Hitung jumlah salinan DNA dengan memasukkan data urutan, urutan target, konsentrasi, dan volume. Estimasi replikasi genomik yang sederhana dan akurat tanpa konfigurasi kompleks atau integrasi API.
Masukkan urutan DNA lengkap yang ingin Anda analisis
Masukkan urutan DNA spesifik yang ingin Anda hitung kemunculannya
Perkiraan Jumlah Salinan
0
Jumlah salinan dihitung berdasarkan jumlah kemunculan urutan target, konsentrasi DNA, volume sampel, dan sifat molekuler DNA.
Masukkan urutan DNA dan parameter yang valid untuk melihat visualisasi
Kalkulator Jumlah Salinan DNA Genomik adalah alat yang kuat yang dirancang untuk memperkirakan jumlah salinan dari urutan DNA tertentu yang ada dalam sampel genomik. Analisis jumlah salinan DNA adalah teknik mendasar dalam biologi molekuler, genetika, dan diagnostik klinis yang membantu peneliti dan klinisi mengkuantifikasi keberadaan urutan DNA tertentu. Perhitungan ini penting untuk berbagai aplikasi, termasuk studi ekspresi gen, deteksi patogen, kuantifikasi transgen, dan diagnosis gangguan genetik yang ditandai dengan variasi jumlah salinan (CNV).
Perkiraan Replikasi Genomik kami menyediakan pendekatan yang sederhana untuk menghitung jumlah salinan DNA tanpa memerlukan konfigurasi kompleks atau integrasi API. Dengan memasukkan data urutan DNA Anda dan urutan target, bersama dengan parameter konsentrasi, Anda dapat dengan cepat menentukan jumlah salinan dari urutan DNA tertentu dalam sampel Anda. Informasi ini sangat penting untuk memahami variasi genetik, mekanisme penyakit, dan mengoptimalkan protokol eksperimen dalam penelitian biologi molekuler.
Jumlah salinan DNA mengacu pada berapa kali urutan DNA tertentu muncul dalam genom atau sampel. Dalam genom manusia normal, sebagian besar gen ada dalam dua salinan (satu dari masing-masing orang tua). Namun, berbagai proses biologis dan kondisi genetik dapat menyebabkan penyimpangan dari standar ini:
Menghitung jumlah salinan DNA dengan akurat membantu ilmuwan memahami variasi ini dan implikasinya terhadap kesehatan dan penyakit.
Jumlah salinan dari urutan DNA tertentu dapat dihitung menggunakan rumus berikut:
Di mana:
Rumus ini mempertimbangkan sifat molekuler DNA dan memberikan perkiraan jumlah salinan absolut dalam sampel Anda.
Kejadian: Ini ditentukan dengan menghitung berapa kali urutan target muncul dalam urutan DNA penuh. Misalnya, jika urutan target Anda adalah "ATCG" dan muncul 5 kali dalam sampel DNA Anda, nilai kejadian akan menjadi 5.
Konsentrasi DNA: Diukur dalam ng/μL (nanogram per mikroliter), ini mewakili jumlah DNA yang ada dalam larutan Anda. Nilai ini biasanya ditentukan menggunakan metode spektrofotometri seperti NanoDrop atau uji fluorometrik seperti Qubit.
Volume Sampel: Total volume sampel DNA Anda dalam mikroliter (μL).
Bilangan Avogadro: Konstanta fundamental ini (6.022 × 10²³) mewakili jumlah molekul dalam satu mol zat.
Panjang DNA: Panjang total urutan DNA Anda dalam pasangan basis.
Berat Rata-Rata Pasangan Basis: Berat molekul rata-rata dari pasangan basis DNA adalah sekitar 660 g/mol. Nilai ini memperhitungkan berat rata-rata dari nukleotida dan ikatan fosfodiester dalam DNA.
Perkiraan Replikasi Genomik kami menyediakan antarmuka yang ramah pengguna untuk menghitung jumlah salinan DNA dengan cepat dan akurat. Ikuti langkah-langkah berikut untuk mendapatkan hasil yang tepat:
Di bidang input pertama, masukkan urutan DNA lengkap yang ingin Anda analisis. Ini harus menjadi urutan penuh di mana Anda ingin menghitung kejadian urutan target Anda.
Catatan penting:
Contoh urutan DNA yang valid:
1ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAGCTAG
2
Di bidang input kedua, masukkan urutan DNA spesifik yang ingin Anda hitung. Ini adalah urutan target yang jumlah salinannya ingin Anda tentukan.
Persyaratan:
Contoh urutan target yang valid:
1ATCG
2
Masukkan konsentrasi sampel DNA Anda dalam ng/μL (nanogram per mikroliter) dan volume dalam μL (mikroliter).
Nilai tipikal:
Setelah memasukkan semua informasi yang diperlukan, kalkulator akan secara otomatis menghitung jumlah salinan dari urutan target Anda. Hasilnya mewakili jumlah salinan yang diperkirakan dari urutan target Anda dalam seluruh sampel.
Bagian hasil juga mencakup:
Perkiraan Replikasi Genomik mencakup beberapa pemeriksaan validasi untuk memastikan hasil yang akurat:
Validasi Urutan DNA: Memastikan input hanya mengandung basis DNA yang valid (A, T, C, G).
Validasi Urutan Target: Memeriksa bahwa urutan target hanya mengandung basis DNA yang valid dan tidak lebih panjang dari urutan DNA utama.
Validasi Konsentrasi dan Volume: Memverifikasi bahwa nilai-nilai ini adalah angka positif.
Analisis jumlah salinan DNA memiliki banyak aplikasi di berbagai bidang biologi dan kedokteran:
Studi Ekspresi Gen: Mengkuantifikasi jumlah salinan dari suatu gen dapat membantu memahami tingkat ekspresinya dan fungsinya.
Analisis Organisme Transgenik: Menentukan jumlah salinan gen yang dimasukkan dalam organisme yang dimodifikasi secara genetik untuk menilai efisiensi integrasi.
Kuantifikasi Mikrobiota: Mengukur keberadaan urutan mikroba tertentu dalam sampel lingkungan atau klinis.
Pengujian Beban Virus: Mengkuantifikasi genom virus dalam sampel pasien untuk memantau perkembangan infeksi dan efektivitas pengobatan.
Diagnostik Kanker: Mengidentifikasi amplifikasi atau penghapusan gen onkogen dan gen penekan tumor.
Diagnosis Penyakit Genetik: Mendeteksi variasi jumlah salinan yang terkait dengan gangguan genetik seperti distrofi otot Duchenne atau penyakit Charcot-Marie-Tooth.
Farmakogenomik: Memahami bagaimana jumlah salinan gen mempengaruhi metabolisme dan respons obat.
Pengujian Prenatal: Mengidentifikasi kelainan kromosom seperti trisomi atau mikrodeletions.
Sebuah tim penelitian yang mempelajari kanker payudara mungkin menggunakan Perkiraan Replikasi Genomik untuk menentukan jumlah salinan gen HER2 dalam sampel tumor. Amplifikasi HER2 (jumlah salinan yang meningkat) terkait dengan kanker payudara yang agresif dan mempengaruhi keputusan pengobatan. Dengan menghitung jumlah salinan yang tepat, peneliti dapat:
Sementara kalkulator kami menyediakan metode yang sederhana untuk memperkirakan jumlah salinan DNA, teknik lain juga digunakan dalam penelitian dan pengaturan klinis:
PCR Kuantitatif (qPCR): Mengukur amplifikasi DNA secara real-time untuk menentukan jumlah salinan awal.
PCR Digital (dPCR): Mempartisi sampel menjadi ribuan reaksi individu untuk memberikan kuantifikasi absolut tanpa kurva standar.
Fluorescence In Situ Hybridization (FISH): Memvisualisasikan dan menghitung urutan DNA tertentu secara langsung dalam sel atau kromosom.
Comparative Genomic Hybridization (CGH): Membandingkan jumlah salinan urutan DNA antara sampel uji dan referensi.
Next-Generation Sequencing (NGS): Menyediakan profil jumlah salinan di seluruh genom dengan resolusi tinggi.
Setiap metode memiliki kelebihan dan keterbatasan dalam hal akurasi, biaya, throughput, dan resolusi. Kalkulator kami menawarkan pendekatan cepat dan mudah untuk estimasi awal atau ketika peralatan khusus tidak tersedia.
Konsep jumlah salinan DNA dan pentingnya dalam genetika telah berkembang secara signifikan selama beberapa dekade:
Dasar untuk analisis jumlah salinan DNA diletakkan dengan penemuan struktur DNA oleh Watson dan Crick pada tahun 1953. Namun, kemampuan untuk mendeteksi variasi jumlah salinan tetap terbatas hingga pengembangan teknik biologi molekuler pada tahun 1970-an.
Tahun 1980-an menyaksikan pengembangan teknik Southern blotting dan hibridisasi in situ yang memungkinkan ilmuwan untuk mendeteksi perubahan jumlah salinan berskala besar. Metode ini memberikan pandangan pertama tentang bagaimana variasi jumlah salinan dapat mempengaruhi ekspresi gen dan fenotipe.
Penemuan dan penyempurnaan Polymerase Chain Reaction (PCR) oleh Kary Mullis merevolusi analisis DNA. Pengembangan PCR kuantitatif (qPCR) pada tahun 1990-an memungkinkan pengukuran jumlah salinan DNA yang lebih tepat dan menjadi standar emas untuk banyak aplikasi.
Penyelesaian Proyek Genom Manusia pada tahun 2003 dan munculnya teknologi mikroarray dan pengurutan generasi berikutnya secara dramatis memperluas kemampuan kita untuk mendeteksi dan menganalisis variasi jumlah salinan di seluruh genom. Teknologi ini telah mengungkapkan bahwa variasi jumlah salinan jauh lebih umum dan signifikan daripada yang diperkirakan sebelumnya, berkontribusi pada baik keragaman genetik normal maupun penyakit.
Saat ini, metode komputasi dan alat bioinformatika telah lebih meningkatkan kemampuan kita untuk menghitung dan menginterpretasikan jumlah salinan DNA dengan akurat, menjadikan analisis ini dapat diakses oleh peneliti dan klinisi di seluruh dunia.
Berikut adalah implementasi perhitungan jumlah salinan DNA dalam berbagai bahasa pemrograman:
1def calculate_dna_copy_number(dna_sequence, target_sequence, concentration, volume):
2 """
3 Hitung jumlah salinan urutan DNA target.
4
5 Parameter:
6 dna_sequence (str): Urutan DNA lengkap
7 target_sequence (str): Urutan target untuk dihitung
8 concentration (float): Konsentrasi DNA dalam ng/μL
9 volume (float): Volume sampel dalam μL
10
11 Mengembalikan:
12 int: Jumlah salinan yang diperkirakan
13 """
14 # Bersihkan dan validasi urutan
15 dna_sequence = dna_sequence.upper().replace(" ", "")
16 target_sequence = target_sequence.upper().replace(" ", "")
17
18 if not all(base in "ATCG" for base in dna_sequence):
19 raise ValueError("Urutan DNA harus hanya mengandung karakter A, T, C, G")
20
21 if not all(base in "ATCG" for base in target_sequence):
22 raise ValueError("Urutan target harus hanya mengandung karakter A, T, C, G")
23
24 if len(target_sequence) > len(dna_sequence):
25 raise ValueError("Urutan target tidak boleh lebih panjang dari urutan DNA")
26
27 if concentration <= 0 or volume <= 0:
28 raise ValueError("Konsentrasi dan volume harus lebih besar dari 0")
29
30 # Hitung kejadian urutan target
31 count = 0
32 pos = 0
33 while True:
34 pos = dna_sequence.find(target_sequence, pos)
35 if pos == -1:
36 break
37 count += 1
38 pos += 1
39
40 # Konstanta
41 avogadro = 6.022e23 # molekul/mol
42 avg_base_pair_weight = 660 # g/mol
43
44 # Hitung jumlah salinan
45 total_dna_ng = concentration * volume
46 total_dna_g = total_dna_ng / 1e9
47 moles_dna = total_dna_g / (len(dna_sequence) * avg_base_pair_weight)
48 total_copies = moles_dna * avogadro
49 copy_number = count * total_copies
50
51 return round(copy_number)
52
53# Contoh penggunaan
54dna_seq = "ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAG"
55target_seq = "ATCG"
56conc = 10 # ng/μL
57vol = 20 # μL
58
59try:
60 result = calculate_dna_copy_number(dna_seq, target_seq, conc, vol)
61 print(f"Jumlah salinan yang diperkirakan: {result:,}")
62except ValueError as e:
63 print(f"Kesalahan: {e}")
64
1function calculateDnaCopyNumber(dnaSequence, targetSequence, concentration, volume) {
2 // Bersihkan dan validasi urutan
3 dnaSequence = dnaSequence.toUpperCase().replace(/\s+/g, '');
4 targetSequence = targetSequence.toUpperCase().replace(/\s+/g, '');
5
6 // Validasi urutan DNA
7 if (!/^[ATCG]+$/.test(dnaSequence)) {
8 throw new Error("Urutan DNA harus hanya mengandung karakter A, T, C, G");
9 }
10
11 // Validasi urutan target
12 if (!/^[ATCG]+$/.test(targetSequence)) {
13 throw new Error("Urutan target harus hanya mengandung karakter A, T, C, G");
14 }
15
16 if (targetSequence.length > dnaSequence.length) {
17 throw new Error("Urutan target tidak boleh lebih panjang dari urutan DNA");
18 }
19
20 if (concentration <= 0 || volume <= 0) {
21 throw new Error("Konsentrasi dan volume harus lebih besar dari 0");
22 }
23
24 // Hitung kejadian urutan target
25 let count = 0;
26 let pos = 0;
27
28 while (true) {
29 pos = dnaSequence.indexOf(targetSequence, pos);
30 if (pos === -1) break;
31 count++;
32 pos++;
33 }
34
35 // Konstanta
36 const avogadro = 6.022e23; // molekul/mol
37 const avgBasePairWeight = 660; // g/mol
38
39 // Hitung jumlah salinan
40 const totalDnaNg = concentration * volume;
41 const totalDnaG = totalDnaNg / 1e9;
42 const molesDna = totalDnaG / (dnaSequence.length * avgBasePairWeight);
43 const totalCopies = molesDna * avogadro;
44 const copyNumber = count * totalCopies;
45
46 return Math.round(copyNumber);
47}
48
49// Contoh penggunaan
50try {
51 const dnaSeq = "ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAG";
52 const targetSeq = "ATCG";
53 const conc = 10; // ng/μL
54 const vol = 20; // μL
55
56 const result = calculateDnaCopyNumber(dnaSeq, targetSeq, conc, vol);
57 console.log(`Jumlah salinan yang diperkirakan: ${result.toLocaleString()}`);
58} catch (error) {
59 console.error(`Kesalahan: ${error.message}`);
60}
61
1calculate_dna_copy_number <- function(dna_sequence, target_sequence, concentration, volume) {
2 # Bersihkan dan validasi urutan
3 dna_sequence <- gsub("\\s+", "", toupper(dna_sequence))
4 target_sequence <- gsub("\\s+", "", toupper(target_sequence))
5
6 # Validasi urutan DNA
7 if (!grepl("^[ATCG]+$", dna_sequence)) {
8 stop("Urutan DNA harus hanya mengandung karakter A, T, C, G")
9 }
10
11 # Validasi urutan target
12 if (!grepl("^[ATCG]+$", target_sequence)) {
13 stop("Urutan target harus hanya mengandung karakter A, T, C, G")
14 }
15
16 if (nchar(target_sequence) > nchar(dna_sequence)) {
17 stop("Urutan target tidak boleh lebih panjang dari urutan DNA")
18 }
19
20 if (concentration <= 0 || volume <= 0) {
21 stop("Konsentrasi dan volume harus lebih besar dari 0")
22 }
23
24 # Hitung kejadian urutan target
25 count <- 0
26 pos <- 1
27
28 while (TRUE) {
29 pos <- regexpr(target_sequence, substr(dna_sequence, pos, nchar(dna_sequence)))
30 if (pos == -1) break
31 count <- count + 1
32 pos <- pos + 1
33 }
34
35 # Konstanta
36 avogadro <- 6.022e23 # molekul/mol
37 avg_base_pair_weight <- 660 # g/mol
38
39 # Hitung jumlah salinan
40 total_dna_ng <- concentration * volume
41 total_dna_g <- total_dna_ng / 1e9
42 moles_dna <- total_dna_g / (nchar(dna_sequence) * avg_base_pair_weight)
43 total_copies <- moles_dna * avogadro
44 copy_number <- count * total_copies
45
46 return(round(copy_number))
47}
48
49# Contoh penggunaan
50tryCatch({
51 dna_seq <- "ATCGATCGATCGTAGCTAGCTAGCTAG"
52 target_seq <- "ATCG"
53 conc <- 10 # ng/μL
54 vol <- 20 # μL
55
56 result <- calculate_dna_copy_number(dna_seq, target_seq, conc, vol)
57 cat(sprintf("Jumlah salinan yang diperkirakan: %s\n", format(result, big.mark=",")))
58}, error = function(e) {
59 cat(sprintf("Kesalahan: %s\n", e$message))
60})
61
Jumlah salinan DNA mengacu pada berapa kali urutan DNA tertentu muncul dalam genom atau sampel. Dalam manusia, sebagian besar gen ada dalam dua salinan (satu dari masing-masing orang tua), tetapi jumlah ini dapat bervariasi karena variasi genetik, mutasi, atau proses penyakit. Menghitung jumlah salinan sangat penting untuk memahami gangguan genetik, perkembangan kanker, dan variasi genetik normal.
Perkiraan Replikasi Genomik memberikan perhitungan teoretis berdasarkan prinsip molekuler dan parameter input yang Anda berikan. Akurasinya bergantung pada beberapa faktor:
Untuk penelitian yang memerlukan kuantifikasi yang sangat tepat, teknik seperti PCR digital mungkin memberikan akurasi yang lebih tinggi, tetapi kalkulator kami menawarkan estimasi yang baik untuk banyak aplikasi.
Tidak, kalkulator ini dirancang khusus untuk urutan DNA dan menggunakan berat molekul spesifik DNA dalam perhitungannya. RNA memiliki sifat molekuler yang berbeda (mengandung urasil alih-alih timin dan memiliki berat molekul yang berbeda). Untuk kuantifikasi RNA, kalkulator jumlah salinan RNA khusus harus digunakan.
Kalkulator ini bekerja dengan nilai konsentrasi DNA positif apa pun. Namun, untuk sebagian besar sampel biologis, konsentrasi DNA biasanya berkisar antara 1 hingga 100 ng/μL. Konsentrasi yang sangat rendah (di bawah 1 ng/μL) mungkin memperkenalkan lebih banyak ketidakpastian dalam perhitungan karena keterbatasan pengukuran.
Kalkulator menghitung setiap kejadian dari urutan target, bahkan jika mereka tumpang tindih. Misalnya, dalam urutan "ATATAT", target "ATA" akan dihitung dua kali (posisi 1-3 dan 3-5). Pendekatan ini konsisten dengan bagaimana banyak teknik biologi molekuler mendeteksi urutan.
Ya, Anda dapat menggunakan kalkulator ini untuk memperkirakan jumlah salinan plasmid. Cukup masukkan urutan plasmid lengkap sebagai urutan DNA Anda dan wilayah spesifik yang menarik sebagai urutan target Anda. Pastikan untuk mengukur konsentrasi DNA plasmid dengan akurat untuk hasil yang dapat diandalkan.
Kalkulator ini hanya menerima basis DNA standar (A, T, C, G). Jika urutan Anda mengandung basis ambigu, Anda perlu menggantinya dengan basis spesifik berdasarkan pengetahuan terbaik Anda atau menghapus bagian tersebut sebelum menggunakan kalkulator.
Kalkulator dapat menangani jumlah salinan yang sangat besar dan akan menampilkannya dalam format yang mudah dibaca. Untuk nilai yang sangat besar, notasi ilmiah mungkin digunakan. Perhitungan yang mendasari mempertahankan presisi penuh terlepas dari besarnya hasil.
Sementara alat ini menghitung jumlah salinan DNA, ekspresi gen biasanya diukur pada tingkat RNA. Untuk analisis ekspresi gen, teknik seperti RT-qPCR, RNA-seq, atau mikroarray lebih tepat. Namun, jumlah salinan DNA dapat mempengaruhi ekspresi gen, sehingga analisis ini sering saling melengkapi.
Konsentrasi DNA memiliki hubungan linier langsung dengan jumlah salinan yang dihitung. Menggandakan konsentrasi akan menggandakan jumlah salinan yang diperkirakan, dengan asumsi semua parameter lain tetap konstan. Ini menyoroti pentingnya pengukuran konsentrasi yang akurat untuk hasil yang dapat diandalkan.
Bustin, S. A., Benes, V., Garson, J. A., Hellemans, J., Huggett, J., Kubista, M., ... & Wittwer, C. T. (2009). Pedoman MIQE: informasi minimum untuk publikasi eksperimen PCR kuantitatif real-time. Clinical chemistry, 55(4), 611-622.
D'haene, B., Vandesompele, J., & Hellemans, J. (2010). Profiling jumlah salinan yang akurat dan objektif menggunakan PCR kuantitatif real-time. Methods, 50(4), 262-270.
Hindson, B. J., Ness, K. D., Masquelier, D. A., Belgrader, P., Heredia, N. J., Makarewicz, A. J., ... & Colston, B. W. (2011). Sistem PCR digital berkecepatan tinggi untuk kuantifikasi absolut jumlah salinan DNA. Analytical chemistry, 83(22), 8604-8610.
Zhao, M., Wang, Q., Wang, Q., Jia, P., & Zhao, Z. (2013). Alat komputasi untuk deteksi variasi jumlah salinan (CNV) menggunakan data pengurutan generasi berikutnya: fitur dan perspektif. BMC bioinformatics, 14(11), 1-16.
Redon, R., Ishikawa, S., Fitch, K. R., Feuk, L., Perry, G. H., Andrews, T. D., ... & Hurles, M. E. (2006). Variasi global dalam jumlah salinan dalam genom manusia. Nature, 444(7118), 444-454.
Zarrei, M., MacDonald, J. R., Merico, D., & Scherer, S. W. (2015). Peta variasi jumlah salinan genom manusia. Nature reviews genetics, 16(3), 172-183.
Stranger, B. E., Forrest, M. S., Dunning, M., Ingle, C. E., Beazley, C., Thorne, N., ... & Dermitzakis, E. T. (2007). Dampak relatif variasi nukleotida dan jumlah salinan terhadap fenotipe ekspresi gen. Science, 315(5813), 848-852.
Alkan, C., Coe, B. P., & Eichler, E. E. (2011). Penemuan dan genotyping variasi struktural genom. Nature reviews genetics, 12(5), 363-376.
Kalkulator Jumlah Salinan DNA Genomik menyediakan cara yang kuat namun dapat diakses untuk memperkirakan jumlah salinan dari urutan DNA tertentu dalam sampel Anda. Dengan menggabungkan prinsip molekuler dengan desain yang ramah pengguna, alat ini membantu peneliti, siswa, dan profesional dengan cepat mendapatkan data kuantitatif yang berharga tanpa peralatan khusus atau protokol yang kompleks.
Memahami jumlah salinan DNA sangat penting untuk berbagai aplikasi dalam genetika, biologi molekuler, dan kedokteran. Apakah Anda mempelajari amplifikasi gen dalam kanker, mengkuantifikasi integrasi transgen, atau menyelidiki variasi jumlah salinan dalam gangguan genetik, kalkulator kami menawarkan pendekatan yang sederhana untuk mendapatkan informasi yang Anda butuhkan.
Kami mendorong Anda untuk mencoba Perkiraan Replikasi Genomik dengan urutan DNA Anda sendiri dan menjelajahi bagaimana perubahan dalam konsentrasi, volume, dan urutan target mempengaruhi jumlah salinan yang dihitung. Pengalaman langsung ini akan memperdalam pemahaman Anda tentang prinsip kuantifikasi molekuler dan membantu Anda menerapkan konsep-konsep ini pada pertanyaan penelitian spesifik Anda.
Untuk pertanyaan atau umpan balik tentang kalkulator, silakan merujuk ke bagian FAQ atau hubungi tim dukungan kami.
Temukan lebih banyak alat yang mungkin berguna untuk alur kerja Anda