بی سی اے ٹیسٹ کی ایبزوربانس پڑھائیوں اور مطلوبہ پروٹین ماس کی بنیاد پر درست نمونہ حجم کا حساب لگائیں۔ ویسٹرن بلٹس اور دیگر لیبارٹری ایپلیکیشنز میں مستقل پروٹین لوڈنگ کے لیے ضروری۔
یہ ٹول بی سی اے ایبزوربنس کے نتائج اور نمونہ ماس کی بنیاد پر درکار نمونہ حجم کا حساب لگاتا ہے۔ ہر نمونہ کے لیے ایبزوربنس کی قیمت اور نمونہ ماس درج کریں تاکہ متعلقہ نمونہ حجم کا حساب لگایا جا سکے۔
نمونہ حجم کا حساب لگانے کے لیے درج ذیل فارمولا استعمال کیا جاتا ہے:
• tipAbsorbanceRange
• tipSampleMass
• tipSampleVolume
• tipStandardCurve
BCA ایبزوربانس نمونہ حجم کیلکولیٹر ایک خصوصی ٹول ہے جو محققین اور لیبارٹری ٹیکنیشنز کو BCA (بائیکنچونک ایسڈ) ٹیسٹ کے نتائج کی بنیاد پر تجربات کے لیے مناسب نمونہ حجم درست طور پر طے کرنے میں مدد دینے کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے۔ یہ کیلکولیٹر آپ کے BCA ٹیسٹ سے ایبزوربانس کی ریڈنگز اور آپ کی مطلوبہ نمونہ ماس کو لے کر تجربات کے لیے مستقل پروٹین لوڈنگ کے لیے درکار درست حجم کا حساب لگاتا ہے، جیسے ویسٹرن بلٹنگ، انزیمیٹک ٹیسٹ، اور دیگر پروٹین تجزیہ کی تکنیکیں۔
BCA ٹیسٹ پروٹین کی مقدار کا تعین کرنے کے لیے سب سے زیادہ استعمال ہونے والے طریقوں میں سے ایک ہے جو بایو کیمسٹری اور مالیکیولر بایولوجی کی لیبارٹریز میں استعمال ہوتا ہے۔ اپنے پروٹین نمونوں کی ایبزوربانس کی پیمائش کرکے اور انہیں ایک معیاری منحنی خطوط سے موازنہ کرکے، آپ پروٹین کی مقدار کو اعلیٰ درستگی کے ساتھ معلوم کر سکتے ہیں۔ ہمارا کیلکولیٹر اس عمل کو ہموار کرتا ہے، ایبزوربانس کی ریڈنگز کو آپ کے تجربات کے لیے درکار درست نمونہ حجم میں خودکار طور پر تبدیل کرتا ہے۔
بائیکنچونک ایسڈ (BCA) ٹیسٹ ایک بایو کیمیکل ٹیسٹ ہے جو کسی حل میں پروٹین کی کل مقدار کا تعین کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ اس ٹیسٹ کا اصول الکلی حالات میں Cu²⁺-پروٹین کمپلیکس کی تشکیل پر مبنی ہے، جس کے بعد Cu²⁺ کا Cu¹⁺ میں کمی واقع ہوتی ہے۔ کمی کی مقدار موجود پروٹین کے تناسب میں ہوتی ہے۔ BCA الکلی ماحول میں Cu¹⁺ کے ساتھ ایک جامنی رنگ کا کمپلیکس بناتا ہے، جو پروٹین کی موجودگی کی نگرانی کے لیے ایک بنیاد فراہم کرتا ہے۔
جامنی رنگ کی شدت پروٹین کی مقدار کے ساتھ تناسب میں بڑھتی ہے، جسے تقریباً 562 nm پر اسپیکٹروفوٹومیٹر کا استعمال کرتے ہوئے ناپا جا سکتا ہے۔ ایبزوربانس کی ریڈنگز کو پھر ایک معیاری منحنی خطوط سے موازنہ کرکے نامعلوم نمونوں میں پروٹین کی مقدار کا تعین کیا جاتا ہے۔
BCA ایبزوربانس کے نتائج سے نمونہ حجم کا حساب لگانے کے لیے بنیادی فارمولا یہ ہے:
جہاں:
پروٹین کی مقدار کو ایبزوربانس کی ریڈنگ سے معیاری منحنی خطوط کے مساوات کا استعمال کرتے ہوئے حساب کیا جاتا ہے:
معیاری BCA ٹیسٹ کے لیے، عمومی ڈھلوان تقریباً 2.0 ہے، اور انٹرسیپٹ اکثر صفر کے قریب ہوتا ہے، حالانکہ یہ آپ کی مخصوص ٹیسٹ کی شرائط اور معیاری منحنی خطوط کی بنیاد پر مختلف ہو سکتے ہیں۔
ہمارا کیلکولیٹر BCA ٹیسٹ کے نتائج سے نمونہ حجم کا تعین کرنے کے عمل کو آسان بناتا ہے۔ درست حسابات حاصل کرنے کے لیے ان مراحل کی پیروی کریں:
نمونہ کی معلومات درج کریں:
معیاری منحنی خطوط کی قسم منتخب کریں:
نتائج دیکھیں:
نتائج کاپی یا برآمد کریں:
آئیں ایک عملی مثال کے ذریعے چلتے ہیں:
اس کا مطلب ہے کہ آپ کو 20 μg پروٹین حاصل کرنے کے لیے اپنے نمونہ کا 13.33 μL لوڈ کرنا چاہئے۔
کیلکولیٹر کئی اہم معلومات فراہم کرتا ہے:
پروٹین کی مقدار: یہ آپ کی ایبزوربانس کی ریڈنگ سے منتخب کردہ معیاری منحنی خطوط کا استعمال کرتے ہوئے حساب کی جاتی ہے۔ یہ آپ کے نمونہ میں ہر یونٹ حجم میں پروٹین کی مقدار کی نمائندگی کرتی ہے (μg/μL میں)۔
نمونہ حجم: یہ آپ کے نمونہ کا حجم ہے جس میں آپ کی مطلوبہ پروٹین کی مقدار موجود ہے۔ یہ وہ قیمت ہے جو آپ اپنے تجربات کی تیاری کرتے وقت استعمال کریں گے۔
خبرداریاں اور سفارشات: کیلکولیٹر مندرجہ ذیل کے لیے خبرداریاں فراہم کر سکتا ہے:
اس کیلکولیٹر کا ایک عام استعمال ویسٹرن بلٹنگ کے لیے نمونوں کی تیاری ہے۔ مستقل پروٹین لوڈنگ قابل اعتماد ویسٹرن بلٹ کے نتائج کے لیے بہت اہم ہے، اور یہ کیلکولیٹر یہ یقینی بناتا ہے کہ آپ ہر نمونہ کے لیے ایک ہی مقدار میں پروٹین لوڈ کریں، چاہے ان کی مقدار مختلف ہو۔
مثال کا ورک فلو:
انزیمیٹک ٹیسٹ کے لیے، اکثر پروٹین کی مخصوص مقدار کا استعمال ضروری ہوتا ہے تاکہ مختلف نمونوں یا تجربات کے درمیان ردعمل کی شرائط کو معیاری بنایا جا سکے۔
مثال کا ورک فلو:
امیون پریسیپٹیشن (IP) تجربات میں، ایک مستقل پروٹین کی مقدار کے ساتھ شروع کرنا نتائج کے موازنہ کے لیے اہم ہے۔
مثال کا ورک فلو:
پروٹین کی صفائی کے دوران، مختلف مراحل پر پروٹین کی مقدار کا ٹریک رکھنا اکثر ضروری ہوتا ہے۔
مثال کا ورک فلو:
جبکہ کیلکولیٹر معیاری BCA ٹیسٹ کے لیے ڈیفالٹ پیرامیٹرز فراہم کرتا ہے، آپ اپنی معیاری منحنی خطوط تیار کرنے کے بعد اپنی مرضی کی قیمتیں بھی درج کر سکتے ہیں۔ یہ خاص طور پر اس وقت مفید ہے جب:
حسب ضرورت معیاری منحنی خطوط استعمال کرنے کے لیے:
کیلکولیٹر آپ کو ایک ساتھ متعدد نمونوں کو شامل کرنے اور ان کے حجم کا حساب لگانے کی اجازت دیتا ہے۔ یہ خاص طور پر ان تجربات کے لیے مفید ہے جن میں مختلف حالات کے درمیان مستقل پروٹین لوڈنگ کی ضرورت ہوتی ہے۔
بیچ پروسیسنگ کے فوائد:
اگر آپ کی ایبزوربانس کی ریڈنگ 2.0 سے اوپر ہے، تو یہ BCA ٹیسٹ کی لکیری حد سے باہر ہو سکتی ہے۔ ایسے معاملات میں:
ایبزوربانس کی ریڈنگز 0.1 سے کم ہونے پر، آپ ٹیسٹ کی پتہ لگانے کی حد کے قریب ہو سکتے ہیں، جو درستگی کو متاثر کر سکتی ہے۔ غور کریں:
اگر کیلکولیٹر ایک ایسا حجم تجویز کرتا ہے جو آپ کی ایپلی کیشن کے لیے بہت بڑا ہے:
پروٹین کی درست مقدار کا تعین بایو کیمسٹری اور مالیکیولر بایولوجی میں ایک بنیادی ضرورت رہی ہے جب سے یہ شعبے ابھرتے ہیں۔ ابتدائی طریقے نائٹروجن کے مواد کے تعین پر انحصار کرتے تھے، جو وقت طلب اور خصوصی آلات کی ضرورت ہوتی تھی۔
کیجلڈال طریقہ (1883): پروٹین مقدار کا تعین کرنے کے لیے سب سے قدیم طریقوں میں سے ایک، جو نائٹروجن کے مواد کی پیمائش پر مبنی ہے۔
بایورٹ ٹیسٹ (اوائل 1900): یہ طریقہ پیپٹائڈ بانڈز اور کاپر آئنز کے درمیان تعامل پر انحصار کرتا ہے، جو ایک جامنی رنگ پیدا کرتا ہے۔
لووری ٹیسٹ (1951): اولیور لووری کے ذریعہ تیار کردہ، یہ طریقہ بایورٹ ردعمل کو فولین-سیوکالٹیو ریجنٹ کے ساتھ ملا کر حساسیت کو بڑھاتا ہے۔
برڈفورڈ ٹیسٹ (1976): میریون برڈفورڈ نے اس طریقہ کار کو تیار کیا جو پروٹین کے ساتھ کوماسے برلینٹ بلیو G-250 رنگ کا استعمال کرتا ہے، جو پروٹین کے ساتھ بندھتا ہے اور جذب کی زیادہ سے زیادہ مقدار کو منتقل کرتا ہے۔
BCA ٹیسٹ (1985): یہ طریقہ پال اسمتھ اور پیئرس کیمیکل کمپنی کے ساتھیوں کے ذریعہ تیار کیا گیا، اس طریقے نے بایورٹ ردعمل کو BCA پتہ لگانے کے ساتھ ملا کر حساسیت اور مختلف کیمیکلز کے ساتھ مطابقت کو بہتر بنایا۔
BCA ٹیسٹ کا پہلا ذکر 1985 کے ایک مقالے میں ہوا جس کا عنوان ہے "Measurement of protein using bicinchoninic acid." یہ موجودہ طریقوں کی حدود کو حل کرنے کے لیے تیار کیا گیا، خاص طور پر پروٹین نکالنے اور صفائی میں عام طور پر استعمال ہونے والے مختلف کیمیکلز سے مداخلت۔
اہم جدت یہ تھی کہ پروٹین کی کمی کے ذریعے پیدا ہونے والے Cu²⁺ کو کم کرنے کے لیے بائیکنچونک ایسڈ کا استعمال کیا جائے، جو ایک جامنی رنگ کے کمپلیکس کی تشکیل کرتا ہے جسے اسپیکٹروفوٹومیٹرک طور پر ناپا جا سکتا ہے۔ اس نے کئی فوائد فراہم کیے:
اپنی متعارف کرانے کے بعد، BCA ٹیسٹ بایو کیمسٹری اور مالیکیولر بایولوجی کی لیبارٹریز میں پروٹین مقدار کا تعین کرنے کے سب سے زیادہ استعمال ہونے والے طریقوں میں سے ایک بن گیا ہے۔
1=IF(B2<=0,"غلطی: نامناسب ایبزوربانس",IF(C2<=0,"غلطی: نامناسب نمونہ ماس",C2/(2*B2)))
2
3' جہاں:
4' B2 ایبزوربانس کی ریڈنگ ہے
5' C2 مطلوبہ نمونہ ماس μg میں ہے
6' یہ فارمولا درکار نمونہ حجم μL میں واپس کرتا ہے
71import numpy as np
2import matplotlib.pyplot as plt
3
4def calculate_protein_concentration(absorbance, slope=2.0, intercept=0):
5 """ایبزوربانس سے پروٹین کی مقدار کا حساب لگائیں معیاری منحنی خطوط کا استعمال کرتے ہوئے۔"""
6 if absorbance < 0:
7 raise ValueError("ایبزوربانس منفی نہیں ہو سکتی")
8 return (slope * absorbance) + intercept
9
10def calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope=2.0, intercept=0):
11 """ایبزوربانس، نمونہ ماس اور معیاری منحنی خطوط کا استعمال کرتے ہوئے درکار نمونہ حجم کا حساب لگائیں۔"""
12 if sample_mass <= 0:
13 raise ValueError("نمونہ ماس مثبت ہونی چاہیے")
14
15 protein_concentration = calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16
17 if protein_concentration <= 0:
18 raise ValueError("حساب کردہ پروٹین کی مقدار مثبت ہونی چاہیے")
19
20 return sample_mass / protein_concentration
21
22# مثال کا استعمال
23absorbance = 0.75
24sample_mass = 20 # μg
25slope = 2.0
26intercept = 0
27
28try:
29 volume = calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
30 print(f"ایبزوربانس {absorbance} اور مطلوبہ پروٹین ماس {sample_mass} μg کے لیے:")
31 print(f"پروٹین کی مقدار: {calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept):.2f} μg/μL")
32 print(f"درکار نمونہ حجم: {volume:.2f} μL")
33except ValueError as e:
34 print(f"غلطی: {e}")
351# ایبزوربانس سے پروٹین کی مقدار کا حساب لگانے کے لیے فنکشن
2calculate_protein_concentration <- function(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
3 if (absorbance < 0) {
4 stop("ایبزوربانس منفی نہیں ہو سکتی")
5 }
6 return((slope * absorbance) + intercept)
7}
8
9# نمونہ حجم کا حساب لگانے کے لیے فنکشن
10calculate_sample_volume <- function(absorbance, sample_mass, slope = 2.0, intercept = 0) {
11 if (sample_mass <= 0) {
12 stop("نمونہ ماس مثبت ہونی چاہیے")
13 }
14
15 protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
16
17 if (protein_concentration <= 0) {
18 stop("حساب کردہ پروٹین کی مقدار مثبت ہونی چاہیے")
19 }
20
21 return(sample_mass / protein_concentration)
22}
23
24# مثال کا استعمال
25absorbance <- 0.75
26sample_mass <- 20 # μg
27slope <- 2.0
28intercept <- 0
29
30tryCatch({
31 volume <- calculate_sample_volume(absorbance, sample_mass, slope, intercept)
32 protein_concentration <- calculate_protein_concentration(absorbance, slope, intercept)
33
34 cat(sprintf("ایبزوربانس %.2f اور مطلوبہ پروٹین ماس %.2f μg کے لیے:\n", absorbance, sample_mass))
35 cat(sprintf("پروٹین کی مقدار: %.2f μg/μL\n", protein_concentration))
36 cat(sprintf("درکار نمونہ حجم: %.2f μL\n", volume))
37}, error = function(e) {
38 cat(sprintf("غلطی: %s\n", e$message))
39})
401function calculateProteinConcentration(absorbance, slope = 2.0, intercept = 0) {
2 if (absorbance < 0) {
3 throw new Error("ایبزوربانس منفی نہیں ہو سکتی");
4 }
5 return (slope * absorbance) + intercept;
6}
7
8function calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope = 2.0, intercept = 0) {
9 if (sampleMass <= 0) {
10 throw new Error("نمونہ ماس مثبت ہونی چاہیے");
11 }
12
13 const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
14
15 if (proteinConcentration <= 0) {
16 throw new Error("حساب کردہ پروٹین کی مقدار مثبت ہونی چاہیے");
17 }
18
19 return sampleMass / proteinConcentration;
20}
21
22// مثال کا استعمال
23try {
24 const absorbance = 0.75;
25 const sampleMass = 20; // μg
26 const slope = 2.0;
27 const intercept = 0;
28
29 const proteinConcentration = calculateProteinConcentration(absorbance, slope, intercept);
30 const volume = calculateSampleVolume(absorbance, sampleMass, slope, intercept);
31
32 console.log(`ایبزوربانس ${absorbance} اور مطلوبہ پروٹین ماس ${sampleMass} μg کے لیے:`);
33 console.log(`پروٹین کی مقدار: ${proteinConcentration.toFixed(2)} μg/μL`);
34 console.log(`درکار نمونہ حجم: ${volume.toFixed(2)} μL`);
35} catch (error) {
36 console.error(`غلطی: ${error.message}`);
37}
38ایبزوربانس اور پروٹین کی مقدار کے درمیان تعلق عام طور پر ایک خاص حد میں لکیری ہوتا ہے۔ ذیل میں BCA منحنی خطوط کی بصری نمائندگی ہے:
<text x="150" y="370">0.5</text>
<line x1="150" y1="350" x2="150" y2="355" stroke="#64748b"/>
<text x="250" y="370">1.0</text>
<line x1="250" y1="350" x2="250" y2="355" stroke="#64748b"/>
<text x="350" y="370">1.5</text>
<line x1="350" y1="350" x2="350" y2="355" stroke="#64748b"/>
<text x="450" y="370">2.0</text>
<line x1="450" y1="350" x2="450" y2="355" stroke="#64748b"/>
<text x="550" y="370">2.5</text>
<line x1="550" y1="350" x2="550" y2="355" stroke="#64748b"/>
<text x="45" y="300">1.0</text>
<line x1="45" y1="300" x2="50" y2="300" stroke="#64748b"/>
<text x="45" y="250">2.0</text>
<line x1="45" y1="250" x2="50" y2="250" stroke="#64748b"/>
<text x="45" y="200">3.0</text>
<line x1="45" y1="200" x2="50" y2="200" stroke="#64748b"/>
<text x="45" y="150">4.0</text>
<line x1="45" y1="150" x2="50" y2="150" stroke="#64748b"/>
<text x="45" y="100">5.0</text>
<line x1="45" y1="100" x2="50" y2="100" stroke="#64748b"/>
<text x="45" y="50">6.0</text>
<line x1="45" y1="50" x2="50" y2="50" stroke="#64748b"/>
مختلف پروٹین مقدار کے تعین کے طریقوں کے مختلف فوائد اور حدود ہیں۔ یہ دیکھیں کہ BCA ٹیسٹ دوسرے عام طریقوں کے ساتھ کیسے موازنہ کرتا ہے:
| طریقہ | حساسیت کی حد | فوائد | حدود | بہترین کے لیے |
|---|---|---|---|---|
| BCA ٹیسٹ | 5-2000 μg/mL | • سرفیکٹینٹس کے ساتھ ہم آہنگ • پروٹین سے پروٹین کی مختلف قسم کم • رنگ کی ترقی مستحکم | • کمی کرنے والے ایجنٹوں سے متاثر • کچھ چیلٹنگ ایجنٹوں سے متاثر | • عمومی پروٹین مقدار کا تعین • سرفیکٹینٹس پر مشتمل نمونے |
| برڈفورڈ ٹیسٹ | 1-1500 μg/mL | • تیز (2-5 منٹ) • چند مداخلت کرنے والے مادے | • پروٹین سے پروٹین کی مختلف قسم زیادہ • سرفیکٹینٹس کے ساتھ ہم آہنگ نہیں | • فوری پیمائش • سرفیکٹینٹس سے پاک نمونے |
| لووری طریقہ | 1-1500 μg/mL | • اچھی طرح سے قائم • اچھی حساسیت | • بہت سے مداخلت کرنے والے مادے • متعدد مراحل | • تاریخی مستقل مزاجی • خالص پروٹین نمونے |
| UV ایبزوربانس (280 nm) | 20-3000 μg/mL | • غیر تخریبی • بہت تیز • کوئی کیمیکلز کی ضرورت نہیں | • نیوکلیک ایسڈ سے متاثر • خالص نمونوں کی ضرورت | • خالص پروٹین حل • صفائی کے دوران فوری چیک |
| فلورومیٹرک | 0.1-500 μg/mL | • سب سے زیادہ حساسیت • وسیع متحرک حد | • مہنگے کیمیکلز • فلورومیٹر کی ضرورت | • بہت پتلے نمونے • محدود نمونہ حجم |
BCA (بائیکنچونک ایسڈ) ٹیسٹ بنیادی طور پر کسی نمونہ میں پروٹین کی کل مقدار کا تعین کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ یہ بایو کیمسٹری، سیل بایولوجی، اور مالیکیولر بایولوجی میں ویسٹرن بلٹنگ، انزیمیٹک ٹیسٹ، امیون پریسیپٹیشن، اور پروٹین صفائی جیسے ایپلی کیشنز کے لیے وسیع پیمانے پر استعمال ہوتا ہے۔
BCA ٹیسٹ عام طور پر 5-10% کے اندر درست ہے جب صحیح طریقے سے کیا جائے۔ اس کی درستگی کئی عوامل پر منحصر ہے جن میں معیاری منحنی خطوط کا معیار، مداخلت کرنے والے مادوں کی عدم موجودگی، اور یہ کہ آیا نامعلوم پروٹین کا مرکب معیاری پروٹین کے ساتھ ملتا ہے جو استعمال کیا گیا ہے۔
کئی مادے BCA ٹیسٹ کے نتائج میں مداخلت کر سکتے ہیں، بشمول:
اہم فرق یہ ہیں:
اگر آپ کا کیلکولیٹر ایک بہت بڑا نمونہ حجم دکھاتا ہے تو یہ عام طور پر آپ کے نمونہ میں پروٹین کی کم مقدار کی نشاندہی کرتا ہے۔ یہ درج ذیل کی وجہ سے ہو سکتا ہے:
اپنے نمونہ کو مرکوز کرنے یا اپنی تجرباتی ڈیزائن کو کم پروٹین کی مقدار کو ایڈجسٹ کرنے پر غور کریں۔
یہ کیلکولیٹر خاص طور پر BCA ٹیسٹ کے نتائج کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے۔ جبکہ بنیادی اصول (مقدار کو حجم میں تبدیل کرنا) دوسرے طریقوں کے لیے لاگو ہوتا ہے، ایبزوربانس اور پروٹین کی مقدار کے درمیان تعلق مختلف ٹیسٹوں کے درمیان مختلف ہوتا ہے۔ دوسرے طریقوں جیسے برڈفورڈ یا لووری کے لیے، آپ کو مختلف معیاری منحنی خطوط کے پیرامیٹرز کا استعمال کرنے کی ضرورت ہوگی۔
ایبزوربانس کی ریڈنگز جو لکیری حد سے باہر ہیں (عام طور پر >2.0):
بیوائن سیرم البومین (BSA) BCA ٹیسٹ کے لیے سب سے زیادہ استعمال ہونے والا معیاری ہے کیونکہ یہ:
تاہم، اگر آپ کے نمونے میں ایک غالب پروٹین ہو جو BSA سے نمایاں طور پر مختلف ہو، تو اس پروٹین کو اپنے معیاری کے طور پر استعمال کرنے پر غور کریں تاکہ زیادہ درست نتائج حاصل ہوں۔
BCA ردعمل میں تیار کردہ جامنی رنگ کئی گھنٹوں تک کمرے کے درجہ حرارت پر مستحکم رہتا ہے اور اس مدت کے دوران کسی بھی وقت ناپا جا سکتا ہے۔ تاہم، بہترین نتائج کے لیے یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ آپ تمام معیاری اور نمونوں کی پیمائش تقریباً ایک ہی وقت میں کریں جب رنگ کی ترقی ہو۔
جبکہ یہ تکنیکی طور پر ممکن ہے کہ معیاری منحنی خطوط کو دوبارہ استعمال کریں، یہ درست مقدار کے لیے تجویز نہیں کیا جاتا۔ کیمیکلز، انکیوبیشن کی شرائط، اور آلات کی کیلیبریشن میں مختلف تبدیلیاں ایبزوربانس اور پروٹین کی مقدار کے درمیان تعلق کو متاثر کر سکتی ہیں۔ قابل اعتماد نتائج کے لیے، ہر بار جب آپ ٹیسٹ کرتے ہیں تو ایک تازہ معیاری منحنی خطوط تیار کریں۔
اسمتھ PK، کروہن RI، ہرمنسن GT، وغیرہ۔ "بائیکنچونک ایسڈ کا استعمال کرتے ہوئے پروٹین کی مقدار کا تعین۔" تجزیاتی بایو کیمسٹری۔ 1985؛150(1):76-85۔ doi:10.1016/0003-2697(85)90442-7
تھرمو سائنٹیفک۔ "پیئرس BCA پروٹین ٹیسٹ کٹ۔" ہدایات۔ دستیاب ہے: https://www.thermofisher.com/document-connect/document-connect.html?url=https%3A%2F%2Fassets.thermofisher.com%2FTFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0011430_Pierce_BCA_Protein_Asy_UG.pdf
واکر JM۔ "بائیکنچونک ایسڈ (BCA) ٹیسٹ پروٹین کی مقدار کے تعین کے لیے۔" میں: واکر JM، ایڈ۔ پروٹین پروٹوکولز ہینڈ بک۔ اسپرنگر؛ 2009:11-15۔ doi:10.1007/978-1-59745-198-7_3
اولسن BJ، مارک ویل J۔ "پروٹین کی مقدار کا تعین کرنے کے طریقے۔" موجودہ پروٹوکولز ان پروٹین سائنس۔ 2007؛باب 3:یونٹ 3.4۔ doi:10.1002/0471140864.ps0304s48
نوبل JE، بیلی MJ۔ "پروٹین کی مقدار کا تعین۔" طریقے انزیمیولوجی۔ 2009؛463:73-95۔ doi:10.1016/S0076-6879(09)63008-1
اب جب کہ آپ BCA پروٹین مقدار کا تعین کرنے اور نمونہ حجم کے حساب کے پیچھے کے اصولوں کو سمجھتے ہیں، تو ہمارے کیلکولیٹر کو آزمائیں تاکہ آپ کی لیبارٹری کے ورک فلو کو ہموار کیا جا سکے۔ بس اپنی ایبزوربانس کی ریڈنگز اور مطلوبہ نمونہ ماس درج کریں تاکہ فوری، درست نمونہ حجم کے حسابات حاصل کریں۔
چاہے آپ ویسٹرن بلٹنگ، انزیمیٹک ٹیسٹ، یا کسی دوسرے پروٹین پر مبنی تجربے کے لیے نمونے تیار کر رہے ہوں، ہمارا کیلکولیٹر مستقل اور قابل اعتماد نتائج کو یقینی بنانے میں مدد کرے گا۔ وقت کی بچت کریں، غلطیوں کو کم کریں، اور اپنے تجربات کی دوبارہ پیداوار کو بہتر بنائیں BCA ایبزوربانس نمونہ حجم کیلکولیٹر کے ساتھ۔
آپ کے ورک فلو کے لیے مفید ہونے والے مزید ٹولز کا انعام کریں