Калкулатор на обема на пробата за абсорбция на BCA за лабораторни протоколи

Изчислете прецизни обеми на проби на базата на стойности на абсорбция от BCA теста и желаната маса на протеина. Съществено за последователно натоварване на протеини в западни блотове и други лабораторни приложения.

Калкулатор за обем на проба BCA

Този инструмент изчислява необходимия обем на пробата въз основа на резултатите от абсорбцията на BCA и масата на пробата. Въведете стойността на абсорбцията и масата на пробата за всяка проба, за да изчислите съответния обем на пробата.

standardCurveTitle

standardCurveTypeLabel

curveTypeStandard

curveTypeEnhanced

curveTypeMicro

curveTypeCustom

Входни данни за пробите

Проба 1

Име на пробата

Абсорбция BCA*

Маса на пробата (μg)*

Обем на пробата

Copy

N/A μL

Формула за изчисление

Обемът на пробата се изчислява с помощта на следната формула:

Обем на пробата (μL) = Маса на пробата (μg) / Концентрация на протеин (μg/μL)

usageTipsTitle

• tipAbsorbanceRange

• tipSampleMass

• tipSampleVolume

• tipStandardCurve

📚

Документация

Калькулатор на обема на пробата за абсорбция на BCA

Въведение

Калькулаторът на обема на пробата за абсорбция на BCA е специализиран инструмент, проектиран да помогне на изследователи и лабораторни техници точно да определят подходящия обем на пробата за експерименти, базирани на резултатите от BCA (бицинхонинова киселина) теста. Този калькулатор взема предвид показанията на абсорбцията от вашия BCA тест и желаната маса на пробата, за да изчисли точния обем, необходим за последователно натоварване на протеини в приложения като уестърн блотинг, ензимни тестове и други техники за анализ на протеини.

BCA тестът е един от най-широко използваните методи за количествено определяне на протеини в лабораториите по биохимия и молекулярна биология. Чрез измерване на абсорбцията на вашите протеинови проби и сравняването им с стандартна крива, можете да определите концентрацията на протеини с висока точност. Нашият калькулатор опростява този процес, като автоматично преобразува показанията на абсорбцията в точните обеми на пробите, необходими за вашите експерименти.

Разбиране на BCA теста и изчисляване на обема на пробата

Какво е BCA тест?

Bicinchoninic Acid (BCA) тестът е биохимичен тест за определяне на общата концентрация на протеин в разтвор. Принципът на този тест се основава на образуването на комплекс Cu²⁺-протеин при алкални условия, последвано от редукция на Cu²⁺ до Cu¹⁺. Количеството на редукцията е пропорционално на наличния протеин. BCA образува пурпурен комплекс с Cu¹⁺ в алкална среда, предоставяйки основа за наблюдение на редукцията на медта от протеините.

Интензивността на пурпурния цвят нараства пропорционално с концентрацията на протеин, което може да бъде измерено с помощта на спектрофотометър на приблизително 562 nm. Показанията на абсорбцията след това се сравняват със стандартна крива, за да се определи концентрацията на протеин в неизвестни проби.

Формулата за изчисляване на обема на пробата

Основната формула за изчисляване на обема на пробата от резултатите от абсорбцията на BCA е:

$\text{Обем на пробата (μL)} = \frac{\text{Маса на пробата (μg)}}{\text{Концентрация на протеин (μg/μL)}}$

Където:

Обем на пробата е обемът на пробата, необходим (в микролитри, μL)
Маса на пробата е желаното количество протеин, което искате да използвате (в микрограми, μg)
Концентрация на протеин е получена от показанието на абсорбцията на BCA (в μg/μL)

Концентрацията на протеин се изчислява от показанието на абсорбцията, използвайки уравнението на стандартната крива:

$\text{Концентрация на протеин (μg/μL)} = \text{Наклон} \times \text{Абсорбция} + \text{Пресечна точка}$

За стандартен BCA тест, типичният наклон е приблизително 2.0, а пресечната точка често е близка до нула, въпреки че тези стойности могат да варират в зависимост от специфичните условия на теста и стандартната крива.

Как да използвате калькулатора на обема на пробата за абсорбция на BCA

Нашият калькулатор опростява процеса на определяне на обемите на пробите от резултатите от BCA теста. Следвайте тези стъпки, за да получите точни изчисления:

Въведете информация за пробата:
- Предоставете име за вашата проба (по избор, но полезно за проследяване на множество проби)
- Въведете показанието на абсорбцията от вашия спектрофотометър
- Въведете желаната маса на пробата (количеството протеин, което искате да използвате в μg)
Изберете тип на стандартната крива:
- Стандартна (по подразбиране): Използва типичните параметри на стандартната крива на BCA
- Подобрена: За протокол с подобрена чувствителност
- Микро: За протокол с микроплоча
- Персонализирана: Позволява ви да въведете свои собствени стойности на наклона и пресечната точка
Прегледайте резултатите:
- Калькулаторът незабавно ще покаже необходимия обем на пробата в микролитри
- Резултатите също се представят в обобщаваща таблица за лесно справяне
- За множество проби можете да добавите повече записи и да сравните резултатите
Копирайте или експортирайте резултатите:
- Използвайте бутона за копиране, за да прехвърлите резултатите в лабораторния си бележник или други приложения
- Всички изчисления могат да бъдат запазени за бъдещи справки

Пример стъпка по стъпка

Нека преминем през практичен пример:

Извършили сте BCA тест и получили показание на абсорбцията от 0.75 за вашата протеинова проба.
Искате да натоварите 20 μg протеин за вашия уестърн блот.
Използвайки стандартната крива (наклон = 2.0, пресечна точка = 0):
- Концентрация на протеин = 2.0 × 0.75 + 0 = 1.5 μg/μL
- Необходим обем на пробата = 20 μg ÷ 1.5 μg/μL = 13.33 μL

Това означава, че трябва да натоварите 13.33 μL от вашата проба, за да получите 20 μg протеин.

Разбиране на резултатите

Калькулаторът предоставя няколко важни парчета информация:

Концентрация на протеин: Тази стойност се изчислява от показанието на абсорбцията, използвайки избраната стандартна крива. Тя представлява количеството протеин на единица обем в пробата ви (μg/μL).
Обем на пробата: Това е обемът на вашата проба, който съдържа желаното количество протеин. Тази стойност е това, което ще използвате при подготовката на вашите експерименти.
Предупреждения и препоръки: Калькулаторът може да предостави предупреждения за:
- Много високи показания на абсорбцията (>3.0), които могат да бъдат извън линейния обхват на теста
- Много ниски показания на абсорбцията (<0.1), които могат да бъдат близо до границата на откритие
- Изчислени обеми, които са неразумно големи (>1000 μL) или малки (<1 μL)

Приложения и случаи на употреба

Подготовка на проби за уестърн блот

Едно от най-често срещаните приложения за този калькулатор е подготовката на проби за уестърн блотинг. Последователното натоварване на протеини е от решаващо значение за надеждни резултати от уестърн блот, а този калькулатор осигурява, че натоварвате едно и също количество протеин за всяка проба, дори когато техните концентрации се различават.

Примерен работен процес:

Извършете BCA тест на всички ваши протеинови проби
Определете последователно количество протеин за натоварване (обикновено 10-50 μg)
Използвайте калькулатора, за да определите необходимите обеми за всяка проба
Добавете подходящи обеми на буфера за проби и редуциращия агент
Натоварете изчислените обеми на гела

Ензимни тестове

За ензимни тестове често е необходимо да се използва специфично количество протеин, за да се стандартизират условията на реакцията между различни проби или експерименти.

Примерен работен процес:

Определете концентрацията на протеин, използвайки BCA тест
Изчислете обема, необходим за получаване на желаното количество протеин
Добавете този обем към реакционната смес
Продължете с вашия ензимен тест

Експерименти с имунопреципитация

В експериментите с имунопреципитация, започването с последователно количество протеин е важно за сравняване на резултатите между различни условия.

Примерен работен процес:

Измерете концентрацията на протеин на клетъчни или тъканни лизати, използвайки BCA тест
Изчислете обемите, необходими за получаване на равни количества протеин (обикновено 500-1000 μg)
Настройте всички проби на същия обем с буфер за лизис
Продължете с инкубацията с антитела и преципитацията

Пречистване на протеини

По време на пречистването на протеини, често е необходимо да се проследи концентрацията на протеин и да се изчислят добивите на различни стъпки.

Примерен работен процес:

Събирайте фракции по време на пречистването
Извършете BCA тест на избрани фракции
Изчислете концентрацията на протеин и общото количество протеин
Определете обемите, необходими за последващи приложения

Разширени функции и съображения

Персонализирани стандартни криви

Докато калькулаторът предоставя стандартни параметри за стандартните BCA тестове, можете също да въведете персонализирани стойности, ако сте генерирали собствена стандартна крива. Това е особено полезно, когато:

Работите с нестандартни протеинови проби
Използвате модифицирани BCA протоколи
Работите в присъствието на вещества, които могат да повлияят на теста

За да използвате персонализирана стандартна крива:

Изберете "Персонализирана" от опциите за стандартна крива
Въведете стойностите на наклона и пресечната точка
Калькулаторът ще използва тези стойности за всички последващи изчисления

Работа с множество проби

Калькулаторът позволява да добавите множество проби и да изчислите техните обеми едновременно. Това е особено полезно, когато подготвяте проби за експерименти, които изискват последователно натоварване на протеини между множество условия.

Ползи от обработката на партиди:

Спестете време, като изчислите всички обеми наведнъж
Осигурете последователност между всички ваши проби
Лесно сравнявайте концентрациите на протеин между пробите
Идентифицирайте аномалии или потенциални грешки в измерванията

Работа с крайни случаи

Много високи показания на абсорбцията

Ако вашето показание на абсорбцията е над 2.0, то може да бъде извън линейния обхват на BCA теста. В такива случаи:

Разредете пробата си и повторете BCA теста
Алтернативно, използвайте системата за предупреждения на калькулатора, която ще маркира потенциално проблематични показания

Много ниски показания на абсорбцията

За показания на абсорбцията под 0.1, можете да бъдете близо до границата на откритие на теста, което може да повлияе на точността. Обмислете:

Концентриране на пробата, ако е възможно
Използване на по-чувствителен метод за количествено определяне на протеини
Настройване на експерименталния си дизайн, за да вземете предвид по-ниските количества протеин

Нереалистично големи изчислени обеми

Ако калькулаторът предлага обем, който е твърде голям за вашето приложение:

Обмислете концентриране на протеинова проба
Настройте желаното количество протеин надолу, ако експериментът позволява
Използвайте максималния практичен обем и запишете действителното количество протеин, използвано

История на количественото определяне на протеини и BCA теста

Точното количествено определяне на протеини е основно изискване в биохимията и молекулярната биология откакто тези области се появиха. Ранните методи разчитаха на определяне на съдържанието на азот, което беше времеемко и изискваше специализирано оборудване.

Еволюция на методите за количествено определяне на протеини

Метод на Kjeldahl (1883): Един от най-ранните методи за количествено определяне на протеини, основан на измерване на съдържанието на азот.
Тест на Biuret (началото на 1900-те): Този метод разчита на реакцията между пептидните връзки и медните йони в алкална разтвор, произвеждайки виолетов цвят.
Тест на Lowry (1951): Разработен от Оливър Лоури, този метод комбинира реакцията на Biuret с реагента Folin-Ciocalteu, увеличавайки чувствителността.
Тест на Bradford (1976): Марион Брадфорд разработи този метод, използвайки багрилото Coomassie Brilliant Blue G-250, което се свързва с протеините и променя максимума на абсорбцията.
BCA тест (1985): Разработен от Пол Смит и колегите му в Pierce Chemical Company, този метод комбинира реакцията на Biuret с откритие на BCA, предлагайки подобрена чувствителност и съвместимост с детергенти.

Развитие на BCA теста

BCA тестът за първи път е описан в статия от 1985 г. на Смит и др. с заглавие "Измерване на протеин с помощта на бицинхонинова киселина." Той е разработен, за да адресира ограниченията на съществуващите методи, особено влиянието на различни химикали, често използвани в извличането и пречистването на протеини.

Ключовата иновация беше използването на бицинхонинова киселина за откритие на Cu¹⁺ йони, произведени от редукцията на Cu²⁺ от протеините, образувайки пурпурен комплекс, който може да бъде измерен спектрофотометърно. Това предостави няколко предимства:

По-висока чувствителност от метода на Biuret
По-малка податливост на влияние от не-протеинови вещества в сравнение с метода на Lowry
По-добра съвместимост с детергенти от теста на Bradford
По-прост протокол с по-малко реагенти и стъпки

От своето въвеждане, BCA тестът стана един от най-широко използваните методи за количествено определяне на протеини в лабораториите по биохимия и молекулярна биология по целия свят.

Примери за код за изчисляване на обема на пробата

Excel формула

1=IF(B2<=0,"Грешка: Невалидна абсорбция",IF(C2<=0,"Грешка: Невалидна маса на пробата",C2/(2*B2)))
2
3' Където:
4' B2 съдържа показанието на абсорбцията
5' C2 съдържа желаната маса на пробата в μg
6' Формулата връща необходимия обем на пробата в μL
7

Python реализация

1import numpy as np
2import matplotlib.pyplot as plt
3
4def calculate_protein_concentration(absorbance, slope=2.0, intercept=0):
5    """Изчислете концентрацията на протеин от абсорбцията, използвайки стандартната крива."""
6    if absorbance < 0:
7        raise ValueError("Абсорбцията не може да бъде отрицателна")
8    return (slope * absorbance) + intercept
9
10def calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope=2.0, intercept=0):
11    """Изчислете необходимия обем на пробата на базата на абсорбцията и желаната маса."""
12    if sample_mass <= 0:
13        raise ValueError("Масата на пробата трябва да бъде положителна")
14    
15    protein_concentration = calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16    
17    if protein_concentration <= 0:
18        raise ValueError("Изчислената концентрация на протеин трябва да бъде положителна")
19    
20    return sample_mass / protein_concentration
21
22# Пример за използване
23absorbance = 0.75
24sample_mass = 20  # μg
25slope = 2.0
26intercept = 0
27
28try:
29    volume = calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
30    print(f"За абсорбция {absorbance} и желана маса на протеин {sample_mass} μg:")
31    print(f"Концентрация на протеин: {calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept):.2f} μg/μL")
32    print(f"Необходим обем на пробата: {volume:.2f} μL")
33except ValueError as e:
34    print(f"Грешка: {e}")
35

R код за анализ

1# Функция за изчисляване на концентрацията на протеин от абсорбция
2calculate_protein_concentration <- function(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
3  if (absorbance < 0) {
4    stop("Абсорбцията не може да бъде отрицателна")
5  }
6  return((slope * absorbance) + intercept)
7}
8
9# Функция за изчисляване на обема на пробата
10calculate_sample_volume <- function(absorbance, sample_mass, slope = 2.0, intercept = 0) {
11  if (sample_mass <= 0) {
12    stop("Масата на пробата трябва да бъде положителна")
13  }
14  
15  protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16  
17  if (protein_concentration <= 0) {
18    stop("Изчислената концентрация на протеин трябва да бъде положителна")
19  }
20  
21  return(sample_mass / protein_concentration)
22}
23
24# Пример за използване
25absorbance <- 0.75
26sample_mass <- 20  # μg
27slope <- 2.0
28intercept <- 0
29
30tryCatch({
31  volume <- calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
32  protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
33  
34  cat(sprintf("За абсорбция %.2f и желана маса на протеин %.2f μg:\n", absorbance, sample_mass))
35  cat(sprintf("Концентрация на протеин: %.2f μg/μL\n", protein_concentration))
36  cat(sprintf("Необходим обем на пробата: %.2f μL\n", volume))
37}, error = function(e) {
38  cat(sprintf("Грешка: %s\n", e$message))
39})
40

JavaScript реализация

1function calculateProteinConcentration(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
2  if (absorbance < 0) {
3    throw new Error("Абсорбцията не може да бъде отрицателна");
4  }
5  return (slope * absorbance) + intercept;
6}
7
8function calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope = 2.0, intercept = 0) {
9  if (sampleMass <= 0) {
10    throw new Error("Масата на пробата трябва да бъде положителна");
11  }
12  
13  const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
14  
15  if (proteinConcentration <= 0) {
16    throw new Error("Изчислената концентрация на протеин трябва да бъде положителна");
17  }
18  
19  return sampleMass / proteinConcentration;
20}
21
22// Пример за използване
23try {
24  const absorbance = 0.75;
25  const sampleMass = 20; // μg
26  const slope = 2.0;
27  const intercept = 0;
28  
29  const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
30  const volume = calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope, intercept);
31  
32  console.log(`За абсорбция ${absorbance} и желана маса на протеин ${sampleMass} μg:`);
33  console.log(`Концентрация на протеин: ${proteinConcentration.toFixed(2)} μg/μL`);
34  console.log(`Необходим обем на пробата: ${volume.toFixed(2)} μL`);
35} catch (error) {
36  console.error(`Грешка: ${error.message}`);
37}
38

Визуализация на стандартна крива

Връзката между абсорбцията и концентрацията на протеин обикновено е линейна в определен диапазон. По-долу е визуализация на стандартната крива на BCA:

<text x="150" y="370">0.5</text>
<line x1="150" y1="350" x2="150" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="250" y="370">1.0</text>
<line x1="250" y1="350" x2="250" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="350" y="370">1.5</text>
<line x1="350" y1="350" x2="350" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="450" y="370">2.0</text>
<line x1="450" y1="350" x2="450" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="550" y="370">2.5</text>
<line x1="550" y1="350" x2="550" y2="355" stroke="#64748b"/>

0.0

<text x="45" y="300">1.0</text>
<line x1="45" y1="300" x2="50" y2="300" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="250">2.0</text>
<line x1="45" y1="250" x2="50" y2="250" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="200">3.0</text>
<line x1="45" y1="200" x2="50" y2="200" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="150">4.0</text>
<line x1="45" y1="150" x2="50" y2="150" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="100">5.0</text>
<line x1="45" y1="100" x2="50" y2="100" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="50">6.0</text>
<line x1="45" y1="50" x2="50" y2="50" stroke="#64748b"/>

Абсорбция (562 nm) Концентрация на протеин (μg/μL)

Стандартна крива Стандартни проби

Стандартна крива на BCA

Сравнение с други методи за количествено определяне на протеини

Различните методи за количествено определяне на протеини имат различни предимства и ограничения. Ето как BCA тестът се сравнява с други общи методи:

Метод	Диапазон на чувствителност	Предимства	Ограничения	Най-добър за
BCA тест	5-2000 μg/mL	• Съвместим с детергенти • По-малко вариация между протеини • Стабилно развитие на цвета	• Влияе от редуциращи агенти • Податлив на някои хелатиращи агенти	• Общо количествено определяне на протеини • Проби, съдържащи детергенти
Тест на Bradford	1-1500 μg/mL	• Бърз (2-5 мин) • Малко вещества, които влияят	• Висока вариация между протеини • Несъвместим с детергенти	• Бързи измервания • Проби без детергенти
Метод на Lowry	1-1500 μg/mL	• Добре установен • Добра чувствителност	• Много вещества, които влияят • Множество стъпки	• Историческа последователност • Чисти протеинови проби
UV абсорбция (280 nm)	20-3000 μg/mL	• Ненасилствен • Много бърз • Няма нужда от реагенти	• Влияе от нуклеинови киселини • Изисква чисти проби	• Чисти протеинови разтвори • Бързи проверки по време на пречистване
Флуорометричен	0.1-500 μg/mL	• Най-висока чувствителност • Широк динамичен диапазон	• Скъпи реагенти • Изисква флуорометр	• Много разредени проби • Ограничен обем на пробата

Често задавани въпроси

За какво се използва BCA тестът?

BCA (бицинхонинова киселина) тестът се използва основно за количествено определяне на общата концентрация на протеин в проба. Той е широко използван в биохимията, клетъчната биология и молекулярната биология за приложения като уестърн блотинг, ензимни тестове, имунопреципитация и пречистване на протеини.

Колко точен е BCA тестът?

BCA тестът обикновено е точен в рамките на 5-10%, когато се извършва правилно. Неговата точност зависи от няколко фактора, включително качеството на стандартната крива, отсъствието на вещества, които влияят, и дали съставът на неизвестния протеин е подобен на стандарта, използван.

Какво може да повлияе на резултатите от BCA теста?

Няколко вещества могат да повлияят на резултатите от BCA теста, включително:

Редуциращи агенти (DTT, β-меркаптоетанол, глутатион)
Хелатиращи агенти (EDTA, EGTA)
Високи концентрации на прости захари
Липиди
Някои детергенти в високи концентрации
Амониеви съединения

Каква е разликата между BCA и Bradford тестовете?

Основните разлики са:

BCA тестът е по-съвместим с детергенти и повърхностно активни вещества
Тестът на Bradford е по-бърз (2-5 минути спрямо 30+ минути за BCA)
BCA има по-малка вариация между протеини
Bradford е по-чувствителен към основни аминокиселини
BCA е повлиян от редуциращи агенти, докато Bradford не е

Защо изчисленият ми обем на пробата е твърде голям?

Ако калькулаторът показва много голям обем на пробата, обикновено това показва ниска концентрация на протеин в пробата. Това може да бъде поради:

Действително ниско съдържание на протеин в оригиналната проба
Загуба на протеин по време на подготовката
Грешки в процедурата на BCA теста
Невалидно показание на абсорбцията

Обмислете концентрирането на пробата си или регулиране на експерименталния си дизайн, за да вземете предвид по-ниската концентрация на протеин.

Мога ли да използвам този калькулатор за други методи за количествено определяне на протеини?

Този калькулатор е специално проектиран за резултати от BCA тест. Докато основният принцип (преобразуване на концентрация в обем) важи за други методи, връзката между абсорбцията и концентрацията на протеин варира между различни тестове. За други методи като Bradford или Lowry, ще трябва да използвате различни параметри на стандартната крива.

Как да се справя с проби с абсорбция извън линейния обхват?

За показания на абсорбцията извън линейния обхват (обикновено >2.0):

Разредете пробата си и повторете BCA теста
Използвайте различен метод за количествено определяне на протеини
Регулирайте стандартната крива, за да включите по-високи концентрационни стандарти

Кой протеин да използвам като стандарт?

Бовинският серумен албумин (BSA) е най-често използваният стандарт за BCA тестове, защото е:

Лесно достъпен и евтин
Силно разтворим
Стабилен в разтвор
Добре характеризирани

Въпреки това, ако вашите проби съдържат преобладаващ протеин, който значително се различава от BSA, обмислете използването на този протеин като ваш стандарт за по-точни резултати.

Колко време е стабилна реакцията на BCA?

Пурпурният цвят, разработен в реакцията на BCA, е стабилен за няколко часа при стайна температура и може да бъде измерен по всяко време в този период. Въпреки това, за най-добри резултати, се препоръчва да измерите всички стандарти и проби приблизително по същото време след развитието на цвета.

Мога ли да повторя стандартната крива от предишен експеримент?

Докато е технически възможно да се повтори стандартна крива, не се препоръчва за точни количествени резултати. Вариации в реагентите, условията на инкубация и калибрирането на инструмента могат да повлияят на връзката между абсорбцията и концентрацията на протеин. За надеждни резултати, генерирайте свежа стандартна крива всеки път, когато извършвате теста.

Източници

Smith PK, Krohn RI, Hermanson GT, et al. "Измерване на протеин с помощта на бицинхонинова киселина." Analytical Biochemistry. 1985;150(1):76-85. doi:10.1016/0003-2697(85)90442-7
Thermo Scientific. "Pierce BCA Protein Assay Kit." Инструкции. Достъпно на: https://www.thermofisher.com/document-connect/document-connect.html?url=https%3A%2F%2Fassets.thermofisher.com%2FTFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0011430_Pierce_BCA_Protein_Asy_UG.pdf
Walker JM. "Тестът на бицинхониновата киселина (BCA) за количествено определяне на протеин." В: Walker JM, ed. The Protein Protocols Handbook. Springer; 2009:11-15. doi:10.1007/978-1-59745-198-7_3
Olson BJ, Markwell J. "Тестове за определяне на концентрацията на протеин." Current Protocols in Protein Science. 2007;Chapter 3:Unit 3.4. doi:10.1002/0471140864.ps0304s48
Noble JE, Bailey MJ. "Количествено определяне на протеин." Methods in Enzymology. 2009;463:73-95. doi:10.1016/S0076-6879(09)63008-1

Опитайте нашия калькулатор на обема на пробата за абсорбция на BCA днес!

Сега, когато разбирате принципите зад количественото определяне на протеини с BCA и изчисляването на обема на пробата, опитайте нашия калькулатор, за да опростите работния процес в лабораторията си. Просто въведете показанията на абсорбцията и желаната маса на пробата, за да получите незабавни, точни изчисления на обема на пробата.

Независимо дали подготвяте проби за уестърн блотинг, ензимни тестове или всякакви други експерименти, базирани на протеини, нашият калькулатор ще помогне да се осигурят последователни и надеждни резултати. Спестете време, намалете грешките и подобрете възпроизводимостта на експериментите си с калькулатора на обема на пробата за абсорбция на BCA.

🔗

Свързани инструменти

Открийте още инструменти, които може да бъдат полезни за вашия работен процес

Калкулатор на обема на пробата за абсорбция на BCA за лабораторни протоколи

Калкулатор за обем на проба BCA

standardCurveTitle

Входни данни за пробите

Проба 1

Формула за изчисление

Документация

Калькулатор на обема на пробата за абсорбция на BCA

Въведение

Разбиране на BCA теста и изчисляване на обема на пробата

Какво е BCA тест?

Формулата за изчисляване на обема на пробата

Как да използвате калькулатора на обема на пробата за абсорбция на BCA

Пример стъпка по стъпка

Разбиране на резултатите

Приложения и случаи на употреба

Подготовка на проби за уестърн блот

Ензимни тестове

Експерименти с имунопреципитация

Пречистване на протеини

Разширени функции и съображения

Персонализирани стандартни криви

Работа с множество проби

Работа с крайни случаи

Много високи показания на абсорбцията

Много ниски показания на абсорбцията

Нереалистично големи изчислени обеми

История на количественото определяне на протеини и BCA теста

Еволюция на методите за количествено определяне на протеини

Развитие на BCA теста

Примери за код за изчисляване на обема на пробата

Excel формула

Python реализация

R код за анализ

JavaScript реализация

Визуализация на стандартна крива

Сравнение с други методи за количествено определяне на протеини

Често задавани въпроси

За какво се използва BCA тестът?

Колко точен е BCA тестът?

Какво може да повлияе на резултатите от BCA теста?

Каква е разликата между BCA и Bradford тестовете?

Защо изчисленият ми обем на пробата е твърде голям?

Мога ли да използвам този калькулатор за други методи за количествено определяне на протеини?

Как да се справя с проби с абсорбция извън линейния обхват?

Кой протеин да използвам като стандарт?

Колко време е стабилна реакцията на BCA?

Мога ли да повторя стандартната крива от предишен експеримент?

Източници

Опитайте нашия калькулатор на обема на пробата за абсорбция на BCA днес!

Свързани инструменти

Калкулатор за обем на резервоар за цилиндрични, сферични и правоъгълни

Калкулатор за обем към площ за течни покрития

Калкулатор на обема на дупки: Цилиндрични и правоъгълни изкопи

Калкулатор на обема на дупки: Измерване на обеми на цилиндрични изкопи

Калкулатор на обема на кубична клетка: Намерете обема от дължината на ръба

Прост калкулатор на фактора на разреждане за лабораторни разтвори

Калкулатор за обем на пясък: Оценете материала за всеки проект

Калкулатор на коефициента за абсорбция с два фотона

Калкулатор на моларност: Инструмент за концентрация на разтвор