Калькулятор объема образца для анализа BCA в лабораторных протоколах

Расчет точных объемов образцов на основе показаний абсорбции анализа BCA и желаемой массы белка. Необходимо для стабильной загрузки белка в вестерн-блотах и других лабораторных приложениях.

Калькулятор объема образца BCA по абсорбции

Этот инструмент рассчитывает необходимый объем образца на основе результатов абсорбции BCA и массы образца. Введите значение абсорбции и массу образца для каждого образца, чтобы рассчитать соответствующий объем образца.

standardCurveTitle

standardCurveTypeLabel

curveTypeStandard

curveTypeEnhanced

curveTypeMicro

curveTypeCustom

Входные данные образца

Образец 1

Название образца

Абсорбция BCA*

Масса образца (мкг)*

Объем образца

Copy

N/A μL

Формула расчета

Объем образца рассчитывается по следующей формуле:

Объем образца (мкл) = Масса образца (мкг) / Концентрация белка (мкг/мкл)

usageTipsTitle

• tipAbsorbanceRange

• tipSampleMass

• tipSampleVolume

• tipStandardCurve

📚

Документация

Калькулятор объема образца для измерения абсорбции BCA

Введение

Калькулятор объема образца для измерения абсорбции BCA — это специализированный инструмент, разработанный для помощи исследователям и лабораторным техникам в точном определении подходящего объема образца для экспериментов на основе результатов анализа BCA (бицинхоновой кислоты). Этот калькулятор принимает показания абсорбции из вашего анализа BCA и желаемую массу образца, чтобы рассчитать точный объем, необходимый для стабильной загрузки белка в таких приложениях, как вестерн-блоттинг, ферментативные анализы и другие методы анализа белков.

Анализ BCA является одним из самых широко используемых методов количественного определения белка в лабораториях биохимии и молекулярной биологии. Измеряя абсорбцию ваших образцов белка и сравнивая их с кривой стандарта, вы можете определить концентрацию белка с высокой точностью. Наш калькулятор упрощает этот процесс, автоматически преобразуя показания абсорбции в точные объемы образцов, необходимые для ваших экспериментов.

Понимание анализа BCA и расчета объема образца

Что такое анализ BCA?

Анализ бицинхоновой кислоты (BCA) — это биохимический анализ для определения общей концентрации белка в растворе. Принцип этого анализа основан на образовании комплекса Cu²⁺-белка в щелочных условиях, за которым следует восстановление Cu²⁺ до Cu¹⁺. Количество восстановления пропорционально количеству белка. BCA образует пурпурный комплекс с Cu¹⁺ в щелочной среде, что служит основой для мониторинга восстановления меди белками.

Интенсивность пурпурного цвета увеличивается пропорционально концентрации белка, что можно измерить с помощью спектрофотометра при примерно 562 нм. Показания абсорбции затем сравниваются с кривой стандарта для определения концентрации белка в неизвестных образцах.

Формула для расчета объема образца

Основная формула для расчета объема образца на основе результатов абсорбции BCA:

$\text{Объем образца (μL)} = \frac{\text{Масса образца (μg)}}{\text{Концентрация белка (μg/μL)}}$

Где:

Объем образца — это объем необходимого образца (в микролитрах, μL)
Масса образца — это желаемое количество белка для использования (в микрограммах, μg)
Концентрация белка — это значение, полученное из показания абсорбции BCA (в μg/μL)

Концентрация белка рассчитывается из показания абсорбции с использованием уравнения кривой стандарта:

$\text{Концентрация белка (μg/μL)} = \text{Наклон} \times \text{Абсорбция} + \text{Пересечение}$

Для стандартного анализа BCA типичный наклон составляет примерно 2.0, а пересечение часто близко к нулю, хотя эти значения могут варьироваться в зависимости от условий вашего анализа и кривой стандарта.

Как использовать калькулятор объема образца для измерения абсорбции BCA

Наш калькулятор упрощает процесс определения объемов образцов на основе результатов анализа BCA. Следуйте этим шагам, чтобы получить точные расчеты:

Введите информацию об образце:
- Укажите имя вашего образца (необязательно, но полезно для отслеживания нескольких образцов)
- Введите показание абсорбции BCA с вашего спектрофотометра
- Введите желаемую массу образца (количество белка, которое вы хотите использовать в μg)
Выберите тип кривой стандарта:
- Стандартная (по умолчанию): использует типичные параметры стандартной кривой BCA
- Увеличенная: для протокола с повышенной чувствительностью
- Микро: для протокола микропластин
- Пользовательская: позволяет ввести свои собственные значения наклона и пересечения
Просмотрите результаты:
- Калькулятор мгновенно отобразит требуемый объем образца в микролитрах
- Результаты также представлены в сводной таблице для удобства
- Для нескольких образцов вы можете добавить больше записей и сравнить результаты
Скопируйте или экспортируйте результаты:
- Используйте кнопку копирования, чтобы перенести результаты в ваш лабораторный блокнот или другие приложения
- Все расчеты могут быть сохранены для дальнейшего использования

Пример пошагового расчета

Давайте рассмотрим практический пример:

Вы провели анализ BCA и получили показание абсорбции 0.75 для вашего образца белка.
Вы хотите загрузить 20 μg белка для вашего вестерн-блотта.
Используя стандартную кривую (наклон = 2.0, пересечение = 0):
- Концентрация белка = 2.0 × 0.75 + 0 = 1.5 μg/μL
- Необходимый объем образца = 20 μg ÷ 1.5 μg/μL = 13.33 μL

Это означает, что вам следует загрузить 13.33 μL вашего образца, чтобы получить 20 μg белка.

Понимание результатов

Калькулятор предоставляет несколько важных данных:

Концентрация белка: Это значение рассчитывается из вашего показания абсорбции с использованием выбранной кривой стандарта. Оно представляет собой количество белка на единицу объема в вашем образце (μg/μL).
Объем образца: Это объем вашего образца, содержащий желаемое количество белка. Это значение вы будете использовать при подготовке ваших экспериментов.
Предупреждения и рекомендации: Калькулятор может предоставить предупреждения для:
- Очень высоких показаний абсорбции (>3.0), которые могут находиться за пределами линейного диапазона анализа
- Очень низких показаний абсорбции (<0.1), которые могут быть близки к пределу обнаружения
- Рассчитанных объемов, которые являются непрактично большими (>1000 μL) или маленькими (<1 μL)

Применения и случаи использования

Подготовка образцов для вестерн-блоттинга

Одним из самых распространенных применений этого калькулятора является подготовка образцов для вестерн-блоттинга. Согласованная загрузка белка имеет решающее значение для надежных результатов вестерн-блоттинга, и этот калькулятор гарантирует, что вы загружаете одинаковое количество белка для каждого образца, даже когда их концентрации различаются.

Пример рабочего процесса:

Проведите анализ BCA на всех ваших образцах белка
Определите согласованное количество белка для загрузки (обычно 10-50 μg)
Используйте калькулятор, чтобы определить объем, необходимый для каждого образца
Добавьте соответствующие объемы буфера образца и восстановителя
Загрузите рассчитанные объемы на ваш гель

Ферментативные анализы

Для ферментативных анализов часто необходимо использовать определенное количество белка для стандартизации условий реакции между различными образцами или экспериментами.

Пример рабочего процесса:

Определите концентрацию белка, используя анализ BCA
Рассчитайте объем, необходимый для получения желаемого количества белка
Добавьте этот объем в вашу реакционную смесь
Продолжайте с вашим ферментативным анализом

Эксперименты по иммуноосаждению

В экспериментах по иммуноосаждению (IP) важно начинать с согласованного количества белка для сравнения результатов между различными условиями.

Пример рабочего процесса:

Измерьте концентрацию белка клеточных или тканевых лизатов с помощью анализа BCA
Рассчитайте объемы, необходимые для получения равных количеств белка (обычно 500-1000 μg)
Отрегулируйте все образцы до одного и того же объема с помощью буфера лизиса
Продолжайте с инкубацией антител и осаждением

Очищение белка

Во время очищения белка часто необходимо отслеживать концентрацию белка и рассчитывать выходы на различных этапах.

Пример рабочего процесса:

Соберите фракции во время очищения
Проведите анализ BCA на выбранных фракциях
Рассчитайте концентрацию белка и общее количество белка
Определите объемы, необходимые для последующих приложений

Расширенные функции и соображения

Пользовательские кривые стандарта

Хотя калькулятор предоставляет значения по умолчанию для стандартных анализов BCA, вы также можете ввести пользовательские значения, если вы создали свою собственную кривую стандарта. Это особенно полезно, когда:

Работаете с нестандартными образцами белка
Используете модифицированные протоколы BCA
Работаете в присутствии веществ, которые могут мешать анализу

Чтобы использовать пользовательскую кривую стандарта:

Выберите "Пользовательская" из параметров кривой стандарта
Введите свои значения наклона и пересечения
Калькулятор будет использовать эти значения для всех последующих расчетов

Работа с несколькими образцами

Калькулятор позволяет вам добавлять несколько образцов и одновременно рассчитывать их объемы. Это особенно полезно при подготовке образцов для экспериментов, которые требуют согласованной загрузки белка между несколькими условиями.

Преимущества пакетной обработки:

Экономия времени за счет одновременного расчета всех объемов
Обеспечение согласованности между всеми вашими образцами
Легкость сравнения концентраций белка между образцами
Выявление выбросов или потенциальных ошибок измерения

Обработка крайних случаев

Очень высокие показания абсорбции

Если ваше показание абсорбции выше 2.0, оно может находиться за пределами линейного диапазона анализа BCA. В таких случаях:

Разведите ваш образец и повторите анализ BCA
В качестве альтернативы используйте систему предупреждений калькулятора, которая отметит потенциально проблемные показания

Очень низкие показания абсорбции

Для показаний абсорбции ниже 0.1 вы можете находиться близко к пределу обнаружения анализа, что может повлиять на точность. Рассмотрите возможность:

Концентрирования вашего образца, если это возможно
Использования более чувствительного метода количественного определения белка
Корректировки вашего экспериментального дизайна для учета более низких количеств белка

Непрактично большие рассчитанные объемы

Если калькулятор предлагает объем, который слишком велик для вашего приложения:

Рассмотрите возможность концентрации вашего белкового образца
Если ваш эксперимент позволяет, уменьшите желаемое количество белка
Используйте максимальный практичный объем и отметьте фактическое количество белка, которое было использовано

История количественного определения белка и анализа BCA

Точное количественное определение белков было основным требованием в биохимии и молекулярной биологии с тех пор, как эти области возникли. Ранние методы основывались на определении содержания азота, что было трудоемким и требовало специализированного оборудования.

Эволюция методов количественного определения белка

Метод Кьельдаля (1883): Один из первых методов количественного определения белка, основанный на измерении содержания азота.
Биуретный тест (начало 1900-х): Этот метод основывается на реакции между пептидными связями и ионами меди в щелочном растворе, производя фиолетовый цвет.
Анализ Лоури (1951): Разработанный Оливером Лоури, этот метод сочетал биуретную реакцию с реагентом Фолина-Циолкальтеу, увеличивая чувствительность.
Анализ Бредфорда (1976): Марион Бредфорд разработала этот метод, используя краситель Кумаcи Бриллиантовый Синий G-250, который связывается с белками и смещает максимальную абсорбцию.
Анализ BCA (1985): Разработанный Полом Смитом и коллегами из компании Pierce Chemical, этот метод сочетал биуретную реакцию с обнаружением BCA, предлагая улучшенную чувствительность и совместимость с детергентами.

Разработка анализа BCA

Анализ BCA был впервые описан в статье 1985 года Смитом и др. под названием "Измерение белка с использованием бицинхоновой кислоты". Он был разработан для устранения ограничений существующих методов, особенно помех от различных химических веществ, часто используемых в экстракции и очистке белка.

Ключевым нововведением было использование бицинхоновой кислоты для обнаружения ионов Cu¹⁺, производимых белковым восстановлением Cu²⁺, образуя пурпурный комплекс, который можно было измерить спектрофотометрически. Это обеспечило несколько преимуществ:

Более высокая чувствительность, чем у метода биурета
Меньшая восприимчивость к помехам от не-белковых веществ по сравнению с методом Лоури
Лучшая совместимость с детергентами, чем у анализа Бредфорда
Более простой протокол с меньшим количеством реагентов и шагов

С момента своего появления анализ BCA стал одним из самых широко используемых методов количественного определения белка в лабораториях биохимии и молекулярной биологии по всему миру.

Примеры кода для расчета объема образца

Формула Excel

1=IF(B2<=0,"Ошибка: Неверная абсорбция",IF(C2<=0,"Ошибка: Неверная масса образца",C2/(2*B2)))
2
3' Где:
4' B2 содержит показание абсорбции
5' C2 содержит желаемую массу образца в μg
6' Формула возвращает необходимый объем образца в μL
7

Реализация на Python

1import numpy as np
2import matplotlib.pyplot as plt
3
4def calculate_protein_concentration(absorbance, slope=2.0, intercept=0):
5    """Рассчитать концентрацию белка из абсорбции с использованием кривой стандарта."""
6    if absorbance < 0:
7        raise ValueError("Абсорбция не может быть отрицательной")
8    return (slope * absorbance) + intercept
9
10def calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope=2.0, intercept=0):
11    """Рассчитать необходимый объем образца на основе абсорбции и желаемой массы."""
12    if sample_mass <= 0:
13        raise ValueError("Масса образца должна быть положительной")
14    
15    protein_concentration = calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16    
17    if protein_concentration <= 0:
18        raise ValueError("Рассчитанная концентрация белка должна быть положительной")
19    
20    return sample_mass / protein_concentration
21
22# Пример использования
23absorbance = 0.75
24sample_mass = 20  # μg
25slope = 2.0
26intercept = 0
27
28try:
29    volume = calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
30    print(f"Для абсорбции {absorbance} и желаемой массы белка {sample_mass} μg:")
31    print(f"Концентрация белка: {calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept):.2f} μg/μL")
32    print(f"Необходимый объем образца: {volume:.2f} μL")
33except ValueError as e:
34    print(f"Ошибка: {e}")
35

Код на R для анализа

1# Функция для расчета концентрации белка из абсорбции
2calculate_protein_concentration <- function(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
3  if (absorbance < 0) {
4    stop("Абсорбция не может быть отрицательной")
5  }
6  return((slope * absorbance) + intercept)
7}
8
9# Функция для расчета объема образца
10calculate_sample_volume <- function(absorbance, sample_mass, slope = 2.0, intercept = 0) {
11  if (sample_mass <= 0) {
12    stop("Масса образца должна быть положительной")
13  }
14  
15  protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16  
17  if (protein_concentration <= 0) {
18    stop("Рассчитанная концентрация белка должна быть положительной")
19  }
20  
21  return(sample_mass / protein_concentration)
22}
23
24# Пример использования
25absorbance <- 0.75
26sample_mass <- 20  # μg
27slope <- 2.0
28intercept <- 0
29
30tryCatch({
31  volume <- calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
32  protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
33  
34  cat(sprintf("Для абсорбции %.2f и желаемой массы белка %.2f μg:\n", absorbance, sample_mass))
35  cat(sprintf("Концентрация белка: %.2f μg/μL\n", protein_concentration))
36  cat(sprintf("Необходимый объем образца: %.2f μL\n", volume))
37}, error = function(e) {
38  cat(sprintf("Ошибка: %s\n", e$message))
39})
40

Реализация на JavaScript

1function calculateProteinConcentration(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
2  if (absorbance < 0) {
3    throw new Error("Абсорбция не может быть отрицательной");
4  }
5  return (slope * absorbance) + intercept;
6}
7
8function calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope = 2.0, intercept = 0) {
9  if (sampleMass <= 0) {
10    throw new Error("Масса образца должна быть положительной");
11  }
12  
13  const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
14  
15  if (proteinConcentration <= 0) {
16    throw new Error("Рассчитанная концентрация белка должна быть положительной");
17  }
18  
19  return sampleMass / proteinConcentration;
20}
21
22// Пример использования
23try {
24  const absorbance = 0.75;
25  const sampleMass = 20; // μg
26  const slope = 2.0;
27  const intercept = 0;
28  
29  const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
30  const volume = calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope, intercept);
31  
32  console.log(`Для абсорбции ${absorbance} и желаемой массы белка ${sampleMass} μg:`);
33  console.log(`Концентрация белка: ${proteinConcentration.toFixed(2)} μg/μL`);
34  console.log(`Необходимый объем образца: ${volume.toFixed(2)} μL`);
35} catch (error) {
36  console.error(`Ошибка: ${error.message}`);
37}
38

Визуализация кривой стандарта

Связь между абсорбцией и концентрацией белка обычно линейна в пределах определенного диапазона. Ниже представлена визуализация стандартной кривой BCA:

<text x="150" y="370">0.5</text>
<line x1="150" y1="350" x2="150" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="250" y="370">1.0</text>
<line x1="250" y1="350" x2="250" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="350" y="370">1.5</text>
<line x1="350" y1="350" x2="350" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="450" y="370">2.0</text>
<line x1="450" y1="350" x2="450" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="550" y="370">2.5</text>
<line x1="550" y1="350" x2="550" y2="355" stroke="#64748b"/>

0.0

<text x="45" y="300">1.0</text>
<line x1="45" y1="300" x2="50" y2="300" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="250">2.0</text>
<line x1="45" y1="250" x2="50" y2="250" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="200">3.0</text>
<line x1="45" y1="200" x2="50" y2="200" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="150">4.0</text>
<line x1="45" y1="150" x2="50" y2="150" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="100">5.0</text>
<line x1="45" y1="100" x2="50" y2="100" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="50">6.0</text>
<line x1="45" y1="50" x2="50" y2="50" stroke="#64748b"/>

Абсорбция (562 нм) Концентрация белка (μg/μL)

Стандартная кривая Стандартные образцы

Стандартная кривая BCA

Сравнение с другими методами количественного определения белка

Разные методы количественного определения белка имеют различные преимущества и ограничения. Вот как анализ BCA сравнивается с другими распространенными методами:

Метод	Диапазон чувствительности	Преимущества	Ограничения	Лучше всего для
Анализ BCA	5-2000 μg/mL	• Совместимость с детергентами • Меньшая вариативность белка к белку • Стабильное развитие цвета	• Подвержен помехам от восстанавливающих агентов • Подвержен влиянию некоторых хелатирующих агентов	• Общая количественная оценка белка • Образцы, содержащие детергенты
Анализ Бредфорда	1-1500 μg/mL	• Быстрый (2-5 мин) • Немного мешающих веществ	• Высокая вариативность белка к белку • Несовместимость с детергентами	• Быстрые измерения • Образцы без детергентов
Метод Лоури	1-1500 μg/mL	• Хорошо зарекомендовал себя • Хорошая чувствительность	• Множество мешающих веществ • Многоступенчатый процесс	• Историческая согласованность • Чистые образцы белка
Ультрафиолетовая абсорбция (280 нм)	20-3000 μg/mL	• Неразрушающий • Очень быстрый • Не требует реагентов	• Подвержен влиянию нуклеиновых кислот • Требует чистых образцов	• Чистые белковые растворы • Быстрая проверка в процессе очистки
Флуорометрический	0.1-500 μg/mL	• Наивысшая чувствительность • Широкий динамический диапазон	• Дорогие реагенты • Требует флуориметра	• Очень разбавленные образцы • Ограниченный объем образца

Часто задаваемые вопросы

Для чего используется анализ BCA?

Анализ BCA (бицинхоновой кислоты) в первую очередь используется для количественного определения общей концентрации белка в образце. Он широко используется в биохимии, клеточной биологии и молекулярной биологии для таких приложений, как вестерн-блоттинг, ферментативные анализы, иммуноосаждение и очистка белка.

Насколько точен анализ BCA?

Анализ BCA обычно точен в пределах 5-10%, если он выполнен правильно. Его точность зависит от нескольких факторов, включая качество кривой стандарта, отсутствие мешающих веществ и то, насколько состав неизвестного белка схож с используемым стандартным белком.

Что может помешать результатам анализа BCA?

Несколько веществ могут помешать результатам анализа BCA, включая:

Восстанавливающие агенты (DTT, β-меркаптоэтанол, глутатион)
Хелатирующие агенты (EDTA, EGTA)
Высокие концентрации простых сахаров
Липиды
Некоторые детергенты в высоких концентрациях
Соединения аммония

В чем разница между анализами BCA и Бредфорда?

Основные различия заключаются в следующем:

Анализ BCA более совместим с детергентами и сурфактантами
Анализ Бредфорда быстрее (2-5 минут против 30+ минут для BCA)
BCA имеет меньшую вариативность белка к белку
Бредфорд более чувствителен к основным аминокислотам
BCA подвержен влиянию восстанавливающих агентов, в то время как Бредфорд — нет

Почему мой рассчитанный объем образца слишком велик?

Если ваш калькулятор показывает очень большой объем образца, это обычно указывает на низкую концентрацию белка в вашем образце. Это может быть связано с:

Фактическим низким содержанием белка в вашем исходном образце
Потерей белка во время подготовки
Ошибками в процедуре анализа BCA
Неточными показаниями абсорбции

Рассмотрите возможность концентрации вашего образца или корректировки вашего экспериментального дизайна, чтобы учесть более низкую концентрацию белка.

Могу ли я использовать этот калькулятор для других методов количественного определения белка?

Этот калькулятор специально разработан для результатов анализа BCA. Хотя основной принцип (преобразование концентрации в объем) применим к другим методам, связь между абсорбцией и концентрацией белка варьируется между различными анализами. Для других методов, таких как Бредфорд или Лоури, вам нужно будет использовать различные параметры кривой стандарта.

Как я могу справиться с образцами с абсорбцией за пределами линейного диапазона?

Для показаний абсорбции за пределами линейного диапазона (обычно >2.0):

Разведите ваш образец и повторите анализ BCA
Используйте другой метод количественного определения белка
Отрегулируйте кривую стандарта, чтобы включить стандарты более высокой концентрации

Какой белок мне использовать в качестве стандарта?

Сывороточный альбумин коровы (BSA) является наиболее часто используемым стандартом для анализов BCA, потому что он:

Легко доступен и недорог
Высоко растворим
Стабилен в растворе
Хорошо охарактеризован

Тем не менее, если ваши образцы содержат преобладающий белок, который значительно отличается от BSA, рассмотрите возможность использования этого белка в качестве стандарта для более точных результатов.

Как долго реакция BCA стабильна?

Пурпурный цвет, развивающийся в реакции BCA, стабилен в течение нескольких часов при комнатной температуре и может быть измерен в любое время в течение этого периода. Однако для достижения наилучших результатов рекомендуется измерять все стандарты и образцы примерно в одно и то же время после развития цвета.

Могу ли я повторно использовать кривую стандарта из предыдущего эксперимента?

Хотя технически возможно повторно использовать кривую стандарта, это не рекомендуется для точного количественного определения. Изменения в реагентах, условиях инкубации и калибровке инструмента могут повлиять на взаимосвязь между абсорбцией и концентрацией белка. Для надежных результатов создавайте свежую кривую стандарта каждый раз, когда вы проводите анализ.

Ссылки

Smith PK, Krohn RI, Hermanson GT и др. "Измерение белка с использованием бицинхоновой кислоты." Аналитическая биохимия. 1985;150(1):76-85. doi:10.1016/0003-2697(85)90442-7
Thermo Scientific. "Набор для анализа белка Pierce BCA." Инструкции. Доступно по адресу: https://www.thermofisher.com/document-connect/document-connect.html?url=https%3A%2F%2Fassets.thermofisher.com%2FTFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0011430_Pierce_BCA_Protein_Asy_UG.pdf
Walker JM. "Анализ бицинхоновой кислоты (BCA) для количественного определения белка." В: Walker JM, ред. Руководство по протоколам белка. Springer; 2009:11-15. doi:10.1007/978-1-59745-198-7_3
Olson BJ, Markwell J. "Методы определения концентрации белка." Текущие протоколы в белковой науке. 2007;Глава 3:Единица 3.4. doi:10.1002/0471140864.ps0304s48
Noble JE, Bailey MJ. "Количественное определение белка." Методы в энзимологии. 2009;463:73-95. doi:10.1016/S0076-6879(09)63008-1

Попробуйте наш калькулятор объема образца для измерения абсорбции BCA сегодня!

Теперь, когда вы понимаете принципы количественного определения белка BCA и расчета объема образца, попробуйте наш калькулятор, чтобы упростить ваш лабораторный рабочий процесс. Просто введите ваши показания абсорбции и желаемую массу образца, чтобы получить мгновенные, точные расчеты объема образца.

Будь то подготовка образцов для вестерн-блоттинга, ферментативных анализов или любого другого эксперимента на основе белка, наш калькулятор поможет обеспечить согласованные и надежные результаты. Сэкономьте время, уменьшите ошибки и улучшите воспроизводимость ваших экспериментов с помощью калькулятора объема образца для измерения абсорбции BCA.

🔗

Связанные инструменты

Откройте больше инструментов, которые могут быть полезны для вашего рабочего процесса

Калькулятор объема резервуара для цилиндрических, сферических и прямоугольных форм

Попробуйте этот инструмент

Калькулятор объема образца для анализа BCA в лабораторных протоколах

Калькулятор объема образца BCA по абсорбции

standardCurveTitle

Входные данные образца

Образец 1

Формула расчета

Документация

Калькулятор объема образца для измерения абсорбции BCA

Введение

Понимание анализа BCA и расчета объема образца

Что такое анализ BCA?

Формула для расчета объема образца

Как использовать калькулятор объема образца для измерения абсорбции BCA

Пример пошагового расчета

Понимание результатов

Применения и случаи использования

Подготовка образцов для вестерн-блоттинга

Ферментативные анализы

Эксперименты по иммуноосаждению

Очищение белка

Расширенные функции и соображения

Пользовательские кривые стандарта

Работа с несколькими образцами

Обработка крайних случаев

Очень высокие показания абсорбции

Очень низкие показания абсорбции

Непрактично большие рассчитанные объемы

История количественного определения белка и анализа BCA

Эволюция методов количественного определения белка

Разработка анализа BCA

Примеры кода для расчета объема образца

Формула Excel

Реализация на Python

Код на R для анализа

Реализация на JavaScript

Визуализация кривой стандарта

Сравнение с другими методами количественного определения белка

Часто задаваемые вопросы

Для чего используется анализ BCA?

Насколько точен анализ BCA?

Что может помешать результатам анализа BCA?

В чем разница между анализами BCA и Бредфорда?

Почему мой рассчитанный объем образца слишком велик?

Могу ли я использовать этот калькулятор для других методов количественного определения белка?

Как я могу справиться с образцами с абсорбцией за пределами линейного диапазона?

Какой белок мне использовать в качестве стандарта?

Как долго реакция BCA стабильна?

Могу ли я повторно использовать кривую стандарта из предыдущего эксперимента?

Ссылки

Попробуйте наш калькулятор объема образца для измерения абсорбции BCA сегодня!

Связанные инструменты

Калькулятор объема резервуара для цилиндрических, сферических и прямоугольных форм

Калькулятор объема для расчета площади покрытия жидкостью

Калькулятор объема отверстий: Цилиндрические и прямоугольные выемки

Калькулятор объема отверстий: измерение объемов цилиндрических выемок

Калькулятор объема кубической ячейки: Найдите объем по длине ребра

Простой калькулятор коэффициента разведения для лабораторных растворов

Калькулятор объема песка: оцените материал для любого проекта

Калькулятор коэффициента двухфотонного поглощения

Калькулятор молярности: инструмент для расчета концентрации раствора