Calculateur de Concentration d'ADN

Introduction

Le calculateur de concentration d'ADN est un outil essentiel pour les biologistes moléculaires, les généticiens et les techniciens de laboratoire qui ont besoin de déterminer avec précision la concentration d'ADN dans leurs échantillons. La mesure de la concentration d'ADN est une procédure fondamentale dans les laboratoires de biologie moléculaire, servant d'étape critique de contrôle de qualité avant de procéder à des applications en aval telles que la PCR, le séquençage, le clonage et d'autres techniques moléculaires. Ce calculateur utilise des principes spectrophotométriques pour calculer la concentration d'ADN en fonction de l'absorbance UV à 260 nm (A260), en appliquant le facteur de conversion standard et en tenant compte de toute dilution de l'échantillon d'origine.

Notre calculateur convivial simplifie le processus de détermination à la fois de la concentration (ng/μL) et de la quantité totale d'ADN dans votre échantillon, éliminant le besoin de calculs manuels et réduisant le risque d'erreurs mathématiques. Que vous prépariez des échantillons pour le séquençage de nouvelle génération, quantifiiez des préparations de plasmides ou évaluiez les rendements d'extraction d'ADN génomique, cet outil fournit des résultats rapides et fiables pour soutenir vos recherches et vos flux de travail diagnostiques.

Comment la Concentration d'ADN est Calculée

Le Principe de Base

Le calcul de la concentration d'ADN repose sur la loi de Beer-Lambert, qui stipule que l'absorbance d'une solution est directement proportionnelle à la concentration de l'espèce absorbante dans la solution et à la longueur du chemin lumineux à travers la solution. Pour l'ADN double brin, une absorbance de 1,0 à 260 nm (A260) dans une cuvette de 1 cm de long correspond à une concentration d'environ 50 ng/μL.

La Formule

La concentration d'ADN est calculée à l'aide de la formule suivante :

$\text{Concentration d'ADN (ng/μL)} = A_{260} \times 50 \times \text{Facteur de Dilution}$

Où :

• A260 est la lecture d'absorbance à 260 nm
• 50 est le facteur de conversion standard pour l'ADN double brin (50 ng/μL pour A260 = 1.0)
• Facteur de Dilution est le facteur par lequel l'échantillon d'origine a été dilué pour la mesure

La quantité totale d'ADN dans l'échantillon peut ensuite être calculée par :

$\text{Total ADN (μg)} = \frac{\text{Concentration (ng/μL)} \times \text{Volume (μL)}}{1000}$

Comprendre les Variables

1. Absorbance à 260 nm (A260) :

   • C'est la mesure de la quantité de lumière UV à 260 nm absorbée par l'échantillon d'ADN
   • Les nucléotides de l'ADN (en particulier les bases azotées) absorbent la lumière UV avec un pic d'absorbance à 260 nm
   • Plus l'absorbance est élevée, plus il y a d'ADN présent dans la solution

2. Facteur de Conversion (50) :

   • Le facteur de conversion standard de 50 ng/μL est spécifiquement pour l'ADN double brin
   • Pour l'ADN simple brin, le facteur est de 33 ng/μL
   • Pour l'ARN, le facteur est de 40 ng/μL
   • Pour les oligonucléotides, le facteur varie en fonction de la séquence

3. Facteur de Dilution :

   • Si l'échantillon a été dilué avant la mesure (par exemple, 1 partie d'échantillon pour 9 parties de tampon = facteur de dilution de 10)
   • Calculé comme : (Volume de l'Échantillon + Volume du Diluant) ÷ Volume de l'Échantillon
   • Utilisé pour déterminer la concentration dans l'échantillon d'origine non dilué

4. Volume :

   • Le volume total de votre solution d'ADN en microlitres (μL)
   • Utilisé pour calculer la quantité totale d'ADN dans l'échantillon

Comment Utiliser Ce Calculateur

Suivez ces étapes pour déterminer avec précision votre concentration d'ADN :

1. Préparez Votre Échantillon :

   • Assurez-vous que votre échantillon d'ADN est correctement dissous et mélangé
   • Si la concentration attendue est élevée, préparez une dilution pour garantir que la lecture se situe dans la plage linéaire (typiquement A260 entre 0.1 et 1.0)

2. Mesurez l'Absorbance :

   • Utilisez un spectrophotomètre ou un appareil nanodrop pour mesurer l'absorbance à 260 nm
   • Mesurez également l'absorbance à 280 nm pour évaluer la pureté (ratio A260/A280)
   • Utilisez le même tampon utilisé pour dissoudre/diluer votre ADN comme référence blanche

3. Entrez les Valeurs dans le Calculateur :

   • Saisissez la valeur A260 mesurée dans le champ "Absorbance à 260 nm"
   • Entrez le volume total de votre solution d'ADN en microlitres
   • Saisissez le facteur de dilution (utilisez 1 si aucune dilution n'a été effectuée)

4. Interprétez les Résultats :

   • Le calculateur affichera la concentration d'ADN en ng/μL
   • La quantité totale d'ADN dans l'échantillon sera affichée en μg
   • Utilisez ces valeurs pour déterminer le volume approprié nécessaire pour les applications en aval

5. Évaluez la Pureté de l'ADN (si A280 a été mesurée) :

   • Un ratio A260/A280 d'environ 1.8 indique un ADN pur
   • Des ratios plus bas peuvent indiquer une contamination par des protéines
   • Des ratios plus élevés peuvent suggérer une contamination par de l'ARN

Cas d'Utilisation

La mesure de la concentration d'ADN est cruciale dans de nombreuses applications de biologie moléculaire et de biotechnologie :

Clonage Moléculaire

Avant de ligaturer des fragments d'ADN dans des vecteurs, connaître la concentration exacte permet aux chercheurs de calculer le rapport optimal insert/vecteur, maximisant ainsi l'efficacité de transformation. Par exemple, un rapport molaire de 3:1 d'insert à vecteur donne souvent les meilleurs résultats, ce qui nécessite des mesures de concentration précises des deux composants.

PCR et qPCR

Les réactions de PCR nécessitent généralement 1 à 10 ng d'ADN modèle pour une amplification optimale. Trop peu d'ADN peut entraîner un échec d'amplification, tandis que trop peut inhiber la réaction. Pour la PCR quantitative (qPCR), une quantification d'ADN encore plus précise est nécessaire pour garantir des courbes standard précises et une quantification fiable.

Séquençage de Nouvelle Génération (NGS)

Les protocoles de préparation de bibliothèques NGS spécifient des quantités d'entrée d'ADN exactes, souvent dans la plage de 1 à 500 ng selon la plateforme et l'application. Une mesure précise de la concentration est essentielle pour une préparation réussie de la bibliothèque et une représentation équilibrée des échantillons dans des courses de séquençage multiplexées.

Expériences de Transfection

Lors de l'introduction d'ADN dans des cellules eucaryotes, la quantité d'ADN optimale varie selon le type de cellule et la méthode de transfection. En général, 0,5 à 5 μg d'ADN plasmidique est utilisé par puits dans un format de plaque de 6 puits, nécessitant une mesure précise de la concentration pour standardiser les expériences.

Analyse ADN Forensique

Dans les applications judiciaires, les échantillons d'ADN sont souvent limités et précieux. Une quantification précise permet aux scientifiques judiciaires de déterminer si une quantité suffisante d'ADN est présente pour le profilage et de standardiser la quantité d'ADN utilisée dans les analyses ultérieures.

Digestion par Enzymes de Restriction

Les enzymes de restriction ont des unités d'activité spécifiques définies par μg d'ADN. Connaitre la concentration exacte d'ADN permet d'obtenir des rapports appropriés enzyme/ADN, garantissant une digestion complète sans activité stellaire (coupure non spécifique).

Alternatives à la Mesure Spectrophotométrique

Bien que la spectrophotométrie UV soit la méthode la plus courante pour la quantification de l'ADN, plusieurs alternatives existent :

1. Méthodes Fluorométriques :

   • Des colorants fluorescents comme PicoGreen, Qubit et SYBR Green se lient spécifiquement à l'ADN double brin
   • Plus sensibles que la spectrophotométrie (peuvent détecter aussi peu que 25 pg/mL)
   • Moins affectées par des contaminants comme des protéines, de l'ARN ou des nucléotides libres
   • Nécessite un fluoromètre et des réactifs spécifiques

2. Électrophorèse sur Gel d'Agarose :

   • L'ADN peut être quantifié en comparant l'intensité des bandes à des standards de concentration connue
   • Fournit des informations sur la taille et l'intégrité de l'ADN simultanément
   • Moins précise que les méthodes spectrophotométriques ou fluorométriques
   • Chronophage mais utile pour une confirmation visuelle

3. PCR en Temps Réel :

   • Méthode très sensible pour quantifier des séquences d'ADN spécifiques
   • Peut détecter des concentrations extrêmement faibles (jusqu'à quelques copies)
   • Nécessite des amorces spécifiques et un équipement plus complexe
   • Utilisée lorsque la quantification spécifique à la séquence est nécessaire

4. PCR Digitale :

   • Quantification absolue sans courbes standard
   • Extrêmement précise pour des cibles à faible abondance
   • Coûteux et nécessite un équipement spécialisé
   • Utilisée pour la détection de mutations rares et l'analyse de variation du nombre de copies

Histoire de la Mesure de la Concentration d'ADN

La capacité de mesurer avec précision la concentration d'ADN a évolué de manière significative parallèlement aux avancées en biologie moléculaire :

Méthodes Précoces (1950-1960)

Suite à la découverte de la structure de l'ADN par Watson et Crick en 1953, les scientifiques ont commencé à développer des méthodes pour isoler et quantifier l'ADN. Les premières approches reposaient sur des essais colorimétriques tels que la réaction de diphénylamine, qui produisait une couleur bleue lorsqu'elle était réagie avec des sucres désoxyribose dans l'ADN. Ces méthodes étaient relativement peu sensibles et sujettes à des interférences.

Ère Spectrophotométrique (1970)

L'application de la spectrophotométrie UV à la quantification des acides nucléiques est devenue courante dans les années 1970. Les scientifiques ont découvert que l'ADN absorbait la lumière UV avec un maximum à 260 nm, et que la relation entre l'absorbance et la concentration était linéaire dans une certaine plage. Le facteur de conversion de 50 ng/μL pour l'ADN double brin à A260 = 1.0 a été établi durant cette période.

Révolution Fluorométrique (1980-1990)

Le développement de colorants fluorescents spécifiques à l'ADN dans les années 1980 et 1990 a révolutionné la quantification de l'ADN, en particulier pour les échantillons dilués. Les colorants Hoechst et plus tard PicoGreen ont permis une détection beaucoup plus sensible que ce qui était possible avec la spectrophotométrie. Ces méthodes sont devenues particulièrement importantes avec l'avènement de la PCR, qui nécessitait souvent une quantification précise de quantités infimes d'ADN.

Ère Moderne (2000-Présent)

L'introduction de spectrophotomètres à microvolume comme le NanoDrop au début des années 2000 a transformé la quantification routinière de l'ADN en ne nécessitant que 0,5 à 2 μL d'échantillon. Cette technologie a éliminé le besoin de dilutions et de cuvettes, rendant le processus plus rapide et plus pratique.

Aujourd'hui, des techniques avancées comme la PCR digitale et le séquençage de nouvelle génération ont repoussé les limites de la quantification de l'ADN encore plus loin, permettant la quantification absolue de séquences spécifiques et la détection de molécules uniques. Cependant, le principe spectrophotométrique de base établi il y a des décennies reste la colonne vertébrale de la mesure de concentration d'ADN de routine dans les laboratoires du monde entier.

Exemples Pratiques

Voyons quelques exemples pratiques de calculs de concentration d'ADN :

Exemple 1 : Préparation de Plasmide Standard

Un chercheur a purifié un plasmide et a obtenu les mesures suivantes :

• Lecture A260 : 0.75
• Dilution : 1:10 (facteur de dilution = 10)
• Volume de la solution d'ADN : 50 μL

Calcul :

• Concentration = 0.75 × 50 × 10 = 375 ng/μL
• Total ADN = (375 × 50) ÷ 1000 = 18.75 μg

Exemple 2 : Extraction d'ADN Génomique

Après avoir extrait de l'ADN génomique à partir de sang :

• Lecture A260 : 0.15
• Pas de dilution (facteur de dilution = 1)
• Volume de la solution d'ADN : 200 μL

Calcul :

• Concentration = 0.15 × 50 × 1 = 7.5 ng/μL
• Total ADN = (7.5 × 200) ÷ 1000 = 1.5 μg

Exemple 3 : Préparation d'ADN pour Séquençage

Un protocole de séquençage nécessite exactement 500 ng d'ADN :

• Concentration d'ADN : 125 ng/μL
• Quantité requise : 500 ng

Volume nécessaire = 500 ÷ 125 = 4 μL de solution d'ADN

Exemples de Code

Voici des exemples de la façon de calculer la concentration d'ADN dans divers langages de programmation :

1' Formule Excel pour la concentration d'ADN
2=A260*50*FacteurDeDilution
3
4' Formule Excel pour la quantité totale d'ADN en μg
5=(A260*50*FacteurDeDilution*Volume)/1000
6
7' Exemple dans une cellule avec A260=0.5, FacteurDeDilution=2, Volume=100
8=0.5*50*2*100/1000
9' Résultat : 5 μg
10

1def calculate_dna_concentration(absorbance, dilution_factor=1):
2    """
3    Calculer la concentration d'ADN en ng/μL
4    
5    Paramètres:
6    absorbance (float): Lecture d'absorbance à 260 nm
7    dilution_factor (float): Facteur de dilution de l'échantillon
8    
9    Retourne:
10    float: Concentration d'ADN en ng/μL
11    """
12    return absorbance * 50 * dilution_factor
13
14def calculate_total_dna(concentration, volume_ul):
15    """
16    Calculer la quantité totale d'ADN en μg
17    
18    Paramètres:
19    concentration (float): Concentration d'ADN en ng/μL
20    volume_ul (float): Volume de la solution d'ADN en μL
21    
22    Retourne:
23    float: Quantité totale d'ADN en μg
24    """
25    return (concentration * volume_ul) / 1000
26
27# Exemple d'utilisation
28absorbance = 0.8
29dilution_factor = 5
30volume = 75
31
32concentration = calculate_dna_concentration(absorbance, dilution_factor)
33total_dna = calculate_total_dna(concentration, volume)
34
35print(f"Concentration d'ADN : {concentration:.2f} ng/μL")
36print(f"Total ADN : {total_dna:.2f} μg")
37

1function calculateDNAConcentration(absorbance, dilutionFactor = 1) {
2  // Retourne la concentration d'ADN en ng/μL
3  return absorbance * 50 * dilutionFactor;
4}
5
6function calculateTotalDNA(concentration, volumeUL) {
7  // Retourne la quantité totale d'ADN en μg
8  return (concentration * volumeUL) / 1000;
9}
10
11// Exemple d'utilisation
12const absorbance = 0.65;
13const dilutionFactor = 2;
14const volume = 100;
15
16const concentration = calculateDNAConcentration(absorbance, dilutionFactor);
17const totalDNA = calculateTotalDNA(concentration, volume);
18
19console.log(`Concentration d'ADN : ${concentration.toFixed(2)} ng/μL`);
20console.log(`Total ADN : ${totalDNA.toFixed(2)} μg`);
21

1public class DNACalculator {
2    /**
3     * Calculer la concentration d'ADN en ng/μL
4     * 
5     * @param absorbance Lecture d'absorbance à 260 nm
6     * @param dilutionFactor Facteur de dilution de l'échantillon
7     * @return Concentration d'ADN en ng/μL
8     */
9    public static double calculateDNAConcentration(double absorbance, double dilutionFactor) {
10        return absorbance * 50 * dilutionFactor;
11    }
12    
13    /**
14     * Calculer la quantité totale d'ADN en μg
15     * 
16     * @param concentration Concentration d'ADN en ng/μL
17     * @param volumeUL Volume de la solution d'ADN en μL
18     * @return Quantité totale d'ADN en μg
19     */
20    public static double calculateTotalDNA(double concentration, double volumeUL) {
21        return (concentration * volumeUL) / 1000;
22    }
23    
24    public static void main(String[] args) {
25        double absorbance = 0.42;
26        double dilutionFactor = 3;
27        double volume = 150;
28        
29        double concentration = calculateDNAConcentration(absorbance, dilutionFactor);
30        double totalDNA = calculateTotalDNA(concentration, volume);
31        
32        System.out.printf("Concentration d'ADN : %.2f ng/μL%n", concentration);
33        System.out.printf("Total ADN : %.2f μg%n", totalDNA);
34    }
35}
36

1# Fonction R pour le calcul de la concentration d'ADN
2
3calculate_dna_concentration <- function(absorbance, dilution_factor = 1) {
4  # Retourne la concentration d'ADN en ng/μL
5  return(absorbance * 50 * dilution_factor)
6}
7
8calculate_total_dna <- function(concentration, volume_ul) {
9  # Retourne la quantité totale d'ADN en μg
10  return((concentration * volume_ul) / 1000)
11}
12
13# Exemple d'utilisation
14absorbance <- 0.35
15dilution_factor <- 4
16volume <- 200
17
18concentration <- calculate_dna_concentration(absorbance, dilution_factor)
19total_dna <- calculate_total_dna(concentration, volume)
20
21cat(sprintf("Concentration d'ADN : %.2f ng/μL\n", concentration))
22cat(sprintf("Total ADN : %.2f μg\n", total_dna))
23

Questions Fréquemment Posées

Quelle est la différence entre la concentration d'ADN et la pureté de l'ADN ?

La concentration d'ADN fait référence à la quantité d'ADN présente dans une solution, généralement mesurée en ng/μL ou μg/mL. Elle vous indique combien d'ADN vous avez mais ne révèle pas sa qualité. La pureté de l'ADN évalue la présence de contaminants dans votre échantillon d'ADN, communément mesurée par des ratios d'absorbance tels que A260/A280 (pour la contamination par des protéines) et A260/A230 (pour la contamination par des composés organiques). Un ADN pur a généralement un ratio A260/A280 d'environ 1.8 et un ratio A260/A230 de 2.0-2.2.

Pourquoi le facteur de conversion est-il différent pour l'ADN, l'ARN et les protéines ?

Les facteurs de conversion diffèrent car chaque biomolécule a un coefficient d'extinction unique (capacité à absorber la lumière) en raison de leurs compositions chimiques différentes. L'ADN double brin a un facteur de conversion de 50 ng/μL à A260=1.0, tandis que l'ADN simple brin est de 33 ng/μL, l'ARN est de 40 ng/μL, et les protéines (mesurées à 280 nm) varient largement mais se situent autour de 1 mg/mL à A280=1.0. Ces différences proviennent des compositions variées de nucléotides ou d'acides aminés et de leurs propriétés d'absorbance respectives.

Quelle est la précision de la quantification de l'ADN par spectrophotométrie ?

La quantification de l'ADN par spectrophotométrie est généralement précise dans la plage linéaire (typiquement A260 entre 0.1 et 1.0), avec une précision d'environ ±3-5%. Cependant, la précision diminue à des concentrations très faibles (en dessous de 5 ng/μL) et peut être affectée par des contaminants comme des protéines, de l'ARN, des nucléotides libres ou certains tampons. Pour des mesures hautement précises d'échantillons dilués ou lorsque la pureté est essentielle, des méthodes fluorométriques comme Qubit ou PicoGreen sont recommandées car elles sont plus spécifiques à l'ADN double brin.

Comment interpréter le ratio A260/A280 ?

Le ratio A260/A280 indique la pureté de votre échantillon d'ADN par rapport à la contamination par des protéines :

• Un ratio d'environ 1.8 est généralement accepté comme "pur" pour l'ADN
• Des ratios inférieurs à 1.8 suggèrent une contamination par des protéines
• Des ratios supérieurs à 2.0 peuvent indiquer une contamination par de l'ARN
• Le pH et la force ionique de la solution peuvent également affecter ce ratio

Bien qu'utile comme vérification de qualité, le ratio A260/A280 ne garantit pas un ADN fonctionnel, car d'autres contaminants ou la dégradation de l'ADN peuvent ne pas affecter ce ratio.

Puis-je mesurer la concentration d'ADN dans des solutions colorées ?

Mesurer la concentration d'ADN dans des solutions colorées à l'aide de la spectrophotométrie peut être difficile car la couleur peut absorber à ou près de 260 nm, interférant avec la mesure de l'ADN. Dans de tels cas :

1. Effectuez un scan de longueur d'onde (220-320 nm) pour vérifier les motifs d'absorbance anormaux
2. Utilisez une méthode fluorométrique comme Qubit, qui est moins affectée par la couleur de l'échantillon
3. Purifiez davantage l'ADN pour éliminer les composés colorés
4. Appliquez des corrections mathématiques si le spectre d'absorbance du composé perturbateur est connu

Quel est le volume minimum nécessaire pour la mesure de la concentration d'ADN ?

Le volume minimum dépend de l'instrument utilisé :

• Les spectrophotomètres traditionnels avec cuvettes nécessitent généralement 50-100 μL
• Les spectrophotomètres à microvolume comme NanoDrop n'ont besoin que de 0.5-2 μL
• Les méthodes fluorométriques nécessitent généralement 1-20 μL d'échantillon plus le volume du réactif
• Les lecteurs de microplaques utilisent généralement 100-200 μL par puits

Les spectrophotomètres à microvolume ont révolutionné la quantification de l'ADN en permettant des mesures d'échantillons précieux avec des exigences de volume minimales.

Comment calculer le facteur de dilution ?

Le facteur de dilution est calculé comme suit :

$\text{Facteur de Dilution} = \frac{\text{Volume Total (Échantillon + Diluant)}}{\text{Volume de l'Échantillon}}$

Par exemple :

• Si vous ajoutez 1 μL d'ADN à 99 μL de tampon, le facteur de dilution est de 100
• Si vous ajoutez 5 μL d'ADN à 45 μL de tampon, le facteur de dilution est de 10
• Si vous utilisez de l'ADN non dilué, le facteur de dilution est de 1

Utilisez toujours le même tampon pour la dilution que celui utilisé pour étalonner le spectrophotomètre.

Comment convertir entre différentes unités de concentration ?

Conversions courantes de concentration d'ADN :

• 1 ng/μL = 1 μg/mL
• 1 μg/mL = 0.001 mg/mL
• 1 ng/μL = 1000 pg/μL
• 1 μM d'un fragment d'ADN de 1000 pb ≈ 660 ng/μL

Pour convertir de la concentration massique (ng/μL) à la concentration molaire (nM) pour un fragment d'ADN :

$\text{Concentration (nM)} = \frac{\text{Concentration (ng/μL)} \times 10^6}{\text{Longueur de l'ADN (pb)} \times 660}$

Quels facteurs peuvent causer des mesures inexactes de la concentration d'ADN ?

Plusieurs facteurs peuvent conduire à des mesures inexactes de la concentration d'ADN :

1. Contamination : Les protéines, le phénol, la guanidine ou d'autres réactifs d'extraction peuvent affecter l'absorbance
2. Bulles : Les bulles d'air dans le chemin lumineux peuvent entraîner des lectures erronées
3. Dégradation de l'ADN : L'ADN fragmenté peut avoir des propriétés d'absorbance altérées
4. Étalonnage incorrect : Utiliser un tampon différent pour la référence que celui dans lequel l'ADN est dissous
5. Solution non homogène : Des solutions d'ADN mal mélangées donnent des lectures incohérentes
6. Calibration de l'instrument : Des spectrophotomètres non étalonnés ou sales produisent des résultats peu fiables
7. Mesures en dehors de la plage linéaire : Des valeurs d'absorbance très élevées ou très faibles peuvent ne pas être précises

Puis-je utiliser ce calculateur pour la concentration d'ARN ?

Bien que ce calculateur soit optimisé pour l'ADN double brin (utilisant le facteur de conversion de 50 ng/μL), vous pouvez l'adapter pour l'ARN en :

1. Mesurant l'A260 comme d'habitude
2. Multipliant par 40 au lieu de 50 (le facteur de conversion spécifique à l'ARN)
3. Appliquant le facteur de dilution approprié

La formule pour l'ARN serait : $\text{Concentration d'ARN (ng/μL)} = A_{260} \times 40 \times \text{Facteur de Dilution}$

Références

1. Gallagher, S. R., & Desjardins, P. R. (2006). Quantitation of DNA and RNA with absorption and fluorescence spectroscopy. Current Protocols in Molecular Biology, 76(1), A-3D.

2. Sambrook, J., & Russell, D. W. (2001). Molecular cloning: a laboratory manual (3rd ed.). Cold Spring Harbor Laboratory Press.

3. Manchester, K. L. (1995). Value of A260/A280 ratios for measurement of purity of nucleic acids. BioTechniques, 19(2), 208-210.

4. Wilfinger, W. W., Mackey, K., & Chomczynski, P. (1997). Effect of pH and ionic strength on the spectrophotometric assessment of nucleic acid purity. BioTechniques, 22(3), 474-481.

5. Desjardins, P., & Conklin, D. (2010). NanoDrop microvolume quantitation of nucleic acids. Journal of Visualized Experiments, (45), e2565.

6. Nakayama, Y., Yamaguchi, H., Einaga, N., & Esumi, M. (2016). Pitfalls of DNA Quantification Using DNA-Binding Fluorescent Dyes and Suggested Solutions. PLOS ONE, 11(3), e0150528.

7. Thermo Fisher Scientific. (2010). Assessment of Nucleic Acid Purity. T042-Technical Bulletin.

8. Huberman, J. A. (1995). Importance of measuring nucleic acid absorbance at 240 nm as well as at 260 and 280 nm. BioTechniques, 18(4), 636.

9. Warburg, O., & Christian, W. (1942). Isolation and crystallization of enolase. Biochemische Zeitschrift, 310, 384-421.

10. Glasel, J. A. (1995). Validity of nucleic acid purities monitored by 260nm/280nm absorbance ratios. BioTechniques, 18(1), 62-63.

Prêt à calculer votre concentration d'ADN ? Utilisez notre calculateur ci-dessus pour obtenir des résultats précis instantanément. Il vous suffit de saisir votre lecture d'absorbance, le volume et le facteur de dilution pour déterminer à la fois la concentration et la quantité totale d'ADN dans votre échantillon.