מחשבון חוק ביר-למברט - חשב ספיגה מיידית
מחשבון חוק ביר-למברט המחשב ספיגה אופטית לפי אורך נתיב, מקדם ספיגה מולרי וריכוז החומר, ומציג גם שיעור העברה ואחוז ספיגה. לספקטרוסקופיה וכימות חלבונים.
מחשבון חוק בר-למברט
נוסחה
A = ε × c × l
כאשר A היא בליעה, ε היא מקדם הבליעה המולרי, c היא הריכוז, ו-l הוא אורך הנתיב.
תרשים
זה מראה את אחוז האור הנבלע על ידי התמיסה.
תיעוד
מהו חוק ביר-למברט?
כאשר אור עובר דרך תמיסה צבועה, חלק ממנו נבלע. חוק ביר-למברט (הנקרא גם חוק ביר) מספר לנו בדיוק כמה אור נבלע על בסיס שלושה גורמים: ריכוז התמיסה, החומר שהיא מכילה, והמרחק שהאור עובר דרכה.
עיקרון זה הוא הבסיס לעבודת ספקטרוסקופיה במעבדות מחקר, מחלקות בקרת איכות בתעשייה הפרמצבטית ובאבחון קליני. תשתמש בו באופן קבוע אם אתה עובד עם ספקטרופוטומטרים UV-Vis, בין אם אתה מודד ריכוזי חלבונים ב-280 ננומטר, עוקב אחר קינטיקה של אנזימים או מאמת טוהר כימי.
המחשבון שלנו מבצע את החישוב מיידית. הזן את אורך הנתיב, מקדם הבליעה המולרי והריכוז - וקבל את ערך הבליעה. פשוט כך.
חוק בר-למברט
חוק בר-למברט מבוטא מתמטית כך:
כאשר:
- A היא הבליעה (ללא מימדים)
- ε (אפסילון) היא המקדם המולרי של בליעה או מקדם כיבוי מולרי [L/(mol·cm)]
- c היא הריכוז של המין הבולע [mol/L]
- l הוא אורך הנתיב של הדגימה [cm]
הבליעה היא כמות ללא מימדים, המבוטאת לעתים קרובות ב"יחידות בליעה" (AU). היא מייצגת את לוגריתם היחס בין עוצמת האור הנכנס לעוצמת האור המועבר:
כאשר:
- I₀ היא עוצמת האור הנכנס
- I היא עוצמת האור המועבר
- T היא ההעברה (I/I₀)
היחס בין ההעברה (T) לבליעה (A) יכול להיות מבוטא גם כך:
אחוז האור הנבלע על ידי התמיסה יכול להיות מחושב כך:
מתי החוק נכשל: מגבלות מעשיות
הנה מה שאתה צריך לדעת מניסיון מעבדתי אמיתי. חוק בר-למברט עובד נפלא בתנאים אידיאליים, אבל הוא ייכשל אם:
הריכוז גבוה מדי (בדרך כלל מעל 0.01 M): מולקולות מתחילות לפעול זו עם זו אלקטרוסטטית, והיחס הופך ללא לינארי. ראיתי חוקרים מבזבזים שעות בטיפול בספקטרופוטומטר כאשר הבעיה האמיתית הייתה פשוט דגימה בריכוז גבוה מדי. תמיד מהלל תחילה אם הקריאה הראשונית שלך נראית לא תקינה.
הדגימה מפזרת אור: תמיסות עכורות, תרחיפים, או כל דבר עם חלקיקים ייתנו לך קריאות בליעה מוגזמות. המכשיר לא יכול להבחין בין אור בלוע לאור מפוזר.
שימוש באור רחב-פס במקום מונוכרומטי: רוב מעבדות ההוראה משתמשות באור "מונוכרומטי" שהוא למעשה פס ברוחב של 5-10 ננומטר. זה בדרך כלל בסדר. אבל אם אתה משתמש במסנן במקום מונוכרומטור, צפה לסטיות.
הדגימה משתנה כימית: כמה תרכובות מתפרקות תחת אור UV או עוברות שינויי pH במהלך המדידה. בדוק את יציבות הבסיס שלך.
תנודות טמפרטורה: ערכי בליעה מולריים תלויים בטמפרטורה, והתפשטות תרמית משפיעה על הריכוז. שמור על טמפרטורה עקבית אם הדיוק חשוב.
כיצד להשתמש במחשבון חוק בר-למברט
שלושה קלטים, חישוב אחד. כך זה עובד:
1. אורך נתיב (l) – זהו רוחב הקיבית, כמעט תמיד 1 ס"מ בספקטרופוטומטריה סטנדרטית. יישומים מיוחדים מסוימים משתמשים בתאים בגודל 0.1 ס"מ או 10 ס"מ. בדקו את הסימונים על הקיבית אם אינכם בטוחים.
2. ספיגתיות מולרית (ε) – מצאו את הערך הזה בטבלאות ייחוס או בספרות עבור התרכובת הספציפית שלכם באורך הגל שבחרתם. עבור חלבונים, הוא נע בדרך כלל בטווח של 40,000-60,000 L/(mol·cm) ב-280 נמ. עבור מולקולות קטנות, בדקו את ספר הכימיה של NIST או ספרות מדעית מבוקרת. היחידות הן L/(mol·cm).
3. ריכוז (c) – הזינו את ריכוז התמיסה שלכם ב-mol/L (מולריות). אם אתם עובדים ב-mg/mL או ביחידות אחרות, המירו תחילה באמצעות המשקל המולקולרי.
המחשבון מכפיל שלושה ערכים אלה: A = ε × c × l
תראו הן את ערך הספיגה והן ייצוג חזותי של אחוז ספיגת האור. ספיגה של 1.0 משמעה שנספג 90% מהאור; 2.0 משמעה ספיגה של 99%.
אימות קלט
המחשבון מבצע את האימותים הבאים על הקלטים שלכם:
- כל הערכים חייבים להיות מספרים חיוביים
- שדות ריקים אינם מותרים
- קלטים לא-מספריים נדחים
אם תזינו נתונים לא תקינים, תופיע הודעת שגיאה שתנחה אתכם לתקן את הקלט לפני שניתן יהיה לבצע חישוב.
פרשנות התוצאות שלכם
ערכי ספיגה מספרים לכם כמה אור נלכד על ידי התמיסה:
- A = 0: צלול לחלוטין—אין ספיגה באורך גל זה
- A = 0.3-0.9: טווח אופטימלי לרוב העבודה הכמותית (מיטביות וליניאריות)
- A = 1.0: נספג 90% מהאור (10% עובר)
- A = 2.0: נספג 99% (רק 1% עובר)
- A > 2.5: אתם מחוץ לטווח האמין של רוב המכשירים—דללו את הדגימה
מה שעובד בפועל: שמרו על הדגימות בטווח 0.3-0.9 ככל האפשר. מתחת ל-0.3, אתם נאבקים ברעש המכשיר. מעל 1.5, אור מפוזר הופך לבעיה ודיוק יורד. אם הקריאה שלכם מעל 2, דללו פי 10 לפחות ומדדו מחדש.
היכן תשתמש בזה בפועל
חוק בר-למברט מופיע ללא הרף בעבודה מעבדתית במספר תחומים:
כימיה אנליטית
ניתוח כמותי הוא מקרה השימוש העיקרי—מודדים ספיגה, מציבים במשוואה, ומחשבים ריכוזים לא ידועים. מעבדות סביבתיות משתמשות בזה מדי יום לניתוח חנקות, זרחות, ויוני מתכות במדגמי מים. מחלקות בקרת איכות בייצור כימי נסמכות על כך כדי לאמת ריכוזי אצווה לפני שחרור.
תרחיש נפוץ: מקבלים דגימה בריכוז לא ידוע. מודדים את הספיגה באורך גל המתאים, מחלקים ב-(ε × l), וכך יש לכם את הריכוז. בנו עקומת כיול אם אתם מעבדים מספר דגימות.
ביוכימיה וביולוגיה מולקולרית
כימות חלבונים ב-280 נמ הוא נוהג סטנדרטי. לפני כל בדיקת חלבון, תמדדו A280 להערכת ריכוז. רוב החלבונים סופגים כאן בשל שאריות טריפטופן וטירוזין.
כימות DNA/RNA ב-260 נמ פשוט אפילו יותר—ספיגה של 1.0 מתאימה לכ-50 מק"ג/מ"ל עבור DNA דו-גדילי או 40 מק"ג/מ"ל עבור RNA. בדקו גם את היחס A260/A280 (צריך להיות ~1.8 עבור DNA, ~2.0 עבור RNA) להערכת טוהר.
מחקרי קינטיקת אנזימים עוקבים אחר המרת סובסטרט על ידי מעקב אחר שינויי ספיגה בזמן. עבור תגובות תלויות NADH, צופים בירידת ספיגה ב-340 נמ ככל ש-NADH מחומצן.
תעשיית התרופות
בדיקות המסה משתמשות בחוק בר-למברט למדידת קצב שחרור החומר הפעיל מטבליות. סוכנויות רגולטוריות כמו ה-FDA דורשות נתונים אלה לאישור תרופה.
מחקרי יציבות עוקבים אחר פירוק תרופות על ידי מעקב אחר ספיגה במשך שבועות או חודשים בטמפרטורות שונות. כאשר אתם רואים שינוי בספיגה, אתם יודעים שמשהו מתפרק.
אבחון קליני
רוב המנתחים האוטומטיים במעבדות בתי חולים פועלים על עיקרון זה. בדיקות גלוקוז, בדיקות אנזימי כבד, מדידות בילירובין—כולם משתמשים בתגובות קולורימטריות ומודדים שינויי ספיגה.
מזון ומשקאות
צבע בירה נמדד באופן מילולי באמצעות חוק בר-למברט (שיטת EBC ב-430 נמ). ניתוח יין, בקרת איכות משקאות קלים, ואימות צבעי מזון תלויים כולם במדידות ספקטרופוטומטריות.
דוגמאות עבודה מהמעבדה
דוגמה 1: ריכוז חלבון לאחר טיהור
טיהרת זה עתה חלבון רקומביננטי וצריך לדעת את ריכוזו לפני הכנת הניסוי. לחלבון שלך ε₂₈₀ = 44,000 L/(mol·cm) (מחושב מרצף החומצות האמיניות באמצעות כלי ExPASy ProtParam).
מדידה:
- קיבוע קוורץ סטנדרטי באורך 1 ס"מ
- ספיגה ב-280 נ"מ: A = 0.523
- ריק: בופר ששימש לדיאליזה
חישוב: c = A / (ε × l) = 0.523 / (44,000 × 1) = 1.19 × 10⁻⁵ מול/ל' = 11.9 מיקרומול/ל'
מושלם ליישומים עוקבים. אם היית מקבל A > 1.5, היית צריך לדלל ולמדוד מחדש.
דוגמה 2: אימות תמיסת מלאי
הכנת מה שאמור להיות תמיסה בריכוז 2.0 מילימולרי של קליום פרמנגנט (KMnO₄) לעבודה אנליטית. הגיע הזמן לאמת לפני השימוש בתקני כיול.
פרמטרים ידועים:
- ספיגות מולרית של KMnO₄ ב-525 נ"מ: ε = 2,420 L/(mol·cm) (מהספרות)
- שימוש בקיבוע 1 ס"מ (דיללת פי 10 לפני המדידה)
- ריכוז מטרה: 2.0 מילימולרי (אך מודד ב-0.2 מילימולרי לאחר דילול)
ספיגה צפויה: A = ε × c × l = 2,420 × 0.0002 × 1 = 0.484
מדדת A = 0.472. זה בטווח של 2.5% מהצפוי - טוב מספיק לרוב העבודות. אם היית מודד 0.42 או 0.53, היית יודע שמשהו השתבש בהכנת התמיסה וצריך לחשב מחדש את הריכוז בפועל או להכין תמיסה חדשה.
כאשר חוק ביר-למברט אינו מספיק
לפעמים אתה צריך גישות שונות:
תיאוריית קובלקה-מונק מטפלת במדיות מפוזרות (אבקות, נייר, צבעים) שם חוק ביר-למברט נכשל לחלוטין. היא מביאה בחשבון הן בליעה והן פיזור, מה שהופך אותה חיונית עבור דגימות מוצקות או תמיסות עכורות מאוד.
חוק ביר-למברט המתוקן מוסיף תנאי תיקון עבור דגימות בריכוזים גבוהים: A = εcl + β(εcl)². השתמש בו כאשר אתה עובד מעל 0.01 M וזקוק לדיוק למרות אי-לינאריות.
ניתוח רב-רכיבי פותר עבור מספר מיני מרכיבים בולעים בו-זמנית באמצעות אלגברה מטריציאלית ומדידות במספר אורכי גל. חיוני בעת ניתוח תערובות שבהן למרכיבים יש ספקטרות חופפות.
ספקטרוסקופיה דיפרנציאלית יכולה לפתור פסגות חופפות על ידי ניתוח dA/dλ במקום A ישירות. עוזרת כאשר אתה מתמודד עם מטריצות מורכבות או צריך להסיר סחף בסיסי.
הקשר היסטורי
שלושה מדענים בנו חוק זה על פני יותר ממאה שנים:
פייר בוגר (1729) תיאר לראשונה כיצד עוביים שווים של חומר סופגים שברים שווים של אור - תוך קביעת היחס האקספוננציאלי בין אורך נתיב לבין העברה.
יוהן היינריך למברט (1760) פירמל את המתמטיקה בספרו "פוטומטריה", והראה כי הספיגה גדלה באופן לינארי עם אורך הנתיב.
אוגוסט בר (1852) הרחיב את החוק כדי לכלול ריכוז, תוך הדגמה שהספיגה יחסית גם לכמות המינים הסופגים הנוכחים.
יחד, עבודתם יצרה בסיס כמותי לכימיה אנליטית שאנו עדיין משתמשים בו מדי יום בספקטרוסקופיה מודרנית.
מימושי תכנות
להלן כמה דוגמאות קוד המראות כיצד ליישם את חוק בר-למברט בשפות תכנות שונות:
1' נוסחת Excel לחישוב סופג אור
2=PathLength*MolarAbsorptivity*Concentration
3
4' פונקציית Excel VBA לחוק בר-למברט
5Function CalculateAbsorbance(PathLength As Double, MolarAbsorptivity As Double, Concentration As Double) As Double
6 CalculateAbsorbance = PathLength * MolarAbsorptivity * Concentration
7End Function
8
9' חישוב העברה מסופג אור
10Function CalculateTransmittance(Absorbance As Double) As Double
11 CalculateTransmittance = 10 ^ (-Absorbance)
12End Function
13
14' חישוב אחוז הנספג
15Function CalculatePercentAbsorbed(Transmittance As Double) As Double
16 CalculatePercentAbsorbed = (1 - Transmittance) * 100
17End Function
181import numpy as np
2import matplotlib.pyplot as plt
3
4def calculate_absorbance(path_length, molar_absorptivity, concentration):
5 """
6 חישוב סופג אור באמצעות חוק בר-למברט
7
8 פרמטרים:
9 path_length (float): אורך נתיב בס"מ
10 molar_absorptivity (float): ספיגות מולרית ב-L/(mol·cm)
11 concentration (float): ריכוז ב-mol/L
12
13 מחזיר:
14 float: ערך סופג אור
15 """
16 return path_length * molar_absorptivity * concentration
17
18def calculate_transmittance(absorbance):
19 """המרת סופג אור להעברה"""
20 return 10 ** (-absorbance)
21
22def calculate_percent_absorbed(transmittance):
23 """חישוב אחוז האור הנספג"""
24 return (1 - transmittance) * 100
25
26# שימוש לדוגמה
27path_length = 1.0 # ס"מ
28molar_absorptivity = 1000 # L/(mol·cm)
29concentration = 0.001 # mol/L
30
31absorbance = calculate_absorbance(path_length, molar_absorptivity, concentration)
32transmittance = calculate_transmittance(absorbance)
33percent_absorbed = calculate_percent_absorbed(transmittance)
34
35print(f"סופג אור: {absorbance:.4f}")
36print(f"העברה: {transmittance:.4f}")
37print(f"אחוז נספג: {percent_absorbed:.2f}%")
38
39# שרטוט סופג אור מול ריכוז
40concentrations = np.linspace(0, 0.002, 100)
41absorbances = [calculate_absorbance(path_length, molar_absorptivity, c) for c in concentrations]
42
43plt.figure(figsize=(10, 6))
44plt.plot(concentrations, absorbances)
45plt.xlabel('ריכוז (mol/L)')
46plt.ylabel('סופג אור')
47plt.title('חוק בר-למברט: סופג אור מול ריכוז')
48plt.grid(True)
49plt.show()
501/**
2 * חישוב סופג אור באמצעות חוק בר-למברט
3 * @param {number} pathLength - אורך נתיב בס"מ
4 * @param {number} molarAbsorptivity - ספיגות מולרית ב-L/(mol·cm)
5 * @param {number} concentration - ריכוז ב-mol/L
6 * @returns {number} ערך סופג אור
7 */
8function calculateAbsorbance(pathLength, molarAbsorptivity, concentration) {
9 return pathLength * molarAbsorptivity * concentration;
10}
11
12/**
13 * חישוב העברה מסופג אור
14 * @param {number} absorbance - ערך סופג אור
15 * @returns {number} ערך העברה (בין 0 ל-1)
16 */
17function calculateTransmittance(absorbance) {
18 return Math.pow(10, -absorbance);
19}
20
21/**
22 * חישוב אחוז האור הנספג
23 * @param {number} transmittance - ערך העברה (בין 0 ל-1)
24 * @returns {number} אחוז האור הנספג (0-100)
25 */
26function calculatePercentAbsorbed(transmittance) {
27 return (1 - transmittance) * 100;
28}
29
30// שימוש לדוגמה
31const pathLength = 1.0; // ס"מ
32const molarAbsorptivity = 1000; // L/(mol·cm)
33const concentration = 0.001; // mol/L
34
35const absorbance = calculateAbsorbance(pathLength, molarAbsorptivity, concentration);
36const transmittance = calculateTransmittance(absorbance);
37const percentAbsorbed = calculatePercentAbsorbed(transmittance);
38
39console.log(`סופג אור: ${absorbance.toFixed(4)}`);
40console.log(`העברה: ${transmittance.toFixed(4)}`);
41console.log(`אחוז נספג: ${percentAbsorbed.toFixed(2)}%`);
421public class BeerLambertLaw {
2 /**
3 * חישוב סופג אור באמצעות חוק בר-למברט
4 *
5 * @param pathLength אורך נתיב בס"מ
6 * @param molarAbsorptivity ספיגות מולרית ב-L/(mol·cm)
7 * @param concentration ריכוז ב-mol/L
8 * @return ערך סופג אור
9 */
10 public static double calculateAbsorbance(double pathLength, double molarAbsorptivity, double concentration) {
11 return pathLength * molarAbsorptivity * concentration;
12 }
13
14 /**
15 * חישוב העברה מסופג אור
16 *
17 * @param absorbance ערך סופג אור
18 * @return ערך העברה (בין 0 ל-1)
19 */
20 public static double calculateTransmittance(double absorbance) {
21 return Math.pow(10, -absorbance);
22 }
23
24 /**
25 * חישוב אחוז האור הנספג
26 *
27 * @param transmittance ערך העברה (בין 0 ל-1)
28 * @return אחוז האור הנספג (0-100)
29 */
30 public static double calculatePercentAbsorbed(double transmittance) {
31 return (1 - transmittance) * 100;
32 }
33
34 public static void main(String[] args) {
35 double pathLength = 1.0; // ס"מ
36 double molarAbsorptivity = 1000; // L/(mol·cm)
37 double concentration = 0.001; // mol/L
38
39 double absorbance = calculateAbsorbance(pathLength, molarAbsorptivity, concentration);
40 double transmittance = calculateTransmittance(absorbance);
41 double percentAbsorbed = calculatePercentAbsorbed(transmittance);
42
43 System.out.printf("סופג אור: %.4f%n", absorbance);
44 System.out.printf("העברה: %.4f%n", transmittance);
45 System.out.printf("אחוז נספג: %.2f%%%n", percentAbsorbed);
46 }
47}
48שאלות נפוצות
מה משמש חוק ביר-למברט?
הוא מכמת כמה אור תמיסה בולעת על בסיס מה שיש בה, עד כמה היא מרוכזת, ועד כמה האור עובר דרכה. משתמשים בו כדי לקבוע ריכוזים לא ידועים על ידי מדידת בליעה—הבסיס של ספקטרופוטומטריית UV-Vis.
מהם היחידות הנכונות לחישובי חוק ביר-למברט?
יחידות סטנדרטיות הן:
- אורך מסלול (l): סנטימטרים (cm)—בדרך כלל 1 ס"מ
- ספיגתיות מולרית (ε): L/(mol·cm)—מוצאים זאת בטבלאות עיון
- ריכוז (c): mol/L (מולריות)
- בליעה (A): ללא מימד, אם כי לפעמים מסומנת כ-"AU"
ערבוב יחידות אלה יגרום לחישוב שגוי. תמיד המירו תחילה ליחידות סטנדרטיות אלה.
מדוע קריאת הבליעה שלי אינה לינארית עם הריכוז?
מספר סיבות נפוצות:
- ריכוז גבוה מדי (מעל 0.01 M)—מולקולות מגיבות והחוק מתפרק
- דגימה עכורה—פיזור תורם לבליעה נראית
- אורך גל שגוי—אינכם בנקודת מקסימום הבליעה
- רוויית מכשיר—בליעה מעל 2-3 חורגת מטווח הגלאי
- אור זר—משפיע על קריאות מעל A = 1.5
צעד ראשון: דללו את הדגימה פי 10 ומדדו מחדש. אם הלינאריות משתפרת, הריכוז היה הבעיה.
איך מוצאים ספיגתיות מולרית לתרכובת שלי?
בדקו תחילה בספרות מפורסמת—היא תלויית אורך גל ותמיסה. לחלבונים, השתמשו בכלי ExPASy ProtParam לחישוב מרצף. לתרכובות קטנות, בדקו את NIST Chemistry WebBook או מאמרי מחקר מקוריים.
אם לא זמין, קבעו באופן ניסויי: מדדו בליעה של תמיסות בריכוזים ידועים במדויק, ואז חשבו ε = A / (c × l).
האם אפשר למדוד תערובות עם מספר תרכובות בולעות?
כן, אם הרכיבים אינם מגיבים כימית. הבליעה הכוללת היא מצטברת:
A = (ε₁c₁ + ε₂c₂ + ... + εₙcₙ) × l
תצטרכו למדוד במספר אורכי גל ולפתור משוואות סימולטניות כדי לקבוע ריכוזים אינדיבידואליים. כך עובד ניתוח רב-רכיבי בכימיה אנליטית.
מה ההבדל בין בליעה לצפיפות אופטית?
אותו דבר. "צפיפות אופטית" נפוץ בביולוגיה ומיקרוביולוגיה, בעוד "בליעה" שולטת בכימיה. שניהם מתייחסים ל-log₁₀(I₀/I). השתמשו במונח שתחום העדפתכם מעדיף.
מהו טווח הבליעה האופטימלי למדידות מדויקות?
0.3 עד 0.9 נותן את התוצאות הטובות ביותר ברוב המכשירים. מתחת ל-0.3, רעש שולט. מעל 1.5, שגיאות אור זר גדלות. מעל 2.5, רוב הספקטרופוטומטרים הופכים בלתי אמינים.
אם הקריאה שלכם מחוץ לטווח זה, דללו (אם גבוהה מדי) או השתמשו בתא עם אורך מסלול ארוך יותר (אם נמוכה מדי).
האם טמפרטורה משפיעה על מדידות חוק ביר-למברט?
בהחלט. ספיגתיות מולרית משתנה עם הטמפרטורה, תמיסות מתרחבות תרמית (משנות ריכוז), וכמה תרכובות יש להן שיווי משקל תלוי טמפרטורה.
לעבודה שגרתית, סטייה של ±2°C בדרך כלל סבירה. לעבודה מדויקת, תרמוסטטו את הדגימות והשתמשו בערכי ε מתוקנים טמפרטורה. זה חשוב במיוחד למדידות קינטיות ובדיקות אנזים.
באיזה אורך גל עלי להשתמש למדידה שלי?
בחרו אורך גל בו:
- התרכובת שלכם בולעת בחוזקה (קרוב ל-λmax אידאלי)
- חומרים מפריעים אינם בולעים
- הבליעה משתנה בהדרגה עם אורך הגל (נמנעים מבעיות דיוק אורך גל)
לחלבונים: 280 נ"מ. ל-DNA/RNA: 260 נ"מ. ל-NADH: 340 נ"מ. לתרכובות מותאמות אישית, בצעו סריקת ספקטרום מלאה תחילה כדי לזהות את אורך הגל הטוב ביותר.
האם אפשר להשתמש בחוק ביר-למברט לגזים וגופים מוצקים?
גזים: כן, בהחלט. ניטור CO₂ אטמוספרי ומזהמים מסתמך עליו.
מוצקים: רק אם הם שקופים ואינם מפזרים אור. לאבקות, נייר, או כל דבר עכור, השתמשו בתיאוריית קובלקה-מונק במקום—חוק ביר-למברט ייתן תוצאות חסרות היגיון.
מקורות וקריאה נוספת
ספרות ראשונית:
-
Beer, A. (1852). "קביעת הבליעה של אור אדום בנוזלים צבועים". אנלן דר פיזיק אונד כימיה, 86: 78–88.
-
Swinehart, D. F. (1962). "החוק של Beer-Lambert". כתב עת כימי חינוכי, 39(7): 333-335. doi:10.1021/ed039p333
-
Mayerhöfer, T. G., Pahlow, S., & Popp, J. (2020). "חוק Bouguer-Beer-Lambert: מאיר אור על הלא ברור". כימפיזיכימ, 21(18): 2029-2046. doi:10.1002/cphc.202000464
משאבים סמכותיים:
- ספר הכימיה של NIST - נתוני הפניה לתרכובות כימיות כולל ספקטרות בליעה
- ספר הזהב של IUPAC: חוק Beer-Lambert - הגדרות וטרמינולוגיה רשמיות של IUPAC
- ExPASy ProtParam - חישוב ספיגתיות מולרית של חלבון מרצף אמינו חומצות
- אטלס ספקטרלי UV-Vis של NIST - ספקטרות הפניה סטנדרטיות
ספרי לימוד:
- Harris, D. C. (2015). ניתוח כימי כמותי (מהדורה 9). W. H. Freeman and Company.
- Skoog, D. A., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2017). עקרונות של ניתוח מכשירי (מהדורה 7). Cengage Learning.
- Lakowicz, J. R. (2006). עקרונות של ספקטרוסקופיית פלואורסצנציה (מהדורה 3). Springer.
התחל לחשב ספיגה עכשיו
השתמש במחשבון זה כדי לקבוע במהירות ערכי ספיגה עבור עבודת הספקטרוסקופיה שלך. בין אם אתה מכמת חלבונים, מאמת ריכוזי תמיסות, או מבצע בדיקות כימיה אנליטית, מחשבון חוק ביר-למברט מטפל בחישובים כך שתוכל להתמקד במחקר שלך.