(sequence)
15    
16    # Wallace noteikuma formula
17    tm = 64.9 + 41 * (gc_content - 16.4) / length
18    
19    return round(tm * 10) / 10  # Noapaļot līdz 1 decimāldaļai
20
21# Piemēra izmantošana
22primer_sequence = "ATGCTAGCTAGCTGCTAGC"
23gc_content = calculate_gc_content(primer_sequence)
24tm = calculate_annealing_temperature(primer_sequence)
25
26print(f"Secība: {primer_sequence}")
27print(f"Garums: {len(primer_sequence)}")
28print(f"GC Saturs: {gc_content:.1f}%")
29print(f"Annealing Temperatūra: {tm:.1f}°C")
30

JavaScript Izpilde

1function calculateGCContent(sequence) {
2  if (!sequence) return 0;
3  
4  const upperSequence = sequence.toUpperCase();
5  const gcCount = (upperSequence.match(/[GC]/g) || []).length;
6  return (gcCount / upperSequence.length) * 100;
7}
8
9function calculateAnnealingTemperature(sequence) {
10  if (!sequence) return 0;
11  
12  const upperSequence = sequence.toUpperCase();
13  // Validēt DNS secību (tikai A, T, G, C atļauts)
14  if (!/^[ATGC]+$/.test(upperSequence)) return 0;
15  
16  const length = upperSequence.length;
17  const gcContent = calculateGCContent(upperSequence);
18  
19  // Wallace noteikuma formula
20  const annealingTemp = 64.9 + (41 * (gcContent - 16.4)) / length;
21  
22  // Noapaļot līdz 1 decimāldaļai
23  return Math.round(annealingTemp * 10) / 10;
24}
25
26// Piemēra izmantošana
27const primerSequence = "ATGCTAGCTAGCTGCTAGC";
28const gcContent = calculateGCContent(primerSequence);
29const tm = calculateAnnealingTemperature(primerSequence);
30
31console.log(`Secība: ${primerSequence}`);
32console.log(`Garums: ${primerSequence.length}`);
33console.log(`GC Saturs: ${gcContent.toFixed(1)}%`);
34console.log(`Annealing Temperatūra: ${tm.toFixed(1)}°C`);
35

R Izpilde

1calculate_gc_content <- function(sequence) {
2  if (nchar(sequence) == 0) return(0)
3  
4  sequence <- toupper(sequence)
5  gc_count <- sum(strsplit(sequence, "")[[1]] %in% c("G", "C"))
6  return((gc_count / nchar(sequence)) * 100)
7}
8
9calculate_annealing_temperature <- function(sequence) {
10  if (nchar(sequence) == 0) return(0)
11  
12  sequence <- toupper(sequence)
13  # Validēt DNS secību
14  if (!all(strsplit(sequence, "")[[1]] %in% c("A", "T", "G", "C"))) return(0)
15  
16  gc_content <- calculate_gc_content(sequence)
17  length <- nchar(sequence)
18  
19  # Wallace noteikuma formula
20  tm <- 64.9 + 41 * (gc_content - 16.4) / length
21  
22  return(round(tm, 1))
23}
24
25# Piemēra izmantošana
26primer_sequence <- "ATGCTAGCTAGCTGCTAGC"
27gc_content <- calculate_gc_content(primer_sequence)
28tm <- calculate_annealing_temperature(primer_sequence)
29
30cat(sprintf("Secība: %s\n", primer_sequence))
31cat(sprintf("Garums: %d\n", nchar(primer_sequence)))
32cat(sprintf("GC Saturs: %.1f%%\n", gc_content))
33cat(sprintf("Annealing Temperatūra: %.1f°C\n", tm))
34

Excel Formula

1' Aprēķināt GC saturu šūnā A1
2=SUM(LEN(A1)-LEN(SUBSTITUTE(UPPER(A1),"G",""))-LEN(SUBSTITUTE(UPPER(A1),"C","")))/LEN(A1)*100
3
4' Aprēķināt annealing temperatūru, izmantojot Wallace noteikumu
5=64.9+41*((SUM(LEN(A1)-LEN(SUBSTITUTE(UPPER(A1),"G",""))-LEN(SUBSTITUTE(UPPER(A1),"C","")))/LEN(A1)*100)-16.4)/LEN(A1)
6

Biežāk Uzdotie Jautājumi (BUJ)

Kas ir DNS annealing temperatūra?

DNS annealing temperatūra ir optimālā temperatūra, kurā DNS primāri specifiski piesaistās savām komplementārajām secībām PCR laikā. Tas ir kritisks parametrs, kas ietekmē PCR reakciju specifiku un efektivitāti. Ideālā annealing temperatūra ļauj primāriem piesaistīties tikai savām paredzētajām mērķa secībām, minimizējot nespecifisku amplifikāciju.

Kā GC saturs ietekmē annealing temperatūru?

GC saturs būtiski ietekmē annealing temperatūru, jo G-C bāzu pāri veido trīs ūdeņraža saites, kamēr A-T pāri veido tikai divas. Augstāks GC saturs noved pie spēcīgākas piesaistes un prasa augstākas annealing temperatūras. Katrs 1% pieaugums GC saturā parasti paaugstina kušanas temperatūru par aptuveni 0.4°C, kas savukārt ietekmē optimālo annealing temperatūru.

Kas notiek, ja es izmantoju nepareizu annealing temperatūru?

Nepareizas annealing temperatūras izmantošana var novest pie vairākiem PCR problēmām:

Pārāk zema: nespecifiska piesaiste, vairāki joslas, primāru-dimera veidošanās un fona amplifikācija
Pārāk augsta: slikta vai nav amplifikācijas, jo primāri nevar pareizi piesaistīties
Optimāla: tīra, specifiska mērķa secības amplifikācija

Vai man jāizmanto precīzi aprēķinātā annealing temperatūra?

Aprēķinātā annealing temperatūra kalpo kā sākumpunkts. Praksē optimālā annealing temperatūra parasti ir 5-10°C zem aprēķinātās kušanas temperatūras (Tm). Grūtām veidnēm vai primāriem bieži ir izdevīgi veikt temperatūras gradienta PCR, lai empīriski noteiktu labāko annealing temperatūru.

Kā es varu aprēķināt annealing temperatūru primāru pāriem?

Primāru pāriem aprēķiniet Tm katram primāram atsevišķi. Parasti izmantojiet annealing temperatūru, pamatojoties uz primāru ar zemāko Tm, lai nodrošinātu, ka abi primāri efektīvi piesaistās. Ideālā gadījumā projektējiet primāru pārus ar līdzīgām Tm vērtībām (5°C robežās viens no otra) optimālai PCR veiktspējai.

Vai es varu izmantot šo kalkulatoru degenerētiem primāriem?

Šis kalkulators ir paredzēts standarta DNS primāriem, kas satur tikai A, T, G un C nukleotīdus. Degenerētiem primāriem, kas satur neskaidras bāzes (piemēram, R, Y, N), kalkulators var nesniegt precīzus rezultātus. Šādos gadījumos apsveriet iespēju aprēķināt Tm, izmantojot visbagātākās GC iespējamās kombinācijas, lai noteiktu temperatūras diapazonu.

Kā primāra garums ietekmē annealing temperatūru?

Primāra garums apgriezti ietekmē GC satura ietekmi uz annealing temperatūru. Garākām primārām GC satura ietekme tiek atšķaidīta pa vairākām nukleotīdiem. Formula ņem vērā šo faktoru, dalot GC satura faktoru ar primāra garumu. Parasti garākas primāras ir stabilākas un var izturēt augstākas annealing temperatūras.

Kāpēc dažādi kalkulatori sniedz atšķirīgas annealing temperatūras?

Atšķirīgi annealing temperatūras kalkulatori izmanto dažādas formulas un algoritmus, tostarp:

Pamata GC satura formulas
Wallace noteikumu (ko izmanto šajā kalkulatorā)
Tuvāko kaimiņu termodinamikas modeļus
Sāls pielāgotus aprēķinus

Šīs atšķirīgās pieejas var novest pie temperatūras variācijām par 5-10°C vienai un tai pašai primārai secībai. Wallace noteikums sniedz labu līdzsvaru starp precizitāti un vienkāršību lielākajai daļai standarta PCR lietojumu.

Kā PCR piederumi ietekmē annealing temperatūru?

Parasti PCR piederumi var ievērojami mainīt efektīvo annealing temperatūru:

DMSO: Parasti samazina Tm par 5.5-6.0°C uz 10% DMSO
Betaīns: Samazina Tm, izlīdzinot GC un AT bāzu pāru ieguldījumu
Formamīds: Samazina Tm aptuveni par 2.4-2.9°C uz 10% formamīda
Glicerīns: Var palielināt vai samazināt Tm atkarībā no koncentrācijas

Izmantojot šos piederumus, jums var būt nepieciešams attiecīgi pielāgot savu annealing temperatūru.

Vai es varu izmantot šo kalkulatoru qPCR/reāllaika PCR?

Jā, šo kalkulatoru var izmantot qPCR primāru dizainam. Tomēr reāllaika PCR bieži izmanto īsākus ampliconus un var prasīt stingrākus primāru dizaina kritērijus. Lai iegūtu optimālus qPCR rezultātus, apsveriet papildu faktorus, piemēram, amplicona garumu (ideāli 70-150 bp) un sekundāro struktūru veidošanos.

Atsauces

Rychlik W, Spencer WJ, Rhoads RE. Optimizing the annealing temperature for DNA amplification in vitro. Nucleic Acids Res. 1990;18(21):6409-6412. doi:10.1093/nar/18.21.6409
SantaLucia J Jr. A unified view of polymer, dumbbell, and oligonucleotide DNA nearest-neighbor thermodynamics. Proc Natl Acad Sci U S A. 1998;95(4):1460-1465. doi:10.1073/pnas.95.4.1460
Lorenz TC. Polymerase chain reaction: basic protocol plus troubleshooting and optimization strategies. J Vis Exp. 2012;(63):e3998. doi:10.3791/3998
Innis MA, Gelfand DH, Sninsky JJ, White TJ, eds. PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications. Academic Press; 1990.
Mullis KB. The unusual origin of the polymerase chain reaction. Sci Am. 1990;262(4):56-65. doi:10.1038/scientificamerican0490-56
Wallace RB, Shaffer J, Murphy RF, Bonner J, Hirose T, Itakura K. Hybridization of synthetic oligodeoxyribonucleotides to phi chi 174 DNA: the effect of single base pair mismatch. Nucleic Acids Res. 1979;6(11):3543-3557. doi:10.1093/nar/6.11.3543
Owczarzy R, Moreira BG, You Y, Behlke MA, Walder JA. Predicting stability of DNA duplexes in solutions containing magnesium and monovalent cations. Biochemistry. 2008;47(19):5336-5353. doi:10.1021/bi702363u
Dieffenbach CW, Lowe TM, Dveksler GS. General concepts for PCR primer design. PCR Methods Appl. 1993;3(3):S30-S37. doi:10.1101/gr.3.3.s30

Secinājums

DNS annealing temperatūras kalkulators sniedz vērtīgu rīku molekulārajai bioloģijai un pētniekiem, kas strādā ar PCR. Precīzi nosakot optimālo annealing temperatūru DNS primāriem, jūs varat ievērojami uzlabot savu PCR eksperimentu specifiku, efektivitāti un reproducējamību.

Atcerieties, ka, lai gan kalkulators sniedz zinātniski pamatotu sākumpunktu, PCR optimizācija bieži prasa empīriskus testus. Apsveriet aprēķināto annealing temperatūru kā ceļvedi un esiet gatavi pielāgot to, pamatojoties uz eksperimentālajiem rezultātiem.

Sarežģītām veidnēm, izaicinošām amplifikācijām vai specializētām PCR lietojumprogrammām var būt nepieciešams veikt temperatūras gradienta PCR vai izpētīt alternatīvas aprēķinu metodes. Tomēr lielākajai daļai standarta PCR lietojumu šis kalkulators piedāvā uzticamu pamatu veiksmīgiem ekspertiem.

Izmēģiniet mūsu DNS annealing temperatūras kalkulatoru šodien, lai uzlabotu savus PCR protokolus un sasniegtu konsekventākus, specifiskus amplifikācijas rezultātus savā molekulārās bioloģijas pētniecībā.

DNS pielipšanas temperatūras kalkulators PCR primāru dizainam

DNS saistīšanās temperatūras kalkulators

Par saistīšanās temperatūru

Dokumentācija