Calculator de Concentrație ADN

Introducere

Calculatorul de Concentrație ADN este un instrument esențial pentru biologii moleculare, geneticieni și tehnicienii de laborator care au nevoie să determine cu acuratețe concentrația de ADN din probele lor. Măsurarea concentrației ADN este o procedură fundamentală în laboratoarele de biologie moleculară, servind ca un pas critic de control al calității înainte de a continua cu aplicații ulterioare, cum ar fi PCR, secvențierea, clonarea și alte tehnici moleculare. Acest calculator folosește principii spectrofotometrice pentru a calcula concentrația de ADN pe baza absorbției UV la 260nm (A260), aplicând factorul de conversie standard și ținând cont de orice diluție a probei originale.

Calculatorul nostru prietenos cu utilizatorul simplifică procesul de determinare atât a concentrației (ng/μL), cât și a cantității totale de ADN din proba dumneavoastră, eliminând necesitatea calculilor manuali și reducând riscul de erori matematice. Indiferent dacă pregătiți probe pentru secvențiere de nouă generație, cuantificând preparate de plasmid sau evaluând randamentele extracției de ADN genomic, acest instrument oferă rezultate rapide și fiabile pentru a susține cercetările și fluxurile de lucru de diagnosticare.

Cum se calculează concentrația ADN

Principiul de bază

Calculul concentrației ADN se bazează pe Legea Beer-Lambert, care afirmă că absorbția unei soluții este direct proporțională cu concentrația speciilor absorbante din soluție și lungimea căii luminii prin soluție. Pentru ADN cu două lanțuri, o absorbție de 1.0 la 260nm (A260) într-o cuvetă cu lungimea căii de 1cm corespunde unei concentrații de aproximativ 50 ng/μL.

Formula

Concentrația ADN se calculează folosind următoarea formulă:

$\text{Concentrația ADN (ng/μL)} = A_{260} \times 50 \times \text{Factor de Diluție}$

Unde:

• A260 este citirea absorbției la 260nm
• 50 este factorul de conversie standard pentru ADN cu două lanțuri (50 ng/μL pentru A260 = 1.0)
• Factor de Diluție este factorul prin care proba originală a fost diluată pentru măsurare

Cantitatea totală de ADN din probă poate fi apoi calculată prin:

$\text{Total ADN (μg)} = \frac{\text{Concentrația (ng/μL)} \times \text{Volumul (μL)}}{1000}$

Înțelegerea Variabilelor

1. Absorbția la 260nm (A260):

   • Aceasta este măsurarea cantității de lumină UV la lungimea de undă de 260nm care este absorbită de proba de ADN
   • Nucleotidele ADN (în special bazele azotate) absorb lumina UV cu un vârf de absorbție la 260nm
   • Cu cât absorbția este mai mare, cu atât mai mult ADN este prezent în soluție

2. Factorul de Conversie (50):

   • Factorul de conversie standard de 50 ng/μL este specific pentru ADN cu două lanțuri
   • Pentru ADN cu un singur lanț, factorul este 33 ng/μL
   • Pentru ARN, factorul este 40 ng/μL
   • Pentru oligonucleotide, factorul variază în funcție de secvență

3. Factorul de Diluție:

   • Dacă proba a fost diluată înainte de măsurare (de exemplu, 1 parte probă la 9 părți tampon = factor de diluție de 10)
   • Calculat ca: (Volumul Probe + Volumul Diluant) ÷ Volumul Probe
   • Folosit pentru a determina concentrația în proba originală, nediluată

4. Volumul:

   • Volumul total al soluției de ADN în microlitri (μL)
   • Folosit pentru a calcula cantitatea totală de ADN din probă

Cum să folosiți acest calculator

Urmați acești pași pentru a determina cu acuratețe concentrația ADN:

1. Pregătiți Proba:

   • Asigurați-vă că proba de ADN este bine dizolvată și amestecată
   • Dacă concentrația așteptată este mare, pregătiți o diluție pentru a vă asigura că citirea se încadrează în intervalul liniar (de obicei A260 între 0.1 și 1.0)

2. Măsurați Absorbția:

   • Utilizați un spectrofotometru sau un dispozitiv nanodrop pentru a măsura absorbția la 260nm
   • Măsurați de asemenea absorbția la 280nm pentru a evalua puritatea (raportul A260/A280)
   • Folosiți același tampon folosit pentru a dizolva/dilua ADN-ul ca referință pentru gol

3. Introduceți Valorile în Calculator:

   • Introduceți valoarea A260 măsurată în câmpul "Absorbție la 260nm"
   • Introduceți volumul total al soluției de ADN în microlitri
   • Introduceți factorul de diluție (folosiți 1 dacă nu a fost efectuată diluția)

4. Interpretați Rezultatele:

   • Calculatorul va afișa concentrația ADN în ng/μL
   • Cantitatea totală de ADN din probă va fi afișată în μg
   • Folosiți aceste valori pentru a determina volumul adecvat necesar pentru aplicațiile ulterioare

5. Evaluați Puritatea ADN (dacă a fost măsurată A280):

   • Raportul A260/A280 de ~1.8 indică ADN pur
   • Raporturi mai mici pot indica contaminare cu proteine
   • Raporturi mai mari pot sugera contaminare cu ARN

Cazuri de Utilizare

Măsurarea concentrației ADN este crucială în numeroase aplicații de biologie moleculară și biotehnologie:

Clonarea Moleculară

Înainte de a lega fragmentele de ADN în vectori, cunoașterea exactă a concentrației permite cercetătorilor să calculeze raportul optim între insert și vector, maximizând eficiența transformării. De exemplu, un raport molar de 3:1 între insert și vector oferă adesea cele mai bune rezultate, ceea ce necesită măsurători precise ale concentrației ambelor componente.

PCR și qPCR

Reacțiile PCR necesită de obicei 1-10 ng de ADN template pentru amplificare optimă. Prea puțin ADN poate duce la eșecul amplificării, în timp ce prea mult poate inhiba reacția. Pentru PCR cantitativ (qPCR), este necesară cuantificarea ADN-ului chiar mai precisă pentru a asigura curbe standard exacte și cuantificări fiabile.

Secvențierea de Nouă Generație (NGS)

Protocolele de preparare a bibliotecilor NGS specifică cantități exacte de ADN de intrare, adesea în intervalul de 1-500 ng, în funcție de platformă și aplicație. Măsurarea precisă a concentrației este esențială pentru pregătirea cu succes a bibliotecilor și reprezentarea echilibrată a probelor în runde de secvențiere multiplexate.

Experimente de Transfecție

Atunci când se introduce ADN în celule eucariote, cantitatea optimă de ADN variază în funcție de tipul de celulă și metoda de transfecție. De obicei, se folosesc 0.5-5 μg de ADN plasmidic pe bine într-un format de plăcuță de 6 bine, necesitând măsurători precise ale concentrației pentru a standardiza experimentele.

Analiza ADN-ului în Medicină Legală

În aplicațiile medico-legale, probele de ADN sunt adesea limitate și prețioase. Cuantificarea precisă permite oamenilor de știință din domeniul medico-legal să determine dacă ADN-ul este suficient pentru profilare și să standardizeze cantitatea de ADN utilizată în analizele ulterioare.

Digestia cu Enzime de Restricție

Enzimele de restricție au unități de activitate specifice definite pe μg de ADN. Cunoașterea exactă a concentrației de ADN permite raporturi corespunzătoare între enzimă și ADN, asigurând o digestie completă fără activitate de tip star (tăiere nespecifică).

Alternative la Măsurarea Spectrofotometrică

Deși spectrofotometria UV este cea mai comună metodă pentru cuantificarea ADN-ului, există mai multe alternative:

1. Metode Fluorometrice:

   • Coloranți fluorescenți precum PicoGreen, Qubit și SYBR Green se leagă specific de ADN cu două lanțuri
   • Mai sensibile decât spectrofotometria (pot detecta până la 25 pg/mL)
   • Mai puțin afectate de contaminanți precum proteine, ARN sau nucleotide libere
   • Necesită un fluorometru și reactivi specifici

2. Electroforeza în Gel de Agaroză:

   • ADN-ul poate fi cuantificat prin compararea intensității benzilor cu standarde de concentrație cunoscută
   • Oferă informații despre dimensiunea și integritatea ADN-ului simultan
   • Mai puțin precisă decât metodele spectrofotometrice sau fluorometrice
   • Consumatoare de timp, dar utilă pentru confirmarea vizuală

3. PCR în Timp Real:

   • Metodă extrem de sensibilă pentru cuantificarea secvențelor specifice de ADN
   • Poate detecta concentrații extrem de scăzute (până la câteva copii)
   • Necesită primeri specifici și echipamente mai complexe
   • Utilizată atunci când este necesară cuantificarea specifică a secvenței

4. PCR Digital:

   • Cuantificare absolută fără curbe standard
   • Extrem de precisă pentru ținte cu abundență scăzută
   • Costisitoare și necesită echipamente specializate
   • Utilizată pentru detectarea mutațiilor rare și analiza variației numărului de copii

Istoria Măsurării Concentrației ADN

Capacitatea de a măsura cu acuratețe concentrația ADN a evoluat semnificativ odată cu progresele în biologia moleculară:

Metodele Timpurii (1950-1960)

După descoperirea structurii ADN-ului de către Watson și Crick în 1953, oamenii de știință au început să dezvolte metode pentru a izola și cuantifica ADN-ul. Abordările timpurii s-au bazat pe teste colorimetrice, cum ar fi reacția cu diphenylamine, care producea o culoare albastră atunci când reacționa cu zaharurile deoxiriboză din ADN. Aceste metode erau relativ insensibile și predispuse la interferențe.

Era Spectrofotometrică (1970)

Aplicarea spectrofotometriei UV pentru cuantificarea acizilor nucleici a devenit răspândită în anii 1970. Oamenii de știință au descoperit că ADN-ul absorbea lumină UV cu un maxim la 260nm și că relația dintre absorbție și concentrație era liniară într-un anumit interval. Factorul de conversie de 50 ng/μL pentru ADN cu două lanțuri la A260 = 1.0 a fost stabilit în această perioadă.

Revoluția Fluorometrică (1980-1990)

Dezvoltarea coloranților fluorescenți specifici pentru ADN în anii 1980 și 1990 a revoluționat cuantificarea ADN-ului, în special pentru probele diluate. Coloranții Hoechst și mai târziu PicoGreen au permis o detecție mult mai sensibilă decât era posibil cu spectrofotometria. Aceste metode au devenit deosebit de importante odată cu apariția PCR, care necesita adesea cuantificarea precisă a cantităților minime de ADN.

Era Modernă (2000-prezent)

Introducerea spectrofotometrelor cu microvolum, cum ar fi NanoDrop, la începutul anilor 2000 a transformat cuantificarea de rutină a ADN-ului, necesitând doar 0.5-2 μL de probă. Această tehnologie a eliminat necesitatea diluțiilor și cuvetelor, făcând procesul mai rapid și mai convenabil.

Astăzi, tehnici avansate precum PCR digital și secvențierea de nouă generație au împins limitele cuantificării ADN-ului și mai departe, permițând cuantificarea absolută a secvențelor specifice și detectarea la nivel de moleculă unică. Cu toate acestea, principiul spectrofotometric de bază stabilit cu decenii în urmă rămâne fundamentul măsurării de rutină a concentrației ADN în laboratoarele din întreaga lume.

Exemple Practice

Să parcurgem câteva exemple practice de calcul al concentrației ADN:

Exemplul 1: Prepararea Standard a Plasmidului

Un cercetător a purificat un plasmid și a obținut următoarele măsurători:

• Citirea A260: 0.75
• Diluție: 1:10 (factor de diluție = 10)
• Volumul soluției de ADN: 50 μL

Calcul:

• Concentrația = 0.75 × 50 × 10 = 375 ng/μL
• ADN total = (375 × 50) ÷ 1000 = 18.75 μg

Exemplul 2: Extracția ADN-ului Genomic

După extracția ADN-ului genomic din sânge:

• Citirea A260: 0.15
• Fără diluție (factor de diluție = 1)
• Volumul soluției de ADN: 200 μL

Calcul:

• Concentrația = 0.15 × 50 × 1 = 7.5 ng/μL
• ADN total = (7.5 × 200) ÷ 1000 = 1.5 μg

Exemplul 3: Pregătirea ADN-ului pentru Secvențiere

Un protocol de secvențiere necesită exact 500 ng de ADN:

• Concentrația ADN: 125 ng/μL
• Cantitatea necesară: 500 ng

Volumul necesar = 500 ÷ 125 = 4 μL de soluție de ADN

Exemple de Cod

Iată exemple de cum să calculați concentrația ADN în diferite limbaje de programare:

1' Formula Excel pentru concentrația ADN
2=A260*50*FactorDeDiluție
3
4' Formula Excel pentru cantitatea totală de ADN în μg
5=(A260*50*FactorDeDiluție*Volum)/1000
6
7' Exemplu într-o celulă cu A260=0.5, FactorDeDiluție=2, Volum=100
8=0.5*50*2*100/1000
9' Rezultatul: 5 μg
10

1def calculate_dna_concentration(absorbance, dilution_factor=1):
2    """
3    Calculează concentrația ADN în ng/μL
4    
5    Parametrii:
6    absorbance (float): Citirea absorbției la 260nm
7    dilution_factor (float): Factorul de diluție al probei
8    
9    Returnează:
10    float: Concentrația ADN în ng/μL
11    """
12    return absorbance * 50 * dilution_factor
13
14def calculate_total_dna(concentration, volume_ul):
15    """
16    Calculează cantitatea totală de ADN în μg
17    
18    Parametrii:
19    concentration (float): Concentrația ADN în ng/μL
20    volume_ul (float): Volumul soluției de ADN în μL
21    
22    Returnează:
23    float: Cantitatea totală de ADN în μg
24    """
25    return (concentration * volume_ul) / 1000
26
27# Exemplu de utilizare
28absorbance = 0.8
29dilution_factor = 5
30volume = 75
31
32concentration = calculate_dna_concentration(absorbance, dilution_factor)
33total_dna = calculate_total_dna(concentration, volume)
34
35print(f"Concentrația ADN: {concentration:.2f} ng/μL")
36print(f"ADN total: {total_dna:.2f} μg")
37

1function calculateDNAConcentration(absorbance, dilutionFactor = 1) {
2  // Returnează concentrația ADN în ng/μL
3  return absorbance * 50 * dilutionFactor;
4}
5
6function calculateTotalDNA(concentration, volumeUL) {
7  // Returnează cantitatea totală de ADN în μg
8  return (concentration * volumeUL) / 1000;
9}
10
11// Exemplu de utilizare
12const absorbance = 0.65;
13const dilutionFactor = 2;
14const volume = 100;
15
16const concentration = calculateDNAConcentration(absorbance, dilutionFactor);
17const totalDNA = calculateTotalDNA(concentration, volume);
18
19console.log(`Concentrația ADN: ${concentration.toFixed(2)} ng/μL`);
20console.log(`ADN total: ${totalDNA.toFixed(2)} μg`);
21

1public class DNACalculator {
2    /**
3     * Calculează concentrația ADN în ng/μL
4     * 
5     * @param absorbance Citirea absorbției la 260nm
6     * @param dilutionFactor Factorul de diluție al probei
7     * @return Concentrația ADN în ng/μL
8     */
9    public static double calculateDNAConcentration(double absorbance, double dilutionFactor) {
10        return absorbance * 50 * dilutionFactor;
11    }
12    
13    /**
14     * Calculează cantitatea totală de ADN în μg
15     * 
16     * @param concentration Concentrația ADN în ng/μL
17     * @param volumeUL Volumul soluției de ADN în μL
18     * @return Cantitatea totală de ADN în μg
19     */
20    public static double calculateTotalDNA(double concentration, double volumeUL) {
21        return (concentration * volumeUL) / 1000;
22    }
23    
24    public static void main(String[] args) {
25        double absorbance = 0.42;
26        double dilutionFactor = 3;
27        double volume = 150;
28        
29        double concentration = calculateDNAConcentration(absorbance, dilutionFactor);
30        double totalDNA = calculateTotalDNA(concentration, volume);
31        
32        System.out.printf("Concentrația ADN: %.2f ng/μL%n", concentration);
33        System.out.printf("ADN total: %.2f μg%n", totalDNA);
34    }
35}
36

1# Funcția R pentru calculul concentrației ADN
2
3calculate_dna_concentration <- function(absorbance, dilution_factor = 1) {
4  # Returnează concentrația ADN în ng/μL
5  return(absorbance * 50 * dilution_factor)
6}
7
8calculate_total_dna <- function(concentration, volume_ul) {
9  # Returnează cantitatea totală de ADN în μg
10  return((concentration * volume_ul) / 1000)
11}
12
13# Exemplu de utilizare
14absorbance <- 0.35
15dilution_factor <- 4
16volume <- 200
17
18concentration <- calculate_dna_concentration(absorbance, dilution_factor)
19total_dna <- calculate_total_dna(concentration, volume)
20
21cat(sprintf("Concentrația ADN: %.2f ng/μL\n", concentration))
22cat(sprintf("ADN total: %.2f μg\n", total_dna))
23

Întrebări Frecvente

Care este diferența dintre concentrația ADN și puritatea ADN?

Concentrația ADN se referă la cantitatea de ADN prezentă într-o soluție, măsurată de obicei în ng/μL sau μg/mL. Aceasta vă spune cât ADN aveți, dar nu indică calitatea acestuia. Puritatea ADN evaluează prezența contaminanților în proba de ADN, măsurată de obicei prin raporturi de absorbție, cum ar fi A260/A280 (pentru contaminare cu proteine) și A260/A230 (pentru contaminare cu compuși organici). ADN-ul pur are de obicei un raport A260/A280 de ~1.8 și un raport A260/A230 de 2.0-2.2.

De ce este diferit factorul de conversie pentru ADN, ARN și proteine?

Factorii de conversie diferă deoarece fiecare biomoleculă are un coeficient de extincție unic (capacitatea de a absorbi lumină) datorită compoziției chimice diferite. ADN-ul cu două lanțuri are un factor de conversie de 50 ng/μL la A260=1.0, în timp ce ADN-ul cu un singur lanț este 33 ng/μL, ARN-ul este 40 ng/μL, iar proteinele (măsurate la 280nm) variază foarte mult, dar în medie sunt în jur de 1 mg/mL la A280=1.0. Aceste diferențe apar din compozițiile variate ale nucleotidelor sau aminoacizilor și proprietățile lor de absorbție respective.

Cât de precisă este cuantificarea ADN-ului prin spectrofotometrie?

Cuantificarea ADN-ului prin spectrofotometrie este în general precisă în intervalul liniar (de obicei A260 între 0.1 și 1.0), cu o precizie de aproximativ ±3-5%. Cu toate acestea, precizia scade la concentrații foarte scăzute (sub 5 ng/μL) și poate fi afectată de contaminanți precum proteine, ARN, nucleotide libere sau anumite tampoane. Pentru măsurători foarte precise ale probelor diluate sau atunci când este necesară o puritate ridicată, se recomandă metodele fluorometrice, cum ar fi Qubit sau PicoGreen, deoarece sunt mai specifice pentru ADN cu două lanțuri.

Cum interpretez raportul A260/A280?

Raportul A260/A280 indică puritatea probei de ADN în ceea ce privește contaminarea cu proteine:

• Un raport de ~1.8 este în general acceptat ca fiind "pur" pentru ADN
• Raporturile sub 1.8 sugerează contaminare cu proteine
• Raporturile deasupra 2.0 pot indica contaminare cu ARN
• pH-ul și forța ionic a soluției pot afecta de asemenea acest raport

Deși util ca un control de calitate, raportul A260/A280 nu garantează ADN funcțional, deoarece alți contaminanți sau degradarea ADN-ului pot să nu afecteze acest raport.

Pot măsura concentrația ADN în soluții colorate?

Măsurarea concentrației ADN în soluții colorate folosind spectrofotometria poate fi provocatoare, deoarece culoarea poate absorbi la sau aproape de 260nm, interferând cu măsurarea ADN-ului. În astfel de cazuri:

1. Efectuați o scanare a lungimii de undă (220-320nm) pentru a verifica modelele anormale de absorbție
2. Utilizați o metodă fluorometrică precum Qubit, care este mai puțin afectată de culoarea probei
3. Purificați suplimentar ADN-ul pentru a elimina compușii colorați
4. Aplicați corecții matematice dacă spectrul de absorbție al compusului care interferează este cunoscut

Care este volumul minim necesar pentru măsurarea concentrației ADN?

Volumul minim necesar depinde de instrumentul utilizat:

• Spectrofotometrele tradiționale cu cuvete necesită de obicei 50-100 μL
• Spectrofotometrele cu microvolum, cum ar fi NanoDrop, necesită doar 0.5-2 μL
• Metodele fluorometrice necesită de obicei 1-20 μL de probă plus volumul reactivului
• Cititoarele de plăcuțe necesită de obicei 100-200 μL pe bine

Spectrofotometrele cu microvolum au revoluționat cuantificarea ADN-ului prin permiterea măsurării probelor prețioase cu cerințe minime de volum.

Cum calculez factorul de diluție?

Factorul de diluție se calculează astfel:

$\text{Factor de Diluție} = \frac{\text{Volumul Total (Probă + Diluant)}}{\text{Volumul Probe}}$

De exemplu:

• Dacă adăugați 1 μL de ADN la 99 μL de tampon, factorul de diluție este 100
• Dacă adăugați 5 μL de ADN la 45 μL de tampon, factorul de diluție este 10
• Dacă folosiți ADN nediluat, factorul de diluție este 1

Folosiți întotdeauna același tampon pentru diluție ca cel folosit pentru a gol spectrofotometrul.

Cum convertesc între diferite unități de concentrație?

Conversiile comune ale unităților de concentrație ADN:

• 1 ng/μL = 1 μg/mL
• 1 μg/mL = 0.001 mg/mL
• 1 ng/μL = 1000 pg/μL
• 1 μM al unui fragment ADN de 1000 bp ≈ 660 ng/μL

Pentru a converti de la concentrația de masă (ng/μL) la concentrația molară (nM) pentru un fragment de ADN:

$\text{Concentrația (nM)} = \frac{\text{Concentrația (ng/μL)} \times 10^6}{\text{Lungimea ADN-ului (bp)} \times 660}$

Ce poate cauza măsurători inexacte ale concentrației ADN?

Mai mulți factori pot duce la măsurători inexacte ale concentrației ADN:

1. Contaminare: Proteinele, fenolul, guanidina sau alți reactivi de extracție pot afecta absorbția
2. Bule: Bulele de aer în calea luminii pot cauza citiri eronate
3. Degradarea ADN-ului: ADN-ul fragmentat poate avea proprietăți de absorbție alterate
4. Golire necorespunzătoare: Folosirea unui tampon diferit pentru gol decât cel în care este dizolvat ADN-ul
5. Soluție neomogenă: Soluțiile de ADN care nu sunt amestecate corespunzător oferă citiri inconsistentes
6. Calibrarea instrumentului: Spectrofometrele necalibrate sau murdare produc rezultate nesigure
7. Măsurători în afara intervalului liniar: Valorile foarte mari sau foarte mici de absorbție pot să nu fie precise

Pot folosi acest calculator pentru concentrația ARN?

Deși acest calculator este optimizat pentru ADN cu două lanțuri (folosind factorul de conversie de 50 ng/μL), îl puteți adapta pentru ARN prin:

1. Măsurarea A260 ca de obicei
2. Înmulțirea cu 40 în loc de 50 (factorul specific pentru ARN)
3. Aplicarea factorului de diluție corespunzător

Formula pentru ARN ar fi: $\text{Concentrația ARN (ng/μL)} = A_{260} \times 40 \times \text{Factor de Diluție}$

Referințe

1. Gallagher, S. R., & Desjardins, P. R. (2006). Quantitation of DNA and RNA with absorption and fluorescence spectroscopy. Current Protocols in Molecular Biology, 76(1), A-3D.

2. Sambrook, J., & Russell, D. W. (2001). Molecular cloning: a laboratory manual (3rd ed.). Cold Spring Harbor Laboratory Press.

3. Manchester, K. L. (1995). Value of A260/A280 ratios for measurement of purity of nucleic acids. BioTechniques, 19(2), 208-210.

4. Wilfinger, W. W., Mackey, K., & Chomczynski, P. (1997). Effect of pH and ionic strength on the spectrophotometric assessment of nucleic acid purity. BioTechniques, 22(3), 474-481.

5. Desjardins, P., & Conklin, D. (2010). NanoDrop microvolume quantitation of nucleic acids. Journal of Visualized Experiments, (45), e2565.

6. Nakayama, Y., Yamaguchi, H., Einaga, N., & Esumi, M. (2016). Pitfalls of DNA Quantification Using DNA-Binding Fluorescent Dyes and Suggested Solutions. PLOS ONE, 11(3), e0150528.

7. Thermo Fisher Scientific. (2010). Assessment of Nucleic Acid Purity. T042-Technical Bulletin.

8. Huberman, J. A. (1995). Importance of measuring nucleic acid absorbance at 240 nm as well as at 260 and 280 nm. BioTechniques, 18(4), 636.

9. Warburg, O., & Christian, W. (1942). Isolation and crystallization of enolase. Biochemische Zeitschrift, 310, 384-421.

10. Glasel, J. A. (1995). Validity of nucleic acid purities monitored by 260nm/280nm absorbance ratios. BioTechniques, 18(1), 62-63.

Pregătit să calculați concentrația ADN? Folosiți calculatorul nostru de mai sus pentru a obține rezultate precise instantaneu. Pur și simplu introduceți citirea absorbției, volumul și factorul de diluție pentru a determina atât concentrația, cât și cantitatea totală de ADN din proba dumneavoastră.