జెనోమిక్ పునరుత్పత్తి అంచనా | DNA కాపీ సంఖ్య గణన కేల్కulator

అనుక్రమణిక డేటా, లక్ష్య అనుక్రమణిక, కేంద్రీకరణ మరియు వాల్యూమ్‌ను నమోదు చేసి DNA కాపీ సంఖ్యలను లెక్కించండి. సంక్లిష్ట కాన్ఫిగరేషన్లు లేదా API సమీకరణలు లేకుండా సులభంగా, ఖచ్చితమైన జెనోమిక్ పునరుత్పత్తి అంచనా.

జెనోమిక్ పునరుత్పత్తి అంచనాకారుడు

మీరు విశ్లేషించాలనుకునే పూర్తి డిఎన్‌ఎ క్రమాన్ని నమోదు చేయండి

మీరు సంఖ్యం లెక్కించాలనుకునే ప్రత్యేక డిఎన్‌ఎ క్రమాన్ని నమోదు చేయండి

ng/μL
μL

ఫలితాలు

అంచనా కాపీ సంఖ్య

0

కాపీ

హిసాబు పద్ధతి

లక్ష్య క్రమం యొక్క సంఖ్యం, డిఎన్‌ఎ సాంద్రత, నమూనా పరిమాణం మరియు డిఎన్‌ఎ యొక్క అణు లక్షణాల ఆధారంగా లెక్కించబడుతుంది.

కాపీ సంఖ్య = (సంఖ్యలు × సాంద్రత × పరిమాణం × 6.022×10²³) ÷ (డిఎన్‌ఎ పొడవు × 660 × 10⁹)

దృశ్యీకరణ

దృశ్యీకరణను చూడటానికి చెల్లుబాటు అయ్యే డిఎన్‌ఎ క్రమాలు మరియు పారామితులను నమోదు చేయండి

📚

దస్త్రపరిశోధన

జనోమిక్ డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య గణన కేల్కులేటర్

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య విశ్లేషణకు పరిచయం

జనోమిక్ డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య గణన కేల్కులేటర్ ఒక శక్తివంతమైన సాధనం, ఇది ఒక ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమాన్ని జనోమిక్ నమూనాలో ఉన్న కాపీలు సంఖ్యను అంచనా వేయడానికి రూపొందించబడింది. డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య విశ్లేషణ అనేది మాలిక్యులర్ బయాలజీ, జనెటిక్స్ మరియు క్లినికల్ డయాగ్నోస్టిక్స్‌లో ప్రాథమిక సాంకేతికత, ఇది పరిశోధకులు మరియు వైద్యులు ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమాల సమృద్ధిని అంచనా వేయడంలో సహాయపడుతుంది. ఈ గణన అనేక అనువర్తనాలకు అవసరం, అందులో జీన్ వ్యాసంగం అధ్యయనాలు, పాథోజెన్ గుర్తింపు, ట్రాన్స్‌జీన్ కాపీ సంఖ్య మరియు కాపీ సంఖ్య మార్పుల (CNVs) ద్వారా లక్షణీకరించిన జన్యు వ్యాధులను నిర్ధారించడం వంటి విషయాలు ఉన్నాయి.

మా జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్ కాంప్లెక్స్ కాన్ఫిగరేషన్స్ లేదా API ఇంటిగ్రేషన్లను అవసరం లేకుండా డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యలను గణించడానికి ఒక సులభమైన మార్గాన్ని అందిస్తుంది. మీ డీఎన్ఏ క్రమాల డేటా మరియు లక్ష్య క్రమాన్ని, కేంద్రీకరణ పారామితులను నమోదు చేసి, మీరు మీ నమూనాలో ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమాల కాపీ సంఖ్యను త్వరగా నిర్ధారించవచ్చు. ఈ సమాచారం జన్యు మార్పులు, వ్యాధి యాంత్రికతలు మరియు మాలిక్యులర్ బయాలజీ పరిశోధనలో ప్రయోగ ప్రోటోకాల్‌లను ఆప్టిమైజ్ చేయడంలో అర్థం చేసుకోవడానికి ముఖ్యమైనది.

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య గణన వెనుక శాస్త్రం

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యను అర్థం చేసుకోవడం

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య అనేది ఒక ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమం జనోమ్ లేదా నమూనాలో ఎన్ని సార్లు కనిపిస్తుందో సూచిస్తుంది. సాధారణ మానవ జనోమ్‌లో, ఎక్కువ భాగం జీన్లు రెండు కాపీలలో (ఒకటి ప్రతి తండ్రి నుండి) ఉంటాయి. అయితే, వివిధ జీవ ప్రక్రియలు మరియు జన్యు పరిస్థితులు ఈ ప్రమాణం నుండి వ్యత్యాసాలను కలిగించగలవు:

  • అంప్లిఫికేషన్స్: పెరిగిన కాపీ సంఖ్య (రెండు కాపీల కంటే ఎక్కువ)
  • డెలిషన్స్: తగ్గిన కాపీ సంఖ్య (రెండు కాపీల కంటే తక్కువ)
  • డూప్లికేషన్స్: జనోమ్‌లో ప్రత్యేక విభాగాలు డూప్లికేట్ అవడం
  • కాపీ సంఖ్య మార్పులు (CNVs): కాపీ సంఖ్యలలో మార్పులు కలిగించే నిర్మాణాత్మక మార్పులు

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యలను ఖచ్చితంగా గణించడం శాస్త్రవేత్తలకు ఈ మార్పులను మరియు వాటి ఆరోగ్య మరియు వ్యాధి కోసం ఉన్న ప్రభావాలను అర్థం చేసుకోవడంలో సహాయపడుతుంది.

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య గణన కోసం గణిత ఫార్ములా

ఒక ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమం యొక్క కాపీ సంఖ్యను క్రింది ఫార్ములాను ఉపయోగించి గణించవచ్చు:

కాపీ సంఖ్య=సంఖ్యలు×కేంద్రీకరణ×ఛాందం×NAడీఎన్ఏ పొడవు×సాధారణ బేస్ జంట బరువు×109\text{కాపీ సంఖ్య} = \frac{\text{సంఖ్యలు} \times \text{కేంద్రీకరణ} \times \text{ఛాందం} \times N_A}{\text{డీఎన్ఏ పొడవు} \times \text{సాధారణ బేస్ జంట బరువు} \times 10^9}

ఇక్కడ:

  • సంఖ్యలు: లక్ష్య క్రమం డీఎన్ఏ నమూనాలో ఎన్ని సార్లు కనిపిస్తుందో
  • కేంద్రీకరణ: ng/μL (నానోగ్రాముల/మైక్రోలీటర్)లో డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ
  • ఛాందం: నమూనా వాల్యూమ్ μL (మైక్రోలీటర్లలో)
  • NAN_A: అవోగadro సంఖ్య (6.022 × 10²³ మాలిక్యూల్స్/మోల్)
  • డీఎన్ఏ పొడవు: బేస్ పాయింట్లలో డీఎన్ఏ క్రమం పొడవు
  • సాధారణ బేస్ జంట బరువు: డీఎన్ఏ బేస్ జంట యొక్క సగటు మాలిక్యులర్ బరువు (660 g/mol)
  • 10^9: ng నుండి g కు మార్పిడి ఫ్యాక్టర్

ఈ ఫార్ములా డీఎన్ఏ యొక్క మాలిక్యులర్ లక్షణాలను పరిగణనలోకి తీసుకుంటుంది మరియు మీ నమూనాలో అబ్సొల్యూట్ కాపీ సంఖ్యను అంచనా వేయడానికి సహాయపడుతుంది.

చరిత్రను వివరించడం

  1. సంఖ్యలు: ఇది లక్ష్య క్రమం డీఎన్ఏ నమూనాలో ఎన్ని సార్లు కనిపిస్తుందో లెక్కించడం ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది. ఉదాహరణకు, మీ లక్ష్య క్రమం "ATCG" మరియు ఇది మీ డీఎన్ఏ నమూనాలో 5 సార్లు కనిపిస్తే, సంఖ్యలు విలువ 5 అవుతుంది.

  2. డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ: సాధారణంగా ng/μL (నానోగ్రాముల/మైక్రోలీటర్)లో కొలుస్తారు, ఇది మీ పరిష్కారంలో ఉన్న డీఎన్ఏ పరిమాణాన్ని సూచిస్తుంది. ఈ విలువ సాధారణంగా నానోడ్రాప్ వంటి స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్ పద్ధతులు లేదా క్యూబిట్ వంటి ఫ్లూరోమెట్రిక్ అస్సేస్‌లను ఉపయోగించి నిర్ణయించబడుతుంది.

  3. నమూనా వాల్యూమ్: మీ డీఎన్ఏ నమూనా మొత్తం వాల్యూమ్ μL (మైక్రోలీటర్లలో).

  4. అవోగadro యొక్క సంఖ్య: ఈ ప్రాథమిక స్థిరాంకం (6.022 × 10²³) ఒక మోల్ పదార్థంలో ఉన్న మాలిక్యూల్స్ సంఖ్యను సూచిస్తుంది.

  5. డీఎన్ఏ పొడవు: మీ డీఎన్ఏ క్రమం మొత్తం పొడవు బేస్ పాయింట్లలో.

  6. సాధారణ బేస్ జంట బరువు: డీఎన్ఏ బేస్ జంట యొక్క సగటు మాలిక్యులర్ బరువు సుమారు 660 g/mol. ఈ విలువ న్యూక్లియోటైడ్స్ మరియు డీఎన్ఏలో ఫాస్ఫోడైఎస్టర్ బాండ్ల యొక్క సగటు బరువును పరిగణనలోకి తీసుకుంటుంది.

జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్‌ను ఎలా ఉపయోగించాలి

మా జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్ డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యలను త్వరగా మరియు ఖచ్చితంగా గణించడానికి వినియోగదారుడి స్నేహపూర్వక ఇంటర్ఫేస్‌ను అందిస్తుంది. ఖచ్చితమైన ఫలితాలను పొందడానికి ఈ దశలను అనుసరించండి:

దశ 1: మీ డీఎన్ఏ క్రమాన్ని నమోదు చేయండి

మొదటి ఇన్‌పుట్ ఫీల్డ్‌లో, మీరు విశ్లేషించాలనుకునే పూర్తి డీఎన్ఏ క్రమాన్ని నమోదు చేయండి. ఇది మీ లక్ష్య క్రమం యొక్క కాపీలు లెక్కించాలనుకునే పూర్తి క్రమం కావాలి.

ముఖ్యమైన గమనికలు:

  • కేవలం ప్రమాణ డీఎన్ఏ బేస్‌లు (A, T, C, G) మాత్రమే అంగీకరించబడతాయి
  • క్రమం కేస్-సెన్సిటివ్ కాదు (ఇరువురు "ATCG" మరియు "atcg" ఒకేలా పరిగణించబడతాయి)
  • మీ క్రమం నుండి ఎలాంటి ఖాళీలు, సంఖ్యలు లేదా ప్రత్యేక అక్షరాలను తీసివేయండి

సరైన డీఎన్ఏ క్రమానికి ఉదాహరణ:

1ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAG
2

దశ 2: మీ లక్ష్య క్రమాన్ని నమోదు చేయండి

రెండవ ఇన్‌పుట్ ఫీల్డ్‌లో, మీరు లెక్కించాలనుకునే ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమాన్ని నమోదు చేయండి. ఇది మీరు కాపీ సంఖ్యను నిర్ధారించాలనుకునే లక్ష్య క్రమం.

అవసరాలు:

  • లక్ష్య క్రమం కేవలం ప్రమాణ డీఎన్ఏ బేస్‌లు (A, T, C, G) మాత్రమే కలిగి ఉండాలి
  • లక్ష్య క్రమం ప్రధాన డీఎన్ఏ క్రమం కంటే పొడవుగా ఉండకూడదు
  • ఖచ్చితమైన ఫలితాల కోసం, లక్ష్య క్రమం ఆసక్తికరమైన ప్రత్యేక జన్యు అంశాన్ని ప్రతినిధి చేయాలి

సరైన లక్ష్య క్రమానికి ఉదాహరణ:

1ATCG
2

దశ 3: డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ మరియు నమూనా వాల్యూమ్‌ను నిర్దేశించండి

మీ డీఎన్ఏ నమూనా కేంద్రీకరణను ng/μL (నానోగ్రాముల/మైక్రోలీటర్)లో మరియు వాల్యూమ్‌ను μL (మైక్రోలీటర్లలో) నమోదు చేయండి.

సాధారణ విలువలు:

  • డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ: 1-100 ng/μL
  • నమూనా వాల్యూమ్: 1-100 μL

దశ 4: మీ ఫలితాలను చూడండి

అన్ని అవసరమైన సమాచారాన్ని నమోదు చేసిన తర్వాత, కేల్కులేటర్ మీ లక్ష్య క్రమం యొక్క కాపీ సంఖ్యను ఆటోమేటిక్‌గా లెక్కిస్తుంది. ఫలితం మీ నమూనాలో లక్ష్య క్రమం యొక్క అంచనా కాపీ సంఖ్యను సూచిస్తుంది.

ఫలితాల విభాగం కూడా కలిగి ఉంటుంది:

  • కాపీ సంఖ్య యొక్క విజువలైజేషన్
  • మీ క్లిప్‌బోర్డుకు ఫలితాన్ని కాపీ చేయడానికి ఎంపిక
  • గణన ఎలా చేయబడిందో అనే వివరమైన వివరణ

ధృవీకరణ మరియు తప్పుల నిర్వహణ

జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్ ఖచ్చితమైన ఫలితాలను నిర్ధారించడానికి అనేక ధృవీకరణ తనిఖీలను కలిగి ఉంది:

  1. డీఎన్ఏ క్రమం ధృవీకరణ: ఇన్‌పుట్‌లో కేవలం సరైన డీఎన్ఏ బేస్‌లు (A, T, C, G) మాత్రమే ఉండాలి.

    • తప్పు సందేశం: "డీఎన్ఏ క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి"
  2. లక్ష్య క్రమం ధృవీకరణ: లక్ష్య క్రమం కేవలం సరైన డీఎన్ఏ బేస్‌లను కలిగి ఉందో మరియు ప్రధాన డీఎన్ఏ క్రమం కంటే పొడవుగా ఉండకూడదో తనిఖీ చేస్తుంది.

    • తప్పు సందేశాలు:
      • "లక్ష్య క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి"
      • "లక్ష్య క్రమం డీఎన్ఏ క్రమం కంటే పొడవుగా ఉండకూడదు"
  3. కేంద్రీకరణ మరియు వాల్యూమ్ ధృవీకరణ: ఈ విలువలు పాజిటివ్ సంఖ్యలు కావాలని ధృవీకరిస్తుంది.

    • తప్పు సందేశాలు:
      • "కేంద్రీకరణ 0 కంటే ఎక్కువగా ఉండాలి"
      • "వాల్యూమ్ 0 కంటే ఎక్కువగా ఉండాలి"

అనువర్తనాలు మరియు ఉపయోగకార్యాలు

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య విశ్లేషణ అనేక రంగాలలో అనేక అనువర్తనాలను కలిగి ఉంది:

పరిశోధనా అనువర్తనాలు

  1. జీన్ వ్యాసంగం అధ్యయనాలు: ఒక జీన్ యొక్క కాపీ సంఖ్యను అంచనా వేయడం ద్వారా దాని వ్యాసంగ స్థాయిని మరియు ఫంక్షన్‌ను అర్థం చేసుకోవడంలో సహాయపడుతుంది.

  2. ట్రాన్స్‌జెనిక్ ఆర్గనిజం విశ్లేషణ: జెనెటిక్‌గా మార్పు చేసిన ఆర్గనిజాల్లో చేర్చిన జీన్ల కాపీ సంఖ్యను నిర్ధారించడం, సమ్మిళిత సమర్థతను అంచనా వేయడానికి.

  3. మైక్రోబియల్ క్వాంటిఫికేషన్: పర్యావరణ లేదా క్లినికల్ నమూనాల్లో ప్రత్యేక మైక్రోబియల్ క్రమాల సమృద్ధిని కొలిచే ప్రక్రియ.

  4. వైరల్ లోడ్ పరీక్షలు: రోగి నమూనాలలో వైరల్ జన్యు సంఖ్యను కొలిచే ప్రక్రియ, సంక్రమణ పురోగతి మరియు చికిత్స సమర్థతను పర్యవేక్షించడానికి.

క్లినికల్ అనువర్తనాలు

  1. క్యాన్సర్ డయాగ్నోస్టిక్స్: ఆంకోజీన్ల మరియు ట్యూమర్ సూప్రెసర్ జీన్ల యొక్క అంప్లిఫికేషన్లు లేదా డెలిషన్స్‌ను గుర్తించడం.

  2. జన్యు వ్యాధి నిర్ధారణ: డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య మార్పులను గుర్తించడం, డ్యూచెన్నే మస్క్యులర్ డిస్ట్రోఫీ లేదా చార్కాట్-మేరీ-టూత్ వ్యాధి వంటి జన్యు వ్యాధులతో సంబంధం ఉన్నవి.

  3. ఫార్మకోజెనోమిక్స్: ఔషధ మెటబోలిజం మరియు ప్రతిస్పందనపై కాపీ సంఖ్య ఎలా ప్రభావితం చేస్తుందో అర్థం చేసుకోవడం.

  4. ప్రెనటల్ టెస్టింగ్: ట్రైసోమీస్ లేదా మైక్రోడెలిషన్స్ వంటి క్రోమోసోమల్ అసాధారణతలను గుర్తించడం.

వాస్తవ ప్రపంచ ఉదాహరణ

బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్‌ను అధ్యయనం చేస్తున్న పరిశోధనా బృందం HER2 జీన్ యొక్క కాపీ సంఖ్యను ట్యూమర్ నమూనాల్లో నిర్ధారించడానికి జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్‌ను ఉపయోగించవచ్చు. HER2 అంప్లిఫికేషన్ (పెరిగిన కాపీ సంఖ్య) ఆగ్రసివ్ బ్రెస్ట్ క్యాన్సర్‌తో సంబంధం కలిగి ఉంది మరియు చికిత్స నిర్ణయాలను ప్రభావితం చేస్తుంది. ఖచ్చితమైన కాపీ సంఖ్యను లెక్కించడం ద్వారా పరిశోధకులు:

  1. HER2 స్థితి ఆధారంగా ట్యూమర్లను వర్గీకరించండి
  2. కాపీ సంఖ్యను రోగి ఫలితాలతో సంబంధం కలిగి ఉండండి
  3. చికిత్స సమయంలో కాపీ సంఖ్యలో మార్పులను పర్యవేక్షించండి
  4. కచ్చితమైన నిర్ధారణ ప్రమాణాలను అభివృద్ధి చేయండి

కాపీ సంఖ్య గణనకు ప్రత్యామ్నాయాలు

మా కేల్కులేటర్ డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యలను అంచనా వేయడానికి ఒక సులభమైన పద్ధతిని అందించినప్పటికీ, పరిశోధన మరియు క్లినికల్ సెటింగ్స్‌లో కూడా ఉపయోగించే ఇతర సాంకేతికతలు ఉన్నాయి:

  1. క్వాంటిటేటివ్ PCR (qPCR): డీఎన్ఏ పెరిగిన సంఖ్యను నిజ సమయంలో కొలిచే ప్రక్రియ, ప్రారంభ కాపీ సంఖ్యను నిర్ధారించడానికి.

  2. డిజిటల్ PCR (dPCR): నమూనాను వేల వ్యక్తిగత ప్రతిస్పందనలలో విభజించడం, ప్రమాణ వక్రాలు లేకుండా అబ్సొల్యూట్ క్వాంటిఫికేషన్‌ను అందించడం.

  3. ఫ్లూరోసెన్స్ ఇన్ సిటు హైబ్రిడైజేషన్ (FISH): కణాలు లేదా క్రోమోసోమ్లలో నేరుగా ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమాలను వీక్షించడం మరియు లెక్కించడం.

  4. కంపరేటివ్ జనోమిక్ హైబ్రిడైజేషన్ (CGH): ఒక పరీక్ష మరియు సూచిక నమూనా మధ్య డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యను పోల్చడం.

  5. నెక్స్ట్-జనరేషన్ సిక్వెన్సింగ్ (NGS): మొత్తం జనోమ్ వ్యాప్తి కాపీ సంఖ్య ప్రొఫైలింగ్‌ను అధిక రిజల్యూషన్‌తో అందించడం.

ప్రతి పద్ధతికి ఖచ్చితత్వం, ఖర్చు, ఉత్పత్తి మరియు రిజల్యూషన్ పరంగా తనకు తానే ప్రయోజనాలు మరియు పరిమితులు ఉన్నాయి. మా కేల్కులేటర్ ప్రారంభ అంచనాల కోసం లేదా ప్రత్యేక పరికరాలు అందుబాటులో లేకపోతే త్వరగా మరియు సులభంగా ఉపయోగించడానికి ఒక సులభమైన మార్గాన్ని అందిస్తుంది.

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య విశ్లేషణ చరిత్ర

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య మరియు జన్యువులలో దీని ప్రాముఖ్యత యొక్క భావన దశాబ్దాలుగా గణనీయంగా అభివృద్ధి చెందింది:

ప్రారంభ కనుగొనడాలు (1950-1970)

డీఎన్ఏ నిర్మాణం గురించి వాట్సన్ మరియు క్రిక్ 1953లో కనుగొన్నప్పుడు డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య విశ్లేషణకు ఆధారం వేయబడింది. అయితే, కాపీ సంఖ్యలో మార్పులను గుర్తించగల సామర్థ్యం 1970లలో మాలిక్యులర్ బయాలజీ సాంకేతికతల అభివృద్ధి వరకు పరిమితమైంది.

మాలిక్యులర్ సాంకేతికతల ఉత్పత్తి (1980)

1980లలో సౌదర్న్ బ్లాటింగ్ మరియు ఇన్ సిటు హైబ్రిడైజేషన్ సాంకేతికతలు శాస్త్రవేత్తలకు పెద్ద స్థాయి కాపీ సంఖ్య మార్పులను గుర్తించడానికి అనుమతించాయి. ఈ పద్ధతులు కాపీ సంఖ్య మార్పులు ఎలా డీఎన్ఏ వ్యాసంగం మరియు ఫెనోటైప్‌ను ప్రభావితం చేస్తాయో అర్థం చేసుకోవడానికి మొదటి చూపులను అందించాయి.

PCR విప్లవం (1990)

కరీ ముల్లిస్ ద్వారా పాలిమరేజ్ చైన్ రియాక్షన్ (PCR) యొక్క ఆవిష్కరణ మరియు మెరుగుదల డీఎన్ఏ విశ్లేషణను విప్లవాత్మకంగా మార్చింది. 1990లలో క్వాంటిటేటివ్ PCR (qPCR) అభివృద్ధి కాపీ సంఖ్యలను ఖచ్చితంగా కొలిచే ప్రక్రియను సాధించింది మరియు అనేక అనువర్తనాల కోసం బంగారు ప్రమాణంగా మారింది.

జనోమిక్ యుగం (2000-ప్రస్తుతం)

2003లో మానవ జనోమ్ ప్రాజెక్ట్ పూర్తి కావడం మరియు మైక్రోఅర్రే మరియు నెక్స్ట్-జనరేషన్ సిక్వెన్సింగ్ సాంకేతికతల ఉత్పత్తి కాపీ సంఖ్య మార్పులను మొత్తం జనోమ్ వ్యాప్తిలో గుర్తించడానికి మరియు విశ్లేషించడానికి మన సామర్థ్యాన్ని dramatically విస్తరించింది. ఈ సాంకేతికతలు కాపీ సంఖ్య మార్పులు చాలా సాధారణ మరియు ప్రాముఖ్యమైనవి అని వెల్లడించాయి, ఇది సాధారణ జన్యు వైవిధ్యం మరియు వ్యాధికి దోహదం చేస్తుంది.

ఈ రోజు, కంప్యూటేషనల్ పద్ధతులు మరియు బయోఇన్ఫర్మాటిక్స్ సాధనాలు డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యలను ఖచ్చితంగా గణించడం మరియు అర్థం చేసుకోవడంలో మరింత మెరుగుపరచాయి, ఈ విశ్లేషణను ప్రపంచవ్యాప్తంగా పరిశోధకులు మరియు వైద్యులకు అందుబాటులో ఉంచాయి.

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య గణన కోసం కోడ్ ఉదాహరణలు

ఇక్కడ డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య గణన యొక్క వివిధ ప్రోగ్రామింగ్ భాషలలో అమలు ఉన్నాయి:

పైథాన్ అమలు

1def calculate_dna_copy_number(dna_sequence, target_sequence, concentration, volume):
2    """
3    Calculate the copy number of a target DNA sequence.
4    
5    Parameters:
6    dna_sequence (str): The complete DNA sequence
7    target_sequence (str): The target sequence to count
8    concentration (float): DNA concentration in ng/μL
9    volume (float): Sample volume in μL
10    
11    Returns:
12    int: Estimated copy number
13    """
14    # Clean and validate sequences
15    dna_sequence = dna_sequence.upper().replace(" ", "")
16    target_sequence = target_sequence.upper().replace(" ", "")
17    
18    if not all(base in "ATCG" for base in dna_sequence):
19        raise ValueError("డీఎన్ఏ క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి")
20    
21    if not all(base in "ATCG" for base in target_sequence):
22        raise ValueError("లక్ష్య క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి")
23    
24    if len(target_sequence) > len(dna_sequence):
25        raise ValueError("లక్ష్య క్రమం డీఎన్ఏ క్రమం కంటే పొడవుగా ఉండకూడదు")
26    
27    if concentration <= 0 or volume <= 0:
28        raise ValueError("కేంద్రీకరణ మరియు వాల్యూమ్ 0 కంటే ఎక్కువగా ఉండాలి")
29    
30    # Count occurrences of target sequence
31    count = 0
32    pos = 0
33    while True:
34        pos = dna_sequence.find(target_sequence, pos)
35        if pos == -1:
36            break
37        count += 1
38        pos += 1
39    
40    # Constants
41    avogadro = 6.022e23  # molecules/mol
42    avg_base_pair_weight = 660  # g/mol
43    
44    # Calculate copy number
45    total_dna_ng = concentration * volume
46    total_dna_g = total_dna_ng / 1e9
47    moles_dna = total_dna_g / (len(dna_sequence) * avg_base_pair_weight)
48    total_copies = moles_dna * avogadro
49    copy_number = count * total_copies
50    
51    return round(copy_number)
52
53# Example usage
54dna_seq = "ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAG"
55target_seq = "ATCG"
56conc = 10  # ng/μL
57vol = 20   # μL
58
59try:
60    result = calculate_dna_copy_number(dna_seq, target_seq, conc, vol)
61    print(f"Estimated copy number: {result:,}")
62except ValueError as e:
63    print(f"Error: {e}")
64

జావాస్క్రిప్ట్ అమలు

1function calculateDnaCopyNumber(dnaSequence, targetSequence, concentration, volume) {
2  // Clean and validate sequences
3  dnaSequence = dnaSequence.toUpperCase().replace(/\s+/g, '');
4  targetSequence = targetSequence.toUpperCase().replace(/\s+/g, '');
5  
6  // Validate DNA sequence
7  if (!/^[ATCG]+$/.test(dnaSequence)) {
8    throw new Error("డీఎన్ఏ క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి");
9  }
10  
11  // Validate target sequence
12  if (!/^[ATCG]+$/.test(targetSequence)) {
13    throw new Error("లక్ష్య క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి");
14  }
15  
16  if (targetSequence.length > dnaSequence.length) {
17    throw new Error("లక్ష్య క్రమం డీఎన్ఏ క్రమం కంటే పొడవుగా ఉండకూడదు");
18  }
19  
20  if (concentration <= 0 || volume <= 0) {
21    throw new Error("కేంద్రీకరణ మరియు వాల్యూమ్ 0 కంటే ఎక్కువగా ఉండాలి");
22  }
23  
24  // Count occurrences of target sequence
25  let count = 0;
26  let pos = 0;
27  
28  while (true) {
29    pos = dnaSequence.indexOf(targetSequence, pos);
30    if (pos === -1) break;
31    count++;
32    pos++;
33  }
34  
35  // Constants
36  const avogadro = 6.022e23; // molecules/mol
37  const avgBasePairWeight = 660; // g/mol
38  
39  // Calculate copy number
40  const totalDnaNg = concentration * volume;
41  const totalDnaG = totalDnaNg / 1e9;
42  const molesDna = totalDnaG / (dnaSequence.length * avgBasePairWeight);
43  const totalCopies = molesDna * avogadro;
44  const copyNumber = count * totalCopies;
45  
46  return Math.round(copyNumber);
47}
48
49// Example usage
50try {
51  const dnaSeq = "ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAG";
52  const targetSeq = "ATCG";
53  const conc = 10; // ng/μL
54  const vol = 20;  // μL
55  
56  const result = calculateDnaCopyNumber(dnaSeq, targetSeq, conc, vol);
57  console.log(`Estimated copy number: ${result.toLocaleString()}`);
58} catch (error) {
59  console.error(`Error: ${error.message}`);
60}
61

ఆర్ అమలు

1calculate_dna_copy_number <- function(dna_sequence, target_sequence, concentration, volume) {
2  # Clean and validate sequences
3  dna_sequence <- gsub("\\s+", "", toupper(dna_sequence))
4  target_sequence <- gsub("\\s+", "", toupper(target_sequence))
5  
6  # Validate DNA sequence
7  if (!grepl("^[ATCG]+$", dna_sequence)) {
8    stop("డీఎన్ఏ క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి")
9  }
10  
11  # Validate target sequence
12  if (!grepl("^[ATCG]+$", target_sequence)) {
13    stop("లక్ష్య క్రమం కేవలం A, T, C, G అక్షరాలను కలిగి ఉండాలి")
14  }
15  
16  if (nchar(target_sequence) > nchar(dna_sequence)) {
17    stop("లక్ష్య క్రమం డీఎన్ఏ క్రమం కంటే పొడవుగా ఉండకూడదు")
18  }
19  
20  if (concentration <= 0 || volume <= 0) {
21    stop("కేంద్రీకరణ మరియు వాల్యూమ్ 0 కంటే ఎక్కువగా ఉండాలి")
22  }
23  
24  # Count occurrences of target sequence
25  count <- 0
26  pos <- 1
27  
28  while (TRUE) {
29    pos <- regexpr(target_sequence, substr(dna_sequence, pos, nchar(dna_sequence)))
30    if (pos == -1) break
31    count <- count + 1
32    pos <- pos + 1
33  }
34  
35  # Constants
36  avogadro <- 6.022e23  # molecules/mol
37  avg_base_pair_weight <- 660  # g/mol
38  
39  # Calculate copy number
40  total_dna_ng <- concentration * volume
41  total_dna_g <- total_dna_ng / 1e9
42  moles_dna <- total_dna_g / (nchar(dna_sequence) * avg_base_pair_weight)
43  total_copies <- moles_dna * avogadro
44  copy_number <- count * total_copies
45  
46  return(round(copy_number))
47}
48
49# Example usage
50tryCatch({
51  dna_seq <- "ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAG"
52  target_seq <- "ATCG"
53  conc <- 10  # ng/μL
54  vol <- 20   # μL
55  
56  result <- calculate_dna_copy_number(dna_seq, target_seq, conc, vol)
57  cat(sprintf("Estimated copy number: %s\n", format(result, big.mark=",")))
58}, error = function(e) {
59  cat(sprintf("Error: %s\n", e$message))
60})
61

తరచుగా అడిగే ప్రశ్నలు (FAQ)

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య అంటే ఏమిటి?

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య అనేది ఒక ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమం జనోమ్ లేదా నమూనాలో ఎన్ని సార్లు కనిపిస్తుందో సూచిస్తుంది. మానవులలో, ఎక్కువ భాగం జీన్లు రెండు కాపీలలో (ఒకటి ప్రతి తండ్రి నుండి) ఉంటాయి, కానీ ఈ సంఖ్య జన్యు మార్పులు, మ్యూషన్‌లు లేదా వ్యాధి ప్రక్రియల ద్వారా మారవచ్చు. కాపీ సంఖ్యను గణించడం ఆరోగ్య సమస్యలు, క్యాన్సర్ అభివృద్ధి మరియు సాధారణ జన్యు వైవిధ్యాన్ని అర్థం చేసుకోవడానికి ముఖ్యమైనది.

జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్ ఎంత ఖచ్చితంగా ఉంది?

జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్ మీ అందించిన ఇన్‌పుట్ పారామితుల ఆధారంగా సిద్ధాంత గణనను అందిస్తుంది. దీనికి ఖచ్చితత్వం అనేక అంశాలపై ఆధారపడి ఉంటుంది:

  1. మీ డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ కొలిచే ఖచ్చితత్వం
  2. మీ డీఎన్ఏ నమూనా శుద్ధి
  3. మీ లక్ష్య క్రమం యొక్క ప్రత్యేకత
  4. మీ వాల్యూమ్ కొలిచే ఖచ్చితత్వం

అత్యంత ఖచ్చితమైన అంచనాలను అవసరమైతే, డిజిటల్ PCR వంటి సాంకేతికతలు ఎక్కువ ఖచ్చితత్వాన్ని అందించవచ్చు, కానీ మా కేల్కులేటర్ అనేక అనువర్తనాల కోసం మంచి అంచనాను అందిస్తుంది.

ఈ కేల్కులేటర్‌ను RNA క్రమాల కొలిచేందుకు ఉపయోగించవచ్చా?

లేదు, ఈ కేల్కులేటర్ ప్రత్యేకంగా డీఎన్ఏ క్రమాల కోసం రూపొందించబడింది మరియు గణనలో డీఎన్ఏ ప్రత్యేక మాలిక్యులర్ బరువులను ఉపయోగిస్తుంది. RNA యొక్క వేరే మాలిక్యులర్ లక్షణాలు ఉన్నాయి (థైమైన్ బదులుగా యూరాసిల్ కలిగి ఉంది మరియు వేరే మాలిక్యులర్ బరువు ఉంది). RNA క్వాంటిఫికేషన్ కోసం ప్రత్యేక RNA కాపీ సంఖ్య కేల్కులేటర్లు ఉపయోగించాలి.

ఈ కేల్కులేటర్‌కు ఏ డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ శ్రేణి ఉత్తమంగా పనిచేస్తుంది?

కేల్కులేటర్ ఏ పాజిటివ్ డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ విలువతో పని చేస్తుంది. అయితే, చాలా బయోలాజికల్ నమూనాల కోసం, డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ సాధారణంగా 1 నుండి 100 ng/μL వరకు ఉంటుంది. చాలా తక్కువ కేంద్రీకరణ (1 ng/μL కంటే తక్కువ) కొలిచే పరిమితుల కారణంగా మరింత అనిశ్చితిని ప్రవేశపెట్టవచ్చు.

కేల్కులేటర్ ఎలా ముడి క్రమాలను (N, R, Y, మొదలైనవి) నిర్వహిస్తుంది?

ఈ కేల్కులేటర్ కేవలం ప్రమాణ డీఎన్ఏ బేస్‌లు (A, T, C, G) మాత్రమే అంగీకరిస్తుంది. మీ క్రమంలో ముడి బేస్‌లు ఉంటే, మీరు వాటిని మీ ఉత్తమ జ్ఞానానికి అనుగుణంగా ప్రత్యేక బేస్‌లతో బదులుగా మార్చాలి లేదా కేల్కులేటర్‌ను ఉపయోగించే ముందు ఆ విభాగాలను తొలగించాలి.

కాపీ సంఖ్య చాలా పెద్ద సంఖ్యలను నిర్వహించగలదా?

కేల్కులేటర్ చాలా పెద్ద కాపీ సంఖ్యలను నిర్వహించగలదు మరియు వాటిని చదవదగ్గ రూపంలో చూపిస్తుంది. అత్యంత పెద్ద విలువల కోసం, శాస్త్రసంబంధిత నోటేషన్ ఉపయోగించబడవచ్చు. మౌలిక గణన ఖచ్చితత్వాన్ని కాపీ సంఖ్య యొక్క పరిమాణం పట్ల సంబంధం లేకుండా పూర్తి ఖచ్చితత్వాన్ని కాపాడుతుంది.

ఈ సాధనాన్ని జీన్ వ్యాసంగాన్ని కొలిచేందుకు ఉపయోగించవచ్చా?

ఈ సాధనం డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యలను గణిస్తుంది, కానీ జీన్ వ్యాసంగం సాధారణంగా RNA స్థాయిలో కొలవబడుతుంది. జీన్ వ్యాసంగం విశ్లేషణ కోసం RT-qPCR, RNA-seq లేదా మైక్రోఅర్రే లాంటి సాంకేతికతలు మరింత అనుకూలంగా ఉంటాయి. అయితే, డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య వ్యాసంగాన్ని ప్రభావితం చేయవచ్చు, కాబట్టి ఈ విశ్లేషణలు సాధారణంగా పరస్పర సంబంధితవి.

డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణ కాపీ సంఖ్య గణనను ఎలా ప్రభావితం చేస్తుంది?

డీఎన్ఏ కేంద్రీకరణకు గణించిన కాపీ సంఖ్యతో ప్రత్యక్ష రేఖీయ సంబంధం ఉంది. కేంద్రీకరణను డబుల్ చేయడం కాపీ సంఖ్యను డబుల్ చేస్తుంది, అన్ని ఇతర పారామితులు స్థిరంగా ఉన్నప్పుడు. ఇది ఖచ్చితమైన కేంద్రీకరణ కొలిచే ప్రాముఖ్యతను హైలైట్ చేస్తుంది.

సూచనలు

  1. బస్టిన్, ఎస్. ఎ., బెనెస్, వి., గార్సన్, జే. ఎ., హెల్లమన్స్, జే., హగ్గెట్, జే., కుబిస్తా, ఎమ్., ... & విట్టర్, సి. టి. (2009). MIQE మార్గదర్శకాలు: క్వాంటిటేటివ్ రియల్-టైమ్ PCR ప్రయోగాల ప్రచురణకు కనిష్ట సమాచారము. క్లినికల్ కెమిస్ట్రీ, 55(4), 611-622.

  2. డి'హేన్, బి., వాండేసోంపెల్, జే., & హెల్లమన్స్, జే. (2010). నిజమైన-సమయ క్వాంటిటేటివ్ PCR ఉపయోగించి ఖచ్చితమైన మరియు ఆబ్జెక్టివ్ కాపీ సంఖ్య ప్రొఫైలింగ్. పద్ధతులు, 50(4), 262-270.

  3. హింద్సన్, బి. జే., నెస్, కే. డి., మాస్క్వెలియర్, డి. ఎ., బెల్‌గ్రేడర్, పి., హెరేడియా, ఎన్. జే., మాకరెవిక్, ఎ. జే., ... & కొల్స్టన్, బి. డబ్ల్యూ. (2011). డిజిటల్ డ్రాప్‌ల డిజిటల్ PCR వ్యవస్థ డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యను అబ్సొల్యూట్ క్వాంటిఫికేషన్ కోసం. అనలిటికల్ కెమిస్ట్రీ, 83(22), 8604-8610.

  4. జావ్, ఎం., వాంగ్, క్యూన్, వాంగ్, క్యూన్, జియా, పి., & జావ్, జెడ్. (2013). నెక్స్ట్-జనరేషన్ సిక్వెన్సింగ్ డేటా ఉపయోగించి కాపీ సంఖ్య మార్పులను గుర్తించడానికి కంప్యూటేషనల్ సాధనాలు: లక్షణాలు మరియు దృక్పథాలు. BMC బయోఇన్ఫర్మాటిక్స్, 14(11), 1-16.

  5. రెడాన్, ఆర్., ఇషికవా, ఎస్., ఫిచ్, కే. ఆర్., ఫీక్స్, ఎల్., పెర్రీ, జి. హెచ్., ఆండ్రూస్, టి. డి., ... & హుర్లెస్, ఎమ్. ఈ. (2006). మానవ జనోమ్‌లో కాపీ సంఖ్యలో గ్లోబల్ వ్యత్యాసం. నేచర్, 444(7118), 444-454.

  6. జార్రై, ఎమ్., మాక్‌డొనాల్డ్, జే. ఆర్., మెరికో, డి., & షెరర్, ఎస్. డబ్ల్యూ. (2015). మానవ జనోమ్ యొక్క కాపీ సంఖ్య మార్పుల మ్యాప్. నేచర్ సమీక్షలు జనెటిక్స్, 16(3), 172-183.

  7. స్ట్రాంజర్, బి. ఈ., ఫోరెస్ట్, ఎమ్. ఎస్., డన్నింగ్, ఎమ్., ఇంగ్ల్, సి. ఈ., బీజ్లీ, సి., థోర్న్, ఎన్., ... & డెర్మిట్జాకిస్, ఈ. టి. (2007). జన్యు వ్యాసంగం ఫెనోటైప్‌లపై న్యూక్లియోటైడ్ మరియు కాపీ సంఖ్య మార్పుల సంబంధిత ప్రభావం. సైన్స్, 315(5813), 848-622.

  8. ఆల్కాన్, సి., కో, బి. పి., & ఐక్లర్, ఈ. ఈ. (2011). జనోమ్ నిర్మాణాత్మక మార్పుల కనుగొనడం మరియు జన్యు గణన. నేచర్ సమీక్షలు జనెటిక్స్, 12(5), 363-376.

ముగింపు

జనోమిక్ డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్య గణన కేల్కులేటర్ మీ నమూనాలలో ప్రత్యేక డీఎన్ఏ క్రమాల కాపీ సంఖ్యను అంచనా వేయడానికి శక్తివంతమైన మరియు అందుబాటులో ఉన్న మార్గాన్ని అందిస్తుంది. మాలిక్యులర్ ప్రిన్సిపల్స్‌తో వినియోగదారుడి స్నేహపూర్వక డిజైన్‌ను కలిపి, ఈ సాధనం పరిశోధకులు, విద్యార్థులు మరియు నిపుణులు త్వరగా విలువైన క్వాంటిటేటివ్ డేటాను పొందడానికి సహాయపడుతుంది, ప్రత్యేక పరికరాలు లేకుండా కాంప్లెక్స్ ప్రోటోకాల్‌లను అవసరం లేకుండా.

డీఎన్ఏ కాపీ సంఖ్యను అర్థం చేసుకోవడం జన్యు, మాలిక్యులర్ బయాలజీ మరియు వైద్య విభాగాలలో అనేక అనువర్తనాలకు అవసరం. మీరు క్యాన్సర్‌లో జీన్ అంప్లిఫికేషన్‌ను అధ్యయనం చేస్తున్నారా, ట్రాన్స్‌జీన్ ఇంటిగ్రేషన్‌ను కొలుస్తున్నారా లేదా జన్యు వ్యాధులలో కాపీ సంఖ్య మార్పులను పరిశీలిస్తున్నారా, మా కేల్కులేటర్ మీకు అవసరమైన సమాచారాన్ని పొందడానికి సులభమైన మార్గాన్ని అందిస్తుంది.

మీరు మీ స్వంత డీఎన్ఏ క్రమాలతో జనోమిక్ రిప్లికేషన్ ఎస్టిమేటర్‌ను ప్రయత్నించాలని మేము ప్రోత్సహిస్తున్నాము మరియు కేంద్రీకరణ, వాల్యూమ్ మరియు లక్ష్య క్రమాలలో మార్పులు ఎలా గణించిన కాపీ సంఖ్యలను ప్రభావితం చేస్తాయో అన్వేషించండి. ఈ ప్రాక్టికల్ అనుభవం మీకు మాలిక్యులర్ క్వాంటిఫికేషన్ ప్రిన్సిపల్స్‌ను అర్థం చేసుకోవడంలో మరియు ఈ భావనలను మీ ప్రత్యేక పరిశోధన ప్రశ్నలకు ఎలా వర్తింపజేయాలో సహాయపడుతుంది.

కేల్కులేటర్ గురించి ఏవైనా ప్రశ్నలు లేదా అభిప్రాయాల కోసం, దయచేసి FAQ విభాగాన్ని చూడండి లేదా మా మద్దతు బృందాన్ని సంప్రదించండి.

🔗

సంబంధిత సాధనాలు

మీ వర్క్‌ఫ్లో కోసం ఉపయోగపడవచ్చే ఇతర సాధనాలను కనుగొనండి

డీఎన్‌ఎ కేంద్రీకరణ గణన: A260ని ng/μLకి మార్చండి

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

మాలిక్యులర్ క్లొనింగ్ ప్రయోగాల కోసం DNA లిగేషన్ కేల్క్యులేటర్

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

జన్యు వైవిధ్య ట్రాకర్: జనసంఖ్యలలో అలెల్ ఫ్రీక్వెన్సీలను లెక్కించండి

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

గమ్మా పంపిణీ లెక్కింపు మరియు దృశ్యీకరణ సాధనం

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

సెల్ డౌబ్లింగ్ టైం క్యాల్క్యులేటర్: సెల్ వృద్ధి రేటును కొలవండి

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

డీఎన్‌ఏ అనీల్ టెంపరేచర్ కాల్క్యులేటర్ PCR ప్రైమర్ డిజైన్ కోసం

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

పన్నెట్ స్క్వేర్ సొల్వర్: జన్యు వారసత్వ నమూనాలను అంచనా వేయండి

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

డిహైబ్రిడ్ క్రాస్ సొల్వర్: జన్యవిజ్ఞానం పన్నెట్ స్క్వేర్ కేల్కులేటర్

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

ప్రయోగశాల నమూనా సిద్ధాంతానికి సెల్ డిల్యూషన్ కేల్కులేటర్

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి

త్రిహైబ్రిడ్ క్రాస్ కేల్కులేటర్ & పన్నెట్ స్క్వేర్ జనరేటర్

ఈ టూల్ ను ప్రయత్నించండి