DNA Concentration Calculator: A260-നെ ng/μL-ലേക്ക് ഉടൻ മാറ്റുക

DNA Concentration Calculator എന്താണ്?

ഒരു DNA concentration calculator എന്നത് ആണവ ജൈവശാസ്ത്രജ്ഞർ, ജനിതകശാസ്ത്രജ്ഞർ, ലാബ് സാങ്കേതിക വിദഗ്ധർ എന്നിവർക്കായി സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് വായനകളിൽ നിന്ന് DNA കണക്ഷൻ കൃത്യമായി നിർണ്ണയിക്കാൻ സഹായിക്കുന്ന ഒരു അനിവാര്യമായ ഓൺലൈൻ ഉപകരണം ആണ്. ഈ സൗജന്യ കാൽക്കുലേറ്റർ UV ആബ്സോർബൻസ് അളവുകൾക്ക് അടിസ്ഥാനമായ A260 രീതി ഉപയോഗിച്ച് ng/μL-ൽ കൃത്യമായ DNA കണക്ഷൻ മൂല്യങ്ങളിലേക്ക് മാറ്റുന്നു.

DNA concentration measurement എന്നത് ആണവ ജൈവശാസ്ത്ര ലാബുകളിൽ ഒരു അടിസ്ഥാന നടപടിയാണ്, PCR, സീക്വൻസിംഗ്, ക്ലോണിംഗ്, മറ്റ് ആണവ സാങ്കേതിക വിദ്യകൾ എന്നിവയ്ക്ക് മുമ്പുള്ള ഒരു നിർണായക ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണ ഘട്ടമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു. നമ്മുടെ കാൽക്കുലേറ്റർ മാനുവൽ കാൽക്കുലേഷനുകൾ ഒഴിവാക്കുകയും നിങ്ങളുടെ സാമ്പിളുകളിൽ കണക്ഷൻ, മൊത്തം DNA അളവുകൾ എന്നിവ നിർണ്ണയിക്കുമ്പോൾ പിശകുകൾ കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

നമ്മുടെ DNA Concentration Calculator ഉപയോഗിക്കുന്നതിന്റെ പ്രധാന ഗുണങ്ങൾ

• ഉടൻ ഫലങ്ങൾ: A260 വായനകൾ ng/μL-ലേക്ക് സെക്കൻഡുകളിൽ മാറ്റുക
• കൃത്യമായ കാൽക്കുലേഷനുകൾ: സ്റ്റാൻഡർഡ് 50 ng/μL മാറ്റം ഘടകം ഉപയോഗിക്കുന്നു
• ഡില്യൂഷൻ ഘടക പിന്തുണ: സാമ്പിള്‍ ഡില്യൂഷനുകൾ സ്വയം പരിഗണിക്കുന്നു
• ബഹുഭാഷാ യൂണിറ്റുകൾ: കണക്ഷനും മൊത്തം DNA അളവും കണക്കാക്കുക
• ഉപയോഗിക്കാൻ സൗജന്യം: രജിസ്ട്രേഷൻ അല്ലെങ്കിൽ സോഫ്റ്റ്‌വെയർ ഇൻസ്റ്റലേഷൻ ആവശ്യമില്ല

DNA Concentration എങ്ങനെ കണക്കാക്കുന്നു

അടിസ്ഥാന തത്വം

DNA concentration കണക്കാക്കൽ Beer-Lambert നിയമത്തെ ആശ്രയിക്കുന്നു, ഇത് ഒരു ദ്രാവകത്തിന്റെ ആബ്സോർബൻസ് ആബ്സോർബിംഗ് സ്പീഷീസിന്റെ കണക്ഷനുമായി നേരിട്ട് അനുപാതത്തിൽ ഉണ്ട് എന്ന് പറയുന്നു. ഇരട്ട-സ്ട്രാൻഡഡ് DNA-യ്ക്ക്, 1cm പാത നീളമുള്ള കുവേറ്റിൽ 260nm (A260) ൽ 1.0 ആബ്സോർബൻസ് ഏകദേശം 50 ng/μL കണക്ഷനോട് അനുബന്ധിക്കുന്നു.

ഫോർമുല

DNA concentration കണക്കാക്കാൻ താഴെ കൊടുത്തിരിക്കുന്ന ഫോർമുല ഉപയോഗിക്കുന്നു:

$\text{DNA Concentration (ng/μL)} = A_{260} \times 50 \times \text{Dilution Factor}$

എവിടെ:

• A260 260nm-ൽ ആബ്സോർബൻസ് വായനയാണ്
• 50 ഇരട്ട-സ്ട്രാൻഡഡ് DNA-യ്ക്ക് സ്റ്റാൻഡർഡ് മാറ്റം ഘടകമാണ് (A260 = 1.0-ന് 50 ng/μL)
• Dilution Factor അളവിനായി പ്രാഥമിക സാമ്പിള്‍ എത്ര ഡില്യൂട്ട് ചെയ്തുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു

സാമ്പിളിൽ മൊത്തം DNA അളവ് കണക്കാക്കാൻ:

$\text{Total DNA (μg)} = \frac{\text{Concentration (ng/μL)} \times \text{Volume (μL)}}{1000}$

വ്യത്യാസങ്ങൾ മനസ്സിലാക്കുക

1. 260nm-ൽ ആബ്സോർബൻസ് (A260):

   • ഇത് DNA സാമ്പിള്‍ 260nm തരംഗദൈർഘ്യത്തിൽ എത്ര UV വെളിച്ചം ആബ്സോർബ് ചെയ്യുന്നു എന്നതിന്റെ അളവാണ്
   • DNA ന്യുക്ലിയോടൈഡുകൾ (പ്രത്യേകിച്ച് നൈട്രജിനസ് ബേസുകൾ) 260nm-ൽ പരമാവധി ആബ്സോർബൻസ് കാണിക്കുന്നു
   • ആബ്സോർബൻസ് ഉയർന്നതായാൽ, ദ്രാവകത്തിൽ കൂടുതൽ DNA ഉണ്ട്

2. മാറ്റം ഘടകം (50):

   • 50 ng/μL എന്ന സ്റ്റാൻഡർഡ് മാറ്റം ഘടകം പ്രത്യേകിച്ച് ഇരട്ട-സ്ട്രാൻഡഡ് DNA-യ്ക്ക് ആണ്
   • ഏകസ്ട്രാൻഡഡ് DNA-യ്ക്ക്, ഘടകം 33 ng/μL ആണ്
   • RNA-യ്ക്ക്, ഘടകം 40 ng/μL ആണ്
   • ഒലിഗോന്യുക്ലിയോടൈഡുകൾക്കായി, ഘടകം ശ്രേണിയുടെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു

3. ഡില്യൂഷൻ ഘടകം:

   • അളവിന് മുമ്പ് സാമ്പിള്‍ ഡില്യൂട്ട് ചെയ്തുവെങ്കിൽ (ഉദാഹരണം, 1 ഭാഗം സാമ്പിള്‍ 9 ഭാഗം ബഫർ = 10-ന്റെ ഡില്യൂഷൻ ഘടകം)
   • കണക്കാക്കുന്നത്: (സാമ്പിളിന്റെ വോള്യം + ഡില്യൂന്റിന്റെ വോള്യം) ÷ Sampling Volume
   • പ്രാഥമിക, ഡില്യൂട്ട് ചെയ്യാത്ത സാമ്പിളിൽ കണക്ഷൻ നിർണ്ണയിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു

4. വോള്യം:

   • നിങ്ങളുടെ DNA ദ്രാവകത്തിന്റെ മൊത്തം വോള്യം മൈക്രോലിറ്ററുകളിൽ (μL)
   • സാമ്പിളിൽ മൊത്തം DNA അളവ് കണക്കാക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു

DNA Concentration കണക്കാക്കാൻ: ഘട്ടം-ഘട്ടമായി മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശം

നിങ്ങളുടെ A260 വായനകളിൽ നിന്ന് DNA concentration കണക്കാക്കാൻ ഈ ലളിതമായ പ്രക്രിയ പിന്തുടരുക:

ഘട്ടം 1: നിങ്ങളുടെ DNA സാമ്പിള്‍ തയ്യാറാക്കുക

• നിങ്ങളുടെ DNA സാമ്പിള്‍ ശരിയായി ലയിപ്പിച്ചിട്ടുണ്ടെന്ന് ഉറപ്പാക്കുക
• ഉയർന്ന കണക്ഷനുകൾക്കായി, A260 0.1-1.0-ൽ ഇടയിൽ വായനകൾക്കായി ഒരു ഡില്യൂഷൻ തയ്യാറാക്കുക
• നിങ്ങളുടെ ബ്ലാങ്ക് റഫറൻസിനായി ഡില്യൂഷനിൽ ഒരേ ബഫർ ഉപയോഗിക്കുക

ഘട്ടം 2: A260 ആബ്സോർബൻസ് അളക്കുക

• 260nm-ൽ ആബ്സോർബൻസ് അളക്കാൻ ഒരു സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമീറ്റർ അല്ലെങ്കിൽ നാനോഡ്രോപ്പ് ഉപയോഗിക്കുക
• A260 മൂല്യം രേഖപ്പെടുത്തുക (DNA 260nm-ൽ പരമാവധി UV വെളിച്ചം ആബ്സോർബ് ചെയ്യുന്നു)
• ശുദ്ധി വിലയിരുത്തലിന് A280-യും അളക്കാം

ഘട്ടം 3: DNA Concentration Calculator ഉപയോഗിക്കുക

1. A260 മൂല്യം ആബ്സോർബൻസ് ഫീൽഡിൽ നൽകുക
2. സാമ്പിളിന്റെ വോള്യം മൈക്രോലിറ്ററുകളിൽ (μL) നൽകുക
3. ഡില്യൂഷൻ ഘടകം ചേർക്കുക (ഡില്യൂട്ട് ചെയ്യാത്തതെങ്കിൽ 1 ഉപയോഗിക്കുക)
4. കണക്കാക്കുക എന്നതിൽ ക്ലിക്ക് ചെയ്യുക ഉടൻ ഫലങ്ങൾക്കായി

ഘട്ടം 4: നിങ്ങളുടെ DNA Concentration ഫലങ്ങൾ വ്യാഖ്യാനിക്കുക

• കണക്ഷൻ ng/μL-ൽ DNA അളവ് കാണിക്കുന്നു
• മൊത്തം DNA μg-ൽ മൊത്തം അളവ് പ്രദർശിപ്പിക്കുന്നു
• ശുദ്ധി അനുപാതങ്ങൾ സാമ്പിളിന്റെ ഗുണനിലവാരം വിലയിരുത്താൻ സഹായിക്കുന്നു (A260/A280 ≈ 1.8 ശുദ്ധമായ DNA-യ്ക്ക്)

DNA Concentration Calculator-ന്റെ ഉപയോഗങ്ങൾ

DNA concentration measurement നിരവധി ആണവ ജൈവശാസ്ത്രവും ഗവേഷണവും ആവശ്യങ്ങൾക്കായി അനിവാര്യമാണ്:

ആണവ ക്ലോണിംഗ്

DNA ഫ്രാഗ്മെന്റുകൾ വെക്ടറുകളിൽ ലിഗേറ്റ് ചെയ്യുന്നതിന് മുമ്പ്, കൃത്യമായ കണക്ഷൻ അറിയുന്നത് ഗവേഷകർക്ക് ഏറ്റവും അനുയോജ്യമായ ഇൻസർട്ട്-ടു-വെക്ടർ അനുപാതം കണക്കാക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു, പരിവർത്തന കാര്യക്ഷമത പരമാവധി ചെയ്യുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, 3:1 മോളർ അനുപാതം ഇൻസർട്ട്-ടു-വെക്ടർ മികച്ച ഫലങ്ങൾ നൽകുന്നു, ഇത് രണ്ട് ഘടകങ്ങളുടെ കൃത്യമായ കണക്ഷൻ അളവുകൾ ആവശ്യമാണ്.

PCRയും qPCRയും

PCR പ്രതികരണങ്ങൾ സാധാരണയായി മികച്ച വർദ്ധനവിന് 1-10 ng-ന്റെ ടെംപ്ലേറ്റ് DNA ആവശ്യമാണ്. വളരെ കുറച്ച് DNA വർദ്ധനവിന്റെ പരാജയം ഉണ്ടാക്കാം, അതേസമയം വളരെ കൂടുതലായാൽ പ്രതികരണം തടയാം. ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് PCR (qPCR) നായി, കൃത്യമായ DNA അളവുകൾ ഉറപ്പാക്കാൻ കൂടുതൽ കൃത്യമായ അളവുകൾ ആവശ്യമാണ്, ഇത് കൃത്യമായ സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവുകൾക്കും വിശ്വസനീയമായ അളവുകൾക്കും ആവശ്യമാണ്.

അടുത്ത തലമുറ സീക്വൻസിംഗ് (NGS)

NGS ലൈബ്രറി തയ്യാറാക്കൽ പ്രോട്ടോകോളുകൾ കൃത്യമായ DNA ഇൻപുട്ട് അളവുകൾ നിർദ്ദേശിക്കുന്നു, സാധാരണയായി 1-500 ng-ൽ, പ്ലാറ്റ്ഫോം, അപേക്ഷ എന്നിവയുടെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ. വിജയകരമായ ലൈബ്രറി തയ്യാറാക്കലിനും മൾട്ടിപ്ലക്സ്ഡ് സീക്വൻസിംഗ് റൺസിൽ സാമ്പിളുകളുടെ സമന്വയിത പ്രതിനിധാനം ഉറപ്പാക്കാൻ കൃത്യമായ കണക്ഷൻ അളവുകൾ അനിവാര്യമാണ്.

ട്രാൻസ്ഫെക്ഷൻ പരീക്ഷണങ്ങൾ

യൂക്കറിയോട്ടിക് കോശങ്ങളിൽ DNA അവതരിപ്പിക്കുമ്പോൾ, ഏറ്റവും അനുയോജ്യമായ DNA അളവ് കോശത്തിന്റെ തരം, ട്രാൻസ്ഫെക്ഷൻ രീതി എന്നിവയുടെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു. സാധാരണയായി, 6-വെൽ പ്ലേറ്റ് ഫോർമാറ്റിൽ ഓരോ വെലിലും 0.5-5 μg പ്ലാസ്മിഡ് DNA ഉപയോഗിക്കുന്നു, പരീക്ഷണങ്ങൾ സ്റ്റാൻഡർഡ് ചെയ്യാൻ കൃത്യമായ കണക്ഷൻ അളവുകൾ ആവശ്യമാണ്.

ഫോറൻസിക് DNA വിശകലനം

ഫോറൻസിക് അപേക്ഷകളിൽ, DNA സാമ്പിളുകൾ സാധാരണയായി പരിമിതവും വിലമതിക്കപ്പെടുന്നതുമാണ്. കൃത്യമായ അളവുകൾ ഫോറൻസിക് ശാസ്ത്രജ്ഞരെ പ്രൊഫൈലിംഗിന് ആവശ്യമായ മതിയായ DNA ഉണ്ടോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു, കൂടാതെ തുടര്‍ന്നുള്ള വിശകലനങ്ങളിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന DNA അളവുകൾ സ്റ്റാൻഡർഡ് ചെയ്യാൻ.

റെസ്ട്രിക്ഷൻ എൻസൈം ഡിജസ്റ്റേഷൻ

റെസ്ട്രിക്ഷൻ എൻസൈമുകൾ DNA-യുടെ μg-ൽ നിർവചിച്ച പ്രത്യേക പ്രവർത്തന യൂണിറ്റുകൾ ഉണ്ട്. കൃത്യമായ DNA കണക്ഷൻ അറിയുന്നത് ശരിയായ എൻസൈം-ടു-DNA അനുപാതങ്ങൾ ഉറപ്പാക്കാൻ സഹായിക്കുന്നു, സ്റ്റാർ പ്രവർത്തനമില്ലാതെ (അന്യ-സ്പെസിഫിക് കട്ടിംഗ്) പൂര്‍ണമായ ഡിജസ്റ്റേഷൻ ഉറപ്പാക്കുന്നു.

സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് അളവിന് ബദൽ

UV സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി DNA അളവിനുള്ള ഏറ്റവും സാധാരണമായ രീതി ആയിരിക്കുമ്പോൾ, നിരവധി ബദലുകൾ ഉണ്ട്:

1. ഫ്ലൂറോമെട്രിക് രീതി:

   • PicoGreen, Qubit, SYBR Green പോലുള്ള ഫ്ലോറസന്റ് ഡൈകൾ ഇരട്ട-സ്ട്രാൻഡഡ് DNA-യുമായി പ്രത്യേകമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു
   • സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക്ക് അപേക്ഷയേക്കാൾ കൂടുതൽ സൻസിറ്റീവ് (25 pg/mL വരെ കണ്ടെത്താൻ കഴിയും)
   • പ്രോട്ടീനുകൾ, RNA, അല്ലെങ്കിൽ സ്വതന്ത്ര ന്യുക്ലിയോടൈഡുകൾ പോലുള്ള അശുദ്ധികളാൽ കുറച്ച് ബാധിക്കപ്പെടുന്നു
   • ഫ്ലോറോമീറ്റർ, പ്രത്യേക രാസവസ്തുക്കൾ ആവശ്യമാണ്

2. അഗാരോസ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറസിസ്:

   • DNA അളവുകൾ അറിയപ്പെടുന്ന കണക്ഷനുള്ള സ്റ്റാൻഡേർഡുകളുമായി ബാൻഡ് ഇൻറൻസിറ്റിയെ താരതമ്യം ചെയ്ത് കണക്കാക്കാം
   • DNA വലുപ്പം, അശുദ്ധി എന്നിവയെക്കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങൾ ഒരുമിച്ച് നൽകുന്നു
   • സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് അല്ലെങ്കിൽ ഫ്ലോറോമെട്രിക് രീതി കണക്കാക്കുന്നതിന് കുറച്ച് കൃത്യതയുണ്ട്
   • സമയം ചെലവേറും, പക്ഷേ ദൃശ്യ സ്ഥിരീകരണത്തിന് ഉപകാരപ്രദമാണ്

3. റിയൽ-ടൈം PCR:

   • പ്രത്യേക DNA ശ്രേണികളെ കണക്കാക്കുന്നതിനുള്ള വളരെ സൻസിറ്റീവ് രീതി
   • വളരെ കുറഞ്ഞ കണക്ഷനുകൾ (ചില കോപ്പികൾ വരെ) കണ്ടെത്താൻ കഴിയും
   • പ്രത്യേക പ്രൈമറുകൾ, കൂടുതൽ സങ്കീർണ്ണമായ ഉപകരണങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്
   • ശ്രേണിക്ക് പ്രത്യേകമായ കണക്ഷൻ ആവശ്യമായപ്പോൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു

4. ഡിജിറ്റൽ PCR:

   • സ്റ്റാൻഡേർഡ് കർവുകൾ ഇല്ലാതെ കൃത്യമായ കണക്ഷൻ
   • കുറഞ്ഞ അളവിലുള്ള ലക്ഷ്യങ്ങൾക്കായി വളരെ കൃത്യമായ
   • വില കൂടിയ, പ്രത്യേക ഉപകരണങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്
   • അപൂർവ മ്യൂട്ടേഷൻ കണ്ടെത്തൽ, കോപ്പി നമ്പർ വ്യത്യാസം വിശകലനത്തിന് ഉപയോഗിക്കുന്നു

DNA Concentration Measurement-ന്റെ ചരിത്രം

DNA concentration കൃത്യമായി അളക്കാനുള്ള കഴിവ് ആണവ ജൈവശാസ്ത്രത്തിലെ പുരോഗതികളോടൊപ്പം വളരെ മാറ്റം വന്നിട്ടുണ്ട്:

പ്രാരംഭ രീതി (1950-1960)

1953-ൽ വാട്ട്സൺ, ക്രിക്ക് എന്നിവരുടെ DNA ഘടനയുടെ കണ്ടെത്തലിന് ശേഷം, ശാസ്ത്രജ്ഞർ DNA-യെ വേർതിരിച്ച് അളക്കുന്നതിനുള്ള രീതി വികസിപ്പിക്കാൻ ആരംഭിച്ചു. പ്രാരംഭ സമീപനങ്ങൾ ഡിപ്ഹെനൈൽഅമൈൻ പ്രതികരണത്തെ പോലുള്ള നിറം അളവുകൾ ആശ്രയിച്ചിരുന്നുവെന്ന്, ഇത് DNA-യിലെ ഡിഒക്സിരിബോസ് ഷുഗറുകളുമായി പ്രതികരിക്കുമ്പോൾ നീല നിറം ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു. ഈ രീതി വളരെ കുറച്ച് സൻസിറ്റീവ് ആയിരുന്നു, ഇടപെടലുകൾക്ക് വിധേയമായിരുന്നു.

സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് കാലഘട്ടം (1970)

ന്യുക്ലിയിക് ആസിഡ് അളവിനായി UV സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിയുടെ പ്രയോഗം 1970-കളിൽ വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കപ്പെട്ടു. ശാസ്ത്രജ്ഞർ DNA 260nm-ൽ UV വെളിച്ചം ആബ്സോർബ് ചെയ്യുന്നതായി കണ്ടെത്തുകയും, ആബ്സോർബൻസ്, കണക്ഷൻ എന്നിവയുടെ ഇടയിൽ ഒരു രേഖീയ ബന്ധം ഉണ്ടെന്ന് കണ്ടെത്തുകയും ചെയ്തു. A260 = 1.0-ന് ഇരട്ട-സ്ട്രാൻഡഡ് DNA-യ്ക്ക് 50 ng/μL എന്ന മാറ്റം ഘടകം ഈ കാലയളവിൽ സ്ഥാപിതമായിരുന്നു.

ഫ്ലൂറോമെട്രിക് വിപ്ലവം (1980-1990)

1980-കളിലും 1990-കളിലും DNA-സാധാരണമായ ഫ്ലോറസന്റ് ഡൈകൾ വികസിപ്പിച്ചെടുത്തത്, പ്രത്യേകിച്ച് ഡില്യൂട്ട് ചെയ്ത സാമ്പിളുകൾക്കായി DNA അളവിൽ വിപ്ലവം സൃഷ്ടിച്ചു. ഹോച്‌സ്റ്റ് ഡൈകൾ, പിന്നീട് PicoGreen, സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക്ക് അപേക്ഷയേക്കാൾ കൂടുതൽ സൻസിറ്റീവ് ഡിറ്റക്ഷൻ അനുവദിച്ചു. ഈ രീതി PCR-ന്റെ വരവോടെ, ചെറിയ DNA അളവുകളുടെ കൃത്യമായ അളവുകൾ ആവശ്യമായപ്പോൾ പ്രത്യേകിച്ച് പ്രധാനമായിരുന്നു.

ആധുനിക കാലഘട്ടം (2000-നിന്ന് ഇപ്പോഴുവരെ)

2000-കളുടെ തുടക്കത്തിൽ നാനോഡ്രോപ്പ് പോലുള്ള മൈക്രോവോളിയം സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമീറ്ററുകളുടെ പരിചയപ്പെടുത്തൽ, 0.5-2 μL സാമ്പിളുകൾ മാത്രം ആവശ്യമായതിനാൽ, സാധാരണ DNA അളവിൽ മാറ്റം വരുത്തി. ഈ സാങ്കേതികവിദ്യ ഡില്യൂഷനുകൾക്കും കുവേറ്റുകൾക്കും ആവശ്യമില്ല, പ്രക്രിയയെ വേഗത്തിലാക്കുകയും കൂടുതൽ സൗകര്യപ്രദമാക്കുകയും ചെയ്തു.

ഇന്നത്തെ ദിവസം, ഡിജിറ്റൽ PCR, അടുത്ത തലമുറ സീക്വൻസിംഗ് പോലുള്ള പുരോഗമിച്ച സാങ്കേതികവിദ്യകൾ DNA അളവിന്റെ അതിരുകൾ കൂടുതൽ മുന്നോട്ട് കൊണ്ടുപോയിട്ടുണ്ട്, പ്രത്യേക ശ്രേണികളുടെ കൃത്യമായ അളവുകൾക്കും ഏകകണിക ഡിറ്റക്ഷൻ അനുവദിക്കുന്നു. എന്നാൽ, ദശകങ്ങളായി സ്ഥാപിതമായ അടിസ്ഥാന സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് തത്വം ലോകമെമ്പാടുമുള്ള ലാബുകളിൽ സാധാരണ DNA concentration measurement-ന്റെ പിന്‍തുണയാണ്.

പ്രായോഗിക ഉദാഹരണങ്ങൾ

DNA concentration കണക്കാക്കലിന്റെ ചില പ്രായോഗിക ഉദാഹരണങ്ങളിലൂടെ നമുക്ക് കടക്കാം:

ഉദാഹരണം 1: സ്റ്റാൻഡർഡ് പ്ലാസ്മിഡ് തയ്യാറാക്കൽ

ഒരു ഗവേഷകൻ ഒരു പ്ലാസ്മിഡ് ശുദ്ധീകരിച്ച് താഴെ കൊടുത്തിരിക്കുന്ന അളവുകൾ കൈവശം വെച്ചിട്ടുണ്ട്:

• A260 വായന: 0.75
• ഡില്യൂഷൻ: 1:10 (ഡില്യൂഷൻ ഘടകം =