Калькулятор об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA для лабораторних протоколів

Розрахуйте точні об'єми зразків на основі показників абсорбції BCA та бажаної маси білка. Необхідно для послідовного завантаження білка в західні блоти та інші лабораторні застосування.

Калькулятор об'єму зразка BCA за абсорбції

Цей інструмент розраховує необхідний об'єм зразка на основі результатів абсорбції BCA та маси зразка. Введіть значення абсорбції та масу зразка для кожного зразка, щоб розрахувати відповідний об'єм зразка.

standardCurveTitle

standardCurveTypeLabel

curveTypeStandard

curveTypeEnhanced

curveTypeMicro

curveTypeCustom

Введення зразків

Зразок 1

Назва зразка

Абсорбція BCA*

Маса зразка (мкг)*

Об'єм зразка

Copy

N/A μL

Формула розрахунку

Об'єм зразка розраховується за наступною формулою:

Об'єм зразка (мкл) = Маса зразка (мкг) / Концентрація білка (мкг/мкл)

usageTipsTitle

• tipAbsorbanceRange

• tipSampleMass

• tipSampleVolume

• tipStandardCurve

📚

Документація

Калькулятор об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA

Вступ

Калькулятор об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA — це спеціалізований інструмент, розроблений для допомоги дослідникам та лабораторним технікам у точному визначенні відповідного об'єму зразка для експериментів на основі результатів аналізу BCA (біцинхонінової кислоти). Цей калькулятор використовує показники абсорбції з вашого аналізу BCA та бажану масу зразка для розрахунку точного об'єму, необхідного для послідовного навантаження білка в таких застосуваннях, як західний блотинг, ензиматичні аналізи та інші техніки аналізу білка.

Аналіз BCA є одним з найширше використовуваних методів для кількісного визначення білка в лабораторіях біохімії та молекулярної біології. Вимірюючи абсорбцію ваших білкових зразків та порівнюючи їх зі стандартною кривою, ви можете визначити концентрацію білка з високою точністю. Наш калькулятор спрощує цей процес, автоматично перетворюючи показники абсорбції в точні об'єми зразків, необхідні для ваших експериментів.

Розуміння аналізу BCA та розрахунку об'єму зразка

Що таке аналіз BCA?

Аналіз біцинхонінової кислоти (BCA) — це біохімічний аналіз для визначення загальної концентрації білка в розчині. Принцип цього аналізу ґрунтується на утворенні комплексу Cu²⁺-білка в лужних умовах, за яким слідує відновлення Cu²⁺ до Cu¹⁺. Кількість відновлення пропорційна кількості білка, що присутній. BCA утворює пурпурний комплекс з Cu¹⁺ у лужному середовищі, що забезпечує основу для моніторингу відновлення міді білками.

Інтенсивність пурпурного кольору зростає пропорційно до концентрації білка, що може бути виміряно за допомогою спектрофотометра на приблизно 562 нм. Показники абсорбції потім порівнюються зі стандартною кривою для визначення концентрації білка в невідомих зразках.

Формула для розрахунку об'єму зразка

Основна формула для розрахунку об'єму зразка на основі результатів абсорбції BCA:

$\text{Об'єм зразка (μL)} = \frac{\text{Маса зразка (μg)}}{\text{Концентрація білка (μg/μL)}}$

Де:

Об'єм зразка — це об'єм зразка, що потрібен (в мікролітрах, μL)
Маса зразка — це бажана кількість білка для використання (в мікрограмах, μg)
Концентрація білка — визначається з показника абсорбції аналізу BCA (в μg/μL)

Концентрація білка розраховується з показника абсорбції за допомогою рівняння стандартної кривої:

$\text{Концентрація білка (μg/μL)} = \text{Нахил} \times \text{Абсорбція} + \text{Перетворення}$

Для стандартного аналізу BCA типовий нахил приблизно дорівнює 2.0, а перетворення часто близьке до нуля, хоча ці значення можуть варіюватися в залежності від специфічних умов вашого аналізу та стандартної кривої.

Як користуватися калькулятором об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA

Наш калькулятор спрощує процес визначення об'єму зразків за результатами аналізу BCA. Дотримуйтесь цих кроків, щоб отримати точні розрахунки:

Введіть інформацію про зразок:
- Введіть назву вашого зразка (необов'язково, але корисно для відстеження кількох зразків)
- Введіть показник абсорбції з вашого спектрофотометра
- Введіть бажану масу зразка (кількість білка, яку ви хочете використати в μg)
Виберіть тип стандартної кривої:
- Стандартна (за замовчуванням): використовує типові параметри стандартної кривої BCA
- Підвищена: для протоколу підвищеної чутливості
- Мікро: для протоколу мікропланшета
- Користувацька: дозволяє ввести власні значення нахилу та перетворення
Перегляньте результати:
- Калькулятор миттєво відобразить необхідний об'єм зразка в мікролітрах
- Результати також представлені в таблиці підсумків для легкого посилання
- Для кількох зразків ви можете додати більше записів і порівняти результати
Скопіюйте або експортуйте результати:
- Використовуйте кнопку копіювання, щоб перенести результати до вашого лабораторного щоденника або інших застосувань
- Усі розрахунки можна зберегти для подальшого використання

Приклад крок за кроком

Давайте пройдемо через практичний приклад:

Ви провели аналіз BCA і отримали показник абсорбції 0.75 для вашого білкового зразка.
Ви хочете завантажити 20 μg білка для вашого західного блоту.
Використовуючи стандартну криву (нахил = 2.0, перетворення = 0):
- Концентрація білка = 2.0 × 0.75 + 0 = 1.5 μg/μL
- Необхідний об'єм зразка = 20 μg ÷ 1.5 μg/μL = 13.33 μL

Це означає, що вам слід завантажити 13.33 μL вашого зразка, щоб отримати 20 μg білка.

Розуміння результатів

Калькулятор надає кілька важливих відомостей:

Концентрація білка: Це розраховується з вашого показника абсорбції за допомогою вибраної стандартної кривої. Це представляє кількість білка на одиницю об'єму у вашому зразку (μg/μL).
Об'єм зразка: Це об'єм вашого зразка, що містить вашу бажану кількість білка. Це значення — те, що ви будете використовувати при підготовці ваших експериментів.
Попередження та рекомендації: Калькулятор може надавати попередження для:
- Дуже високих показників абсорбції (>3.0), які можуть бути за межами лінійного діапазону аналізу
- Дуже низьких показників абсорбції (<0.1), які можуть бути біля межі виявлення
- Обчислених об'ємів, які є непрактично великими (>1000 μL) або малими (<1 μL)

Застосування та випадки використання

Підготовка зразків для західного блоту

Одним з найпоширеніших застосувань для цього калькулятора є підготовка зразків для західного блотингу. Послідовне навантаження білка є критично важливим для надійних результатів західного блоту, і цей калькулятор гарантує, що ви завантажуєте однакову кількість білка для кожного зразка, навіть коли їх концентрації відрізняються.

Приклад робочого процесу:

Проведіть аналіз BCA на всіх ваших білкових зразках
Визначте послідовну кількість білка для навантаження (зазвичай 10-50 μg)
Використовуйте калькулятор, щоб визначити обсяги, необхідні для кожного зразка
Додайте відповідні обсяги буфера зразка та відновлювального агента
Завантажте обчислені обсяги на ваш гель

Ензиматичні аналізи

Для ензиматичних аналізів часто необхідно використовувати певну кількість білка для стандартизації умов реакції між різними зразками або експериментами.

Приклад робочого процесу:

Визначте концентрацію білка, використовуючи аналіз BCA
Розрахуйте об'єм, необхідний для отримання бажаної кількості білка
Додайте цей об'єм до вашої реакційної суміші
Продовжте з вашим ензиматичним аналізом

Експерименти з імунопреципітацією

У експериментах з імунопреципітацією важливо почати з послідовної кількості білка для порівняння результатів між різними умовами.

Приклад робочого процесу:

Виміряйте концентрацію білка клітинних або тканинних лізатів за допомогою аналізу BCA
Розрахуйте обсяги, необхідні для отримання однакових кількостей білка (зазвичай 500-1000 μg)
Відрегулюйте всі зразки до одного й того ж об'єму з буфером лізису
Продовжте з інкубацією антитіла та преципітацією

Очищення білка

Під час очищення білка часто необхідно відстежувати концентрацію білка та розраховувати виходи на різних етапах.

Приклад робочого процесу:

Збирайте фракції під час очищення
Проведіть аналіз BCA на вибраних фракціях
Розрахуйте концентрацію білка та загальну кількість білка
Визначте обсяги, необхідні для подальших застосувань

Розширені функції та міркування

Користувацькі стандартні криві

Хоча калькулятор надає стандартні параметри для стандартних аналізів BCA, ви також можете ввести власні значення, якщо ви створили власну стандартну криву. Це особливо корисно, коли:

Працюєте з нестандартними білковими зразками
Використовуєте модифіковані протоколи BCA
Працюєте в присутності речовин, які можуть перешкоджати аналізу

Щоб використовувати користувацьку стандартну криву:

Виберіть "Користувацька" з параметрів стандартної кривої
Введіть свої значення нахилу та перетворення
Калькулятор використовуватиме ці значення для всіх подальших розрахунків

Обробка кількох зразків

Калькулятор дозволяє вам додавати кілька зразків і розраховувати їх обсяги одночасно. Це особливо корисно, коли ви готуєте зразки для експериментів, які вимагають послідовного навантаження білка між кількома умовами.

Переваги пакетної обробки:

Заощаджуйте час, розраховуючи всі обсяги одночасно
Забезпечте послідовність між усіма вашими зразками
Легко порівнюйте концентрації білка між зразками
Виявляйте аномалії або потенційні помилки вимірювання

Обробка крайніх випадків

Дуже високі показники абсорбції

Якщо ваш показник абсорбції перевищує 2.0, це може бути за межами лінійного діапазону аналізу BCA. У таких випадках:

Розведіть ваш зразок і повторіть аналіз BCA
Або використовуйте систему попереджень калькулятора, яка позначить потенційно проблемні показники

Дуже низькі показники абсорбції

Для показників абсорбції нижче 0.1 ви можете бути біля межі виявлення аналізу, що може вплинути на точність. Розгляньте:

Концентрування вашого зразка, якщо це можливо
Використання більш чутливого методу кількісного визначення білка
Коригування вашого експериментального дизайну для врахування нижчих кількостей білка

Непрактично великі обчислені обсяги

Якщо калькулятор пропонує об'єм, який є занадто великим для вашого застосування:

Розгляньте можливість концентрації вашого білкового зразка
Зменшіть вашу бажану кількість білка, якщо ваш експеримент це дозволяє
Використовуйте максимальний практичний об'єм і зафіксуйте фактичну кількість білка, що використовується

Історія кількісного визначення білків та аналізу BCA

Точне кількісне визначення білків є основною вимогою в біохімії та молекулярній біології з моменту виникнення цих галузей. Ранні методи спиралися на визначення вмісту азоту, що вимагало багато часу та спеціального обладнання.

Еволюція методів кількісного визначення білків

Метод К'єльдаля (1883): Один з найперших методів для кількісного визначення білка, заснований на вимірюванні вмісту азоту.
Біуретний тест (початок 1900-х): Цей метод спирається на реакцію між пептидними зв'язками та іонами міді в лужному розчині, що призводить до утворення фіолетового кольору.
Аналіз Лоурі (1951): Розроблений Олівером Лоурі, цей метод поєднує біуретну реакцію з реагентом Фоліна-Ціокальтеу, підвищуючи чутливість.
Аналіз Бредфорда (1976): Маріон Бредфорд розробила цей метод, використовуючи барвник Coomassie Brilliant Blue G-250, який зв'язується з білками та зміщує максимум поглинання.
Аналіз BCA (1985): Розроблений Полом Смітом та колегами в компанії Pierce Chemical, цей метод поєднує біуретну реакцію з виявленням BCA, пропонуючи підвищену чутливість та сумісність з мийними засобами.

Розвиток аналізу BCA

Аналіз BCA вперше був описаний у статті 1985 року Сміта та ін. під назвою "Вимірювання білка за допомогою біцинхонінової кислоти". Він був розроблений, щоб вирішити обмеження існуючих методів, зокрема перешкоди від різних хімічних речовин, які зазвичай використовуються в екстракції та очищенні білків.

Ключовою інновацією було використання біцинхонінової кислоти для виявлення іонів Cu¹⁺, що утворюються внаслідок відновлення Cu²⁺, утворюючи пурпурний комплекс, який можна виміряти спектрофотометром. Це надало кілька переваг:

Вища чутливість, ніж метод біурету
Менша сприйнятливість до перешкод з боку не білкових речовин у порівнянні з методом Лоурі
Краща сумісність з мийними засобами, ніж аналіз Бредфорда
Простий протокол з меншими реагентами та етапами

З моменту свого впровадження аналіз BCA став одним з найширше використовуваних методів кількісного визначення білка в лабораторіях біохімії та молекулярної біології по всьому світу.

Приклади коду для розрахунку об'єму зразка

Формула Excel

1=IF(B2<=0,"Помилка: Неправильна абсорбція",IF(C2<=0,"Помилка: Неправильна маса зразка",C2/(2*B2)))
2
3' Де:
4' B2 містить показник абсорбції
5' C2 містить бажану масу зразка в μg
6' Формула повертає необхідний об'єм зразка в μL
7

Реалізація на Python

1import numpy as np
2import matplotlib.pyplot as plt
3
4def calculate_protein_concentration(absorbance, slope=2.0, intercept=0):
5    """Розрахувати концентрацію білка з абсорбції за допомогою стандартної кривої."""
6    if absorbance < 0:
7        raise ValueError("Абсорбція не може бути негативною")
8    return (slope * absorbance) + intercept
9
10def calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope=2.0, intercept=0):
11    """Розрахувати необхідний об'єм зразка на основі абсорбції та бажаної маси."""
12    if sample_mass <= 0:
13        raise ValueError("Маса зразка повинна бути позитивною")
14    
15    protein_concentration = calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16    
17    if protein_concentration <= 0:
18        raise ValueError("Обчислена концентрація білка повинна бути позитивною")
19    
20    return sample_mass / protein_concentration
21
22# Приклад використання
23absorbance = 0.75
24sample_mass = 20  # μg
25slope = 2.0
26intercept = 0
27
28try:
29    volume = calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
30    print(f"Для абсорбції {absorbance} і бажаної маси білка {sample_mass} μg:")
31    print(f"Концентрація білка: {calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept):.2f} μg/μL")
32    print(f"Необхідний об'єм зразка: {volume:.2f} μL")
33except ValueError as e:
34    print(f"Помилка: {e}")
35

Код на R для аналізу

1# Функція для розрахунку концентрації білка з абсорбції
2calculate_protein_concentration <- function(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
3  if (absorbance < 0) {
4    stop("Абсорбція не може бути негативною")
5  }
6  return((slope * absorbance) + intercept)
7}
8
9# Функція для розрахунку об'єму зразка
10calculate_sample_volume <- function(absorbance, sample_mass, slope = 2.0, intercept = 0) {
11  if (sample_mass <= 0) {
12    stop("Маса зразка повинна бути позитивною")
13  }
14  
15  protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16  
17  if (protein_concentration <= 0) {
18    stop("Обчислена концентрація білка повинна бути позитивною")
19  }
20  
21  return(sample_mass / protein_concentration)
22}
23
24# Приклад використання
25absorbance <- 0.75
26sample_mass <- 20  # μg
27slope <- 2.0
28intercept <- 0
29
30tryCatch({
31  volume <- calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
32  protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
33  
34  cat(sprintf("Для абсорбції %.2f і бажаної маси білка %.2f μg:\n", absorbance, sample_mass))
35  cat(sprintf("Концентрація білка: %.2f μg/μL\n", protein_concentration))
36  cat(sprintf("Необхідний об'єм зразка: %.2f μL\n", volume))
37}, error = function(e) {
38  cat(sprintf("Помилка: %s\n", e$message))
39})
40

Реалізація на JavaScript

1function calculateProteinConcentration(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
2  if (absorbance < 0) {
3    throw new Error("Абсорбція не може бути негативною");
4  }
5  return (slope * absorbance) + intercept;
6}
7
8function calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope = 2.0, intercept = 0) {
9  if (sampleMass <= 0) {
10    throw new Error("Маса зразка повинна бути позитивною");
11  }
12  
13  const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
14  
15  if (proteinConcentration <= 0) {
16    throw new Error("Обчислена концентрація білка повинна бути позитивною");
17  }
18  
19  return sampleMass / proteinConcentration;
20}
21
22// Приклад використання
23try {
24  const absorbance = 0.75;
25  const sampleMass = 20; // μg
26  const slope = 2.0;
27  const intercept = 0;
28  
29  const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
30  const volume = calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope, intercept);
31  
32  console.log(`Для абсорбції ${absorbance} і бажаної маси білка ${sampleMass} μg:`);
33  console.log(`Концентрація білка: ${proteinConcentration.toFixed(2)} μg/μL`);
34  console.log(`Необхідний об'єм зразка: ${volume.toFixed(2)} μL`);
35} catch (error) {
36  console.error(`Помилка: ${error.message}`);
37}
38

Візуалізація стандартної кривої

Взаємозв'язок між абсорбцією та концентрацією білка зазвичай є лінійним у певному діапазоні. Нижче наведена візуалізація стандартної кривої BCA:

<text x="150" y="370">0.5</text>
<line x1="150" y1="350" x2="150" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="250" y="370">1.0</text>
<line x1="250" y1="350" x2="250" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="350" y="370">1.5</text>
<line x1="350" y1="350" x2="350" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="450" y="370">2.0</text>
<line x1="450" y1="350" x2="450" y2="355" stroke="#64748b"/>

<text x="550" y="370">2.5</text>
<line x1="550" y1="350" x2="550" y2="355" stroke="#64748b"/>

0.0

<text x="45" y="300">1.0</text>
<line x1="45" y1="300" x2="50" y2="300" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="250">2.0</text>
<line x1="45" y1="250" x2="50" y2="250" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="200">3.0</text>
<line x1="45" y1="200" x2="50" y2="200" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="150">4.0</text>
<line x1="45" y1="150" x2="50" y2="150" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="100">5.0</text>
<line x1="45" y1="100" x2="50" y2="100" stroke="#64748b"/>

<text x="45" y="50">6.0</text>
<line x1="45" y1="50" x2="50" y2="50" stroke="#64748b"/>

Абсорбція (562 нм) Концентрація білка (μg/μL)

Стандартна крива Стандартні зразки

Стандартна крива BCA

Порівняння з іншими методами кількісного визначення білків

Різні методи кількісного визначення білків мають різні переваги та обмеження. Ось як аналіз BCA порівнюється з іншими загальноприйнятими методами:

Метод	Діапазон чутливості	Переваги	Обмеження	Найкраще підходить для
Аналіз BCA	5-2000 μg/mL	• Сумісний з мийними засобами • Менша варіація між білками • Стабільний розвиток кольору	• Перешкоджають відновлювальні агенти • Підлягає впливу деяких хелатуючих агентів	• Загальне кількісне визначення білка • Зразки, що містять мийні засоби
Аналіз Бредфорда	1-1500 μg/mL	• Швидкий (2-5 хв) • Невелика кількість перешкод	• Висока варіація між білками • Несумісний з мийними засобами	• Швидкі вимірювання • Зразки без мийних засобів
Метод Лоурі	1-1500 μg/mL	• Добре відомий • Хороша чутливість	• Багато перешкод • Багато етапів	• Історична послідовність • Чисті білкові зразки
UV-абсорбція (280 нм)	20-3000 μg/mL	• Неруйнівний • Дуже швидкий • Не потребує реагентів	• Вплив нуклеїнових кислот • Вимагає чистих зразків	• Чисті білкові розчини • Швидкі перевірки під час очищення
Флуорометричний	0.1-500 μg/mL	• Найвища чутливість • Широкий динамічний діапазон	• Дорогі реагенти • Потребує флуориметра	• Дуже розведені зразки • Обмежений об'єм зразка

Часто задавані питання

Для чого використовується аналіз BCA?

Аналіз BCA (біцинхонінова кислота) в основному використовується для кількісного визначення загальної концентрації білка в зразку. Він широко використовується в біохімії, клітинній біології та молекулярній біології для таких застосувань, як західний блотинг, ензиматичні аналізи, імунопреципітація та очищення білка.

Наскільки точний аналіз BCA?

Аналіз BCA зазвичай точний в межах 5-10%, якщо його правильно виконати. Його точність залежить від кількох факторів, включаючи якість стандартної кривої, відсутність перешкод та чи подібний склад невідомого білка до стандартного білка, що використовується.

Що може заважати результатам аналізу BCA?

Декілька речовин можуть заважати результатам аналізу BCA, включаючи:

Відновлювальні агенти (DTT, β-меркаптоетанол, глутатіон)
Хелатуючі агенти (EDTA, EGTA)
Високі концентрації простих цукрів
Ліпіди
Деякі мийні засоби в високих концентраціях
Сполуки амонію

У чому різниця між аналізом BCA та Бредфорда?

Основні відмінності полягають у тому, що:

Аналіз BCA більш сумісний з мийними засобами та сурфактантами
Аналіз Бредфорда є швидшим (2-5 хвилин проти 30+ хвилин для BCA)
BCA має меншу варіацію між білками
Бредфорд є більш чутливим до основних амінокислот
BCA підлягає впливу відновлювальних агентів, тоді як Бредфорд — ні

Чому мій обчислений об'єм зразка занадто великий?

Якщо ваш калькулятор показує дуже великий об'єм, це зазвичай вказує на низьку концентрацію білка у вашому зразку. Це може бути через:

Фактичний низький вміст білка у вашому початковому зразку
Втрати білка під час підготовки
Помилки в процедурі аналізу BCA
Невірне вимірювання показника абсорбції

Розгляньте можливість концентрації вашого зразка або коригування вашого експериментального дизайну, щоб врахувати нижчу концентрацію білка.

Чи можу я використовувати цей калькулятор для інших методів кількісного визначення білків?

Цей калькулятор спеціально розроблений для результатів аналізу BCA. Хоча основний принцип (перетворення концентрації в об'єм) застосовується до інших методів, взаємозв'язок між абсорбцією та концентрацією білка варіюється між різними аналізами. Для інших методів, таких як Бредфорд або Лоурі, вам потрібно буде використовувати інші параметри стандартної кривої.

Як я можу обробляти зразки з абсорбцією за межами лінійного діапазону?

Для показників абсорбції за межами лінійного діапазону (зазвичай >2.0):

Розведіть ваш зразок і повторіть аналіз BCA
Використовуйте інший метод кількісного визначення білка
Коригуйте стандартну криву, щоб включити стандарти вищої концентрації

Який білок слід використовувати як стандарт?

Сироватковий альбумін великої рогатої худоби (BSA) є найпоширенішим стандартом для аналізів BCA, оскільки він:

Легко доступний та недорогий
Дуже розчинний
Стабільний в розчині
Добре охарактеризований

Проте, якщо ваші зразки містять переважаючий білок, який суттєво відрізняється від BSA, розгляньте можливість використання цього білка як вашого стандарту для більш точних результатів.

Як довго стабільна реакція BCA?

Пурпурний колір, що розвивається в реакції BCA, стабільний протягом кількох годин при кімнатній температурі і може бути виміряний у будь-який час протягом цього періоду. Проте для найкращих результатів рекомендується вимірювати всі стандарти та зразки приблизно в один і той же час після розвитку кольору.

Чи можу я повторно використовувати стандартну криву з попереднього експерименту?

Хоча технічно можливо повторно використовувати стандартну криву, це не рекомендується для точного кількісного визначення. Варіації в реагентах, умовах інкубації та калібруванні приладів можуть вплинути на взаємозв'язок між абсорбцією та концентрацією білка. Для надійних результатів генеруйте нову стандартну криву щоразу, коли ви виконуєте аналіз.

Посилання

Smith PK, Krohn RI, Hermanson GT, et al. "Вимірювання білка за допомогою біцинхонінової кислоти." Аналитическая биохимия. 1985;150(1):76-85. doi:10.1016/0003-2697(85)90442-7
Thermo Scientific. "Прилад для аналізу білка Pierce BCA." Інструкції. Доступно за: https://www.thermofisher.com/document-connect/document-connect.html?url=https%3A%2F%2Fassets.thermofisher.com%2FTFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0011430_Pierce_BCA_Protein_Asy_UG.pdf
Walker JM. "Аналіз біцинхонінової кислоти (BCA) для кількісного визначення білка." У: Walker JM, ред. Посібник з протоколів з білків. Springer; 2009:11-15. doi:10.1007/978-1-59745-198-7_3
Olson BJ, Markwell J. "Аналізи для визначення концентрації білка." Current Protocols in Protein Science. 2007;Chapter 3:Unit 3.4. doi:10.1002/0471140864.ps0304s48
Noble JE, Bailey MJ. "Кількісне визначення білка." Методи в ензимології. 2009;463:73-95. doi:10.1016/S0076-6879(09)63008-1

Спробуйте наш калькулятор об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA сьогодні!

Тепер, коли ви розумієте принципи, що стоять за кількісним визначенням білка BCA та розрахунком об'єму зразка, спробуйте наш калькулятор, щоб оптимізувати ваш лабораторний робочий процес. Просто введіть показники абсорбції та бажану масу зразка, щоб отримати миттєві, точні розрахунки об'єму зразка.

Чи ви готуєте зразки для західного блотингу, ензиматичних аналізів чи будь-якого іншого експерименту на основі білка, наш калькулятор допоможе забезпечити послідовні та надійні результати. Заощаджуйте час, зменшуйте помилки та покращуйте відтворюваність ваших експериментів за допомогою калькулятора об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA.

🔗

Пов'язані Інструменти

Відкрийте більше інструментів, які можуть бути корисними для вашого робочого процесу

Калькулятор об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA для лабораторних протоколів

Калькулятор об'єму зразка BCA за абсорбції

standardCurveTitle

Введення зразків

Зразок 1

Формула розрахунку

Документація

Калькулятор об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA

Вступ

Розуміння аналізу BCA та розрахунку об'єму зразка

Що таке аналіз BCA?

Формула для розрахунку об'єму зразка

Як користуватися калькулятором об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA

Приклад крок за кроком

Розуміння результатів

Застосування та випадки використання

Підготовка зразків для західного блоту

Ензиматичні аналізи

Експерименти з імунопреципітацією

Очищення білка

Розширені функції та міркування

Користувацькі стандартні криві

Обробка кількох зразків

Обробка крайніх випадків

Дуже високі показники абсорбції

Дуже низькі показники абсорбції

Непрактично великі обчислені обсяги

Історія кількісного визначення білків та аналізу BCA

Еволюція методів кількісного визначення білків

Розвиток аналізу BCA

Приклади коду для розрахунку об'єму зразка

Формула Excel

Реалізація на Python

Код на R для аналізу

Реалізація на JavaScript

Візуалізація стандартної кривої

Порівняння з іншими методами кількісного визначення білків

Часто задавані питання

Для чого використовується аналіз BCA?

Наскільки точний аналіз BCA?

Що може заважати результатам аналізу BCA?

У чому різниця між аналізом BCA та Бредфорда?

Чому мій обчислений об'єм зразка занадто великий?

Чи можу я використовувати цей калькулятор для інших методів кількісного визначення білків?

Як я можу обробляти зразки з абсорбцією за межами лінійного діапазону?

Який білок слід використовувати як стандарт?

Як довго стабільна реакція BCA?

Чи можу я повторно використовувати стандартну криву з попереднього експерименту?

Посилання

Спробуйте наш калькулятор об'єму зразка для вимірювання абсорбції BCA сьогодні!

Пов'язані Інструменти

Калькулятор об'єму резервуара для циліндричних, сферичних та прямокутних

Калькулятор об’єму до площі для покриття рідиною

Калькулятор об'єму отворів: циліндричні та прямокутні виїмки

Калькулятор об'єму отворів: Вимірюйте об'єми циліндричних виїмок

Калькулятор об'єму кубічної клітини: знайдіть об'єм за довжиною ребра

Простий калькулятор коефіцієнта розведення для лабораторних розчинів

Калькулятор об'єму піску: оцініть матеріали для будь-якого проекту

Калькулятор коефіцієнта двофотонного поглинання

Калькулятор молярності: Інструмент для визначення концентрації розчинів